上海市科学技术发展基金(06DZ05139)
- 作品数:2 被引量:4H指数:2
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- 抗苏丹红单链Fab抗体的构建、表达及功能鉴定被引量:2
- 2009年
- 从分泌抗苏丹红Ⅰ单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株SU211中克隆抗体轻链Lc基因和重链Fd基因,将Lc、Fd基因以及Linker克隆到载体pET24a(+)中,构建scFab表达载体并在E.coli BL21(DE3)获得表达,SDSPAGE和Westernblot分析表明其表达形式为包涵体,相对分子质量约为57 kD,与理论预期值相符。经复性后,ELISA鉴定结果表明复性抗体对苏丹红Ⅰ具有很高的结合特异性。本研究为新型基因工程抗体的构建以及苏丹红新型免疫检测技术的建立奠定基础。
- 石凌超韩红辉唐喆伟杜冰李恺王群钱旻
- 关键词:苏丹红I包涵体复性酶联免疫吸附测定
- 噬菌体抗体库中筛选抗GST单链抗体及其活性鉴定被引量:2
- 2010年
- 从Tomlinson(I+J)噬菌体抗体库中筛选获得了特异性抗GST蛋白的单链抗体(scFv),并在E.coliHB2151进行表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,scFv可在细菌周质腔中进行可溶性表达,其分子量约为30 kD,与理论预期值相符;ELISA鉴定结果显示,周质腔中的scFv具有抗原结合功能,而且这种结合可以被GST纯蛋白所抑制,其IC50值约为3.07 ng/ml,证明该scFv具有特异性结合GST蛋白的活性。本研究表明,利用噬菌体抗体库技术可以不经过免疫就能获得高特异性的人源化抗GST蛋白的scFv。
- 唐喆伟韩红辉杜冰王群钱旻李恺
- 关键词:噬菌体抗体库单链抗体GST