国家自然科学基金(81300670)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第二医院更多>>
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- KLF14基因过表达对改善Hepa1-6小鼠肝癌细胞胰岛素抵抗的作用
- 2015年
- 目的探讨KLF14基因过表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6胰岛素抵抗的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-QPCR)检测KLF14基因m RNA在健康C57BL/6J小鼠各组织的表达分布情况;构建小鼠KLF14基因重组真核表达质粒p IRES2-EGFP-KLF14并转染Hepa1-6细胞,RT-PCR法检测KLF14基因m RNA的表达;Western印迹检测KLF14及p-AKT蛋白水平的表达。结果成功构建p IRES2-EGFP-KLF14质粒;转染肝癌细胞48 h后,KLF14 m RNA和蛋白水平明显高于对照组和空载组(P<0.01);转录水平上KLF14基因在小鼠体内普遍表达,其m RNA相对表达量由高到低依次为心脏、骨骼肌、肝脏、脂肪、小肠、肾脏、脑、肺、胃、脾、附睾;非转染组给予血清干预后,正常人血清处理组和糖尿病病人血清处理组无明显差异;而转染组给予血清干预后,糖尿病病人血清处理组p-AKT表达量较正常人血清处理组明显增加;在胰岛素刺激情况下,无论转染组或非转染组,给予PI3K抑制剂LY294002后,p-AKT表达受抑。结论 KLF14在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中发挥一定作用;KLF14基因过表达可促进AKT的活化,并且其增加胰岛素敏感性的作用在糖尿病状态下较正常人更为明显。
- 代继桓李伶杨刚毅任艳贾彦军罗小河冉文侠曾梦
- 关键词：基因表达胰岛素抵抗
- JAZF1基因调节棕榈酸诱导肝细胞促炎因子表达的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨JAZF1过表达对棕榈酸诱导肝细胞促炎因子肿瘤坏死因子（TNF）α、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及白细胞介素（IL）-8表达的影响。方法采用棕榈酸作用于肝细胞以构建肝细胞脂肪变性模型，并行油红O染色；将Ad—JAZF1转染入脂肪变性的肝细胞模型中，用RT-pCR法检测转染前后肝细胞JAZF1、TNFα、MCP-1及IL-8mRNA表达，Westem blot法检测JAZF1蛋白表达水平，酶联免疫吸附法检测上述促炎因子的分泌情况。对数据的比较，组内采用配对t检验；组问采用方差分析，进一步两两比较采用LSD法。结果与对照组相比，不同浓度（0、0．125、0．25、0．5、1mmol／L）棕榈酸诱导肝细胞促炎因子TNFα、MCP-1及IL-8mRNA的表达，其相对表达量随着浓度升高呈逐渐升高趋势（P〈0．01），但在0．5mmol／L和1mmol／L浓度组间，差异没有统计学意义。以0．25mmol／L棕榈酸作用于肝细胞0、6、12、24、48h，促炎因子TNFα、MCP-1及IL-8mRNA的相对表达水平随时间延长逐渐升高，在12h达高峰，随后逐渐下降，呈时间依赖性，且各时间组组间差异均有统计学意义（FTNFα=26．51，FMCP-1=57．20，FIL-8=353．85，P值均〈0．01）。与Ad-GFP空载体组相比，Ad—JAZFl转染组肝细胞JAZF1 mRNA和蛋白质的相对表达水平明显增高。JAZF1过表达可以抑制肝细胞中由棕榈酸诱导的TNFα、MCP-1及IL-8mRNA的表达，使其相对表达量分别降低89．69％、77．68％及83．21％护〈0．01），同时TNFα、MCP-1及IL-8相对分泌量也分别减少37％、37％及41％（P〈0．01）。结论棕榈酸能促进肝细胞促炎因子mRNA的表达；JAZF1基因过表达能够抑制棕榈酸诱导的肝细胞促炎因子的表达及释放。
- 刘瑞林志敏贾彦军杨刚毅李伶李钶张利莉
- 关键词：胰岛素抗药性脂肪肝促炎因子棕榈酸
