国家自然科学基金(31260214)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 菠萝蜜过氧化物酶活性部位的研究被引量：1
- 2016年
- 以菠萝蜜果肉过氧化物酶(peroxidase,POD)为研究对象,用丁二酮、碳化二亚胺(N-ethylN’-3-dimethylaminopropyl carbodiimide,EDC)、N-乙酰咪唑(N-acetylimidazole,NAI)、β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,MT)、对-氯汞苯甲酸(parachloro-mercuri-benzoate,p CMB)和焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate,DEPC)对POD进行化学修饰,研究酶活性必需基团。结果表明,丁二酮、EDC和NAI对酶活力无显著影响,说明精氨酸、羧基和酪氨酸与酶活力无关;p CMB、DEPC和β-巯基乙醇强烈抑制酶活性,说明半胱氨酸和组氨酸是酶活性的必需基团,二硫键对酶活性有重要贡献。动力学分析和底物保护实验表明,DEPC为POD的竞争性抑制剂,组氨酸位于酶活中心。
- 陶毅明金荣仲朱华马义丽刘青波
- 关键词：过氧化物酶菠萝蜜必需基团化学修饰
- 菠萝蜜多酚氧化酶必需基团的研究
- 2014年
- 以菠萝蜜果肉多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)为研究对象,选用对氯汞苯甲酸、溴乙酸、β-巯基乙醇、PMSF、乙酰丙酮等8种化学修饰剂,研究PPO酶活的必需基团。并观察苹果酸、柠檬酸、β-环糊精、山梨醇、抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽等9种食品添加剂对PPO活性的影响。结果表明,组氨酸是酶活的必需基团,可能位于酶活中心;丝氨酸和赖氨酸对酶活有一定贡献;二硫键对酶活有重要贡献。1 mmol/L EDTA·Na抑制15%酶活,抗坏血酸、半胱氨酸和谷胱甘肽可显著抑制酶活,IC50依次为0.3、0.2、0.56 mmol/L。
- 马义丽陶毅明
- 关键词：多酚氧化酶菠萝蜜必需基团食品添加剂
- 曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶的抑制作用和抑菌实验被引量：11
- 2015年
- 采用酶动力学和Lineweaver-Burk双倒数法作图研究了曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶PPO的抑制作用和机理,并通过平板菌落实验研究了曲酸对果肉的抑菌效果。结果表明,曲酸对PPO酶活有很强的抑制作用,其IC50为0.297mmol/L,表现为可逆非竞争性抑制,解离常数Ki为0.296mmol/L;果肉经0.10%曲酸浸泡后6d内具有较好的抑菌效果。
- 何世微陶毅明王贵平廖朝亮
- 关键词：曲酸菠萝蜜多酚氧化酶抑菌
- 菠萝蜜过氧化物酶的酶学性质被引量：3
- 2017年
- 通过匀浆、硫酸铵盐析和层析,从菠萝蜜果肉中纯化出过氧化物酶(POD)。活性染色显示,成熟菠萝蜜果肉不含同工酶。经SDS-PAGE测定,POD亚基分子量为46 ku。POD反应的最适p H为6.5,最适温度为65℃。双倒数作图表明,POD对H_2O_2的Km为0.57 mmol/L,对愈创木酚的K_m为17.75 mmol/L。K^+、Na^+、EDTA和柠檬酸对酶活无显著影响,Ba^(2+)和Zn^(2+)对酶活有激活作用,Cu^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)、抗坏血酸、谷胱甘肽和半胱氨酸对酶活有不同程度的抑制作用。
- 李思婧何世微陶毅明
- 关键词：过氧化物酶菠萝蜜纯化酶学性质
