上海市卫生局科研基金(044112)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王爱丽徐顺陈波黄静吴志宏更多>>
- 相关机构：上海市第七人民医院南昌大学更多>>
- 发文基金：上海市医学重点学科(专科)建设项目上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一氧化氮合酶对增生性瘢痕影响意义的研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察一氧化氮合酶(Nitrogen oxide synthetase,NOS)在增生性瘢痕与正常皮肤组织及细胞中的表达特征及其差别,并通过应用NO供体或NOS抑制剂对培养的瘢痕成纤维细胞进行体外药物干扰,探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用。方法取临床增生性瘢痕手术病人的瘢痕组织及周围少许正常皮肤,体外培养获得皮肤和瘢痕成纤维细胞,通过免疫细胞化学及RT-PCR方法比较两种组织及细胞中NOS的表达及分布的差异。分别以100～500μM的NO供体硝普钠(Sodiu m nitroprusside,SNP)、NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-Arginine methyl,L-NAME)作用于瘢痕成纤维细胞,观察细胞增殖的变化;并用免疫细胞化学和RT-PCR方法比较作用前后成纤维细胞中I、III型胶原表达的变化。结果免疫组化检测及RT-PCR方法检测显示增生性瘢痕组织及细胞中NOS表达相对于皮肤组织及成纤维细胞中明显减少(p<0.05)。瘢痕细胞经SNP作用后,细胞增殖显著降低。免疫细胞化学方法和RT-PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原结果显示,从SNP200μM组开始Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著降低(p<0.05)。经L-NAME200μM作用后,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著增加(p<0.05)。结论增生性瘢痕组织及细胞中NOS含量较正常皮肤组织及细胞明显减少,NO供体SNP对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及胶原表达起到抑制作用,NOS抑制剂L-NAME对其胶原表达则起到促进作用,结果提示NOS表达降低可能与瘢痕增生密切相关,因此改变NO的产生及NOS的活性可望调控瘢痕成纤维细胞的生物学行为。
- 王爱丽杨平徐顺顾耀辉黄静陈波贾卿吴志宏
- 关键词：一氧化氮合酶增生性瘢痕成纤维细胞硝普钠N-硝基-L-精氨酸甲酯
- 重组人内皮型一氧化氮合酶基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞的影响被引量：3
- 2008年
- 目的了解重组人内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因转染人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFb）的可行性，以及转染后一氧化氮（NO）的生成和Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成情况。方法体外构建人eNOS真核表达载体。取体外培养的人HSFb进行转染实验，根据细胞培养液中所加质粒不同分为pcDNA3．0空载体组、pcDNA3．0-eNOS转染组。另设未转染组，细胞按常规培养。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞eNOS及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达。硝酸还原酶法测定NO含量。结果细胞转染后eNOS显著表达，pcDNA3．0-eNOS转染组eNOSmRNA相对表达量为5．92±0．21，明显高于pcDNA3．0空载体组（0．98±0．13，P〈0．05）；pcDNA3．0-eNOS转染组Ⅰ型胶原mRNA相对表达量为0．76±0．15，Ⅲ型胶原mRNA相对表达量为0．79±0．08，均明显低于pcDNA3．0空载体组（0．98±0．15、1．02±0．12，P〈0．05）。pcDNA3．0-eNOS转染组NO含量为（36．1±0．8）μmol／L，明显高于pcDNA3．0空载体组（28．4±1．0）μmol／L和未转染组[（27．7±1．3）μmol／L，P〈0．01]。结论HSFb可作为eNOS基因转染的靶细胞，转染的细胞能表达eNOS并产生NO，并且对细胞的胶原合成功能有抑制作用。
- 杨平王爱丽刘德武徐顺顾耀辉黄静陈波罗前程贾卿吴志宏
- 关键词：转染瘢痕成纤维细胞
- 一氧化氮合酶对增生性瘢痕的影响被引量：4
- 2008年
- 目的：观察一氧化氮合酶（NOS）在增生性瘢痕与正常皮肤组织及细胞中的表达特征及其差别，并通过应用一氧化氮（NO）供体或NOS抑制剂对培养的瘢痕成纤维细胞进行体外药物干扰，探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用。方法：取临床增生性瘢痕手术患者的瘢痕组织及周围少许正常皮肤，体外培养获得皮肤和瘢痕成纤维细胞，通过免疫组化及RT-PCR方法比较两种组织及细胞中N0S的表达及分布的差异。分别以100～500μM的NO供体硝普钠（SNP）、NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（I-NAME）作用于瘢痕成纤维细胞，观察细胞增殖的变化；并用免疫细胞化学和RT-PCR方法比较作用前后成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果：免疫组化检测及RT-PCR方法捡测显示增生性瘢痕组织及细胞中N0S表达相对于皮肤组织及成纤维细胞中明显减少（P＜O.05）。瘢痕细胞经SNP作用后，细胞增殖显著降低。免疫细胞化学方法和RT-PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原结果显示，从SNP200μM组开始Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著降低（P＜0.05）。经L_NAME200μM作用后，Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著增加（P＜O.05）。结论：增生性瘢痕组织及细胞中N（）s含量较正常皮肤组织及细胞明显减少，NO供体SNP对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及胶原表达起到抑制作用，NOS抑制剂L-NAME对其胶原表达则起到促进作用，结果提示N0S表达降低可能与瘢痕增生密切相关，因此改变NO的产生及NOS的活性可望调控瘢痕成纤维细胞的生物学行为。
- 王爱丽杨平徐顺顾耀辉黄静陈波贾卿吴志宏
- 关键词：一氧化氯合酶增生性瘢痕成纤维细胞硝普钠N-硝基-L-精氨酸甲酯
