广东省科技计划工业攻关项目(2007B030702003)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 相关作者：梁念慈何太平莫丽儿林小聪刘文更多>>
- 相关机构：广东医学院广东省天然药物开发研究重点实验室香港中文大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省中医药管理局基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PRL-3及其同源异形体重组杆粒的构建和鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建PRL-3及其同源异形体重组杆状病毒表达载体,为下一步表达PRL-3及其同源异形体蛋白并从中草药活性成分中筛选出PRL-3抑制剂奠定基础。方法应用RT-PCR方法从高转移卵巢癌细胞HO-8910PM扩增PRL-3及其同源异形体编码序列,克隆到供体质粒pFastBac HTB,在DH10Bac菌中进行同源重组,经3种抗生素和蓝白斑筛选,得到Bacmid-HTB-PRL-3和Bacmid-HTB-PRL-3-variant,PCR鉴定其正确性。结果与结论成功构建了PRL-3及其同源异形体重组杆粒。
- 何太平熊亮莫丽儿梁念慈
- 关键词：PRL-3杆状病毒基因重组
- 大黄素对人高转移卵巢癌细胞中癌相关基因表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的探讨大黄素对人高转移卵巢癌抗肿瘤的可能作用机制。方法应用肿瘤基因芯片检测大黄素(40μmol/L)对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中癌相关基因表达的影响,并且实时定量PCR和Western blotting进行验证。结果共筛选出表达差异基因69个,其中33个基因表达水平上调,36个基因表达水平下调,涉及细胞凋亡、细胞周期、细胞生长与分化、细胞运动、信号转导、基因转录和细胞代谢等7大类相关基因。结论基因芯片结果提示大黄素抗肿瘤作用可能与转化生长因子-β(TGF-β)信号转导通路密切相关。
- 何太平莫丽儿CHEN George-gong梁念慈
- 关键词：大黄素卵巢癌基因芯片
- 重组人PRL-3蛋白的表达、鉴定和酶动力学分析被引量：1
- 2011年
- 目的构建融合蛋白pColdII-His-PRL-3表达质粒,并进行诱导表达、纯化、鉴定和酶动力学分析。方法 2+通过基因重组技术构建pColdII-His-PRL-3融合蛋白表达载体,并在ArcticExpress E.Coli中表达融合蛋白。经Ni-NTA层析纯化,PRL-3蛋白用SDS-PAGE和Western blot初步鉴定,基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)确证,并进行酶动力学分析。结果重组载体pColdII-His-PRL-3包含正确的PRL-3编码序列,经IPTG诱导后能正确表达融合蛋白,Westernblot显示表达蛋白具有抗原性,质谱分析结果显示目的蛋白氨基酸序列与-1PRL-3蛋白完全相符。PRL-3酶的米氏常数Km为6.59μmol/L,催化常数Kcat为0.44min。结论构建的pColdII-His-PRL-3重组载体可表达具有酶活性的PRL-3蛋白,为PRL-3酶抑制剂的筛选奠定了基础。
- 何太平梁念慈
- 关键词：PRL-3蛋白表达酶动力学
- 7种黄酮类化合物对重组人促肝细胞再生磷酸酶-3活性的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:观察7种黄酮类化合物对重组人促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)活性的影响。方法:利用基因工程技术获得重组人PRL-3;通过测定PRL-3水解底物DiFMUP中磷酸基团生成DiFMU的荧光强度,探讨黄酮类化合物对重组人PRL-3活性的抑制作用,并采用半数效量概率单位法计算其IC50。结果:杨梅素和印棉黄素能显著抑制PRL-3的活性,其IC50分别为55.54、68.86μmol/L。槲皮素、木犀草素及7,8-二羟基黄酮对PRL-3的抑制作用较弱,其IC50分别为113.38、151.56、249.49μmol/L;而3-羟基黄酮和6-羟基黄酮对PRL-3酶的活性无明显影响。构效分析表明:黄酮母核C4位、C7位上羟基可能是抑制PRL-3的必需基团,且随着黄酮骨架上羟基数目的增多,抑制效果越强。结论:杨梅素和印棉黄素是2种较强的PRL-3抑制剂。
- 何太平梁念慈林小聪刘文
- 关键词：磷酸酶PRL-3IC50
