山东省医药卫生科技发展计划项目(2011HD015)
- 作品数：6 被引量：14H指数：1
- 相关作者：王学春李传伟于爱莲曹露王兆辉更多>>
- 相关机构：泰山医学院上海市第一人民医院泰山医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目山东省科技攻关计划山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 盐霉素通过TGFβ1/Smad信号通路抑制MMP-2、9降低CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力被引量：9
- 2016年
- 目的分析盐霉素对CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其影响机制。方法通过有血清和无血清培养技术培养人乳腺癌MCF-7细胞株,收集两种细胞,对其CD24、CD44标志物进行荧光染色,采用流式细胞仪检测CD44^+ /CD24^(-/low)亚群细胞的比例;盐霉素培养MCF-7细胞株和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,MTT法筛选出引起CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞细胞凋亡低于IC50的浓度;Transwell技术检测MCF-7和CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞的迁移和侵袭能力,以筛选出的浓度诱导CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞,以排除盐霉素对该细胞增殖抑制作用的影响,Transwell技术检测该细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、pSmad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平的变化。结果 CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞在无血清培养和有血清培养中的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.01),CD44^+ /CD24^+ 表型细胞的比例分别是(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)%(P<0.01);MTT法筛选出低于IC50的浓度是1、3、5、7μmol/L;Transwell技术检测CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力明显高于MCF-7细胞株,并随盐霉素浓度的上升呈下降趋势(P<0.05)。Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平下调(P<0.01)。结论盐霉素可能通过TGFβ1/Smad信号通路下调MMP-2、MMP-9蛋白水平,从而降低CD44^+ /CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力。
- 尹燕雪李传伟于爱莲李玲玉曹露王学春
- 关键词：乳腺肿瘤乳腺癌干细胞盐霉素
- 锌α2-糖蛋白与肿瘤研究进展被引量：1
- 2014年
- 锌α2-糖蛋白（Zinc-α2-glycoprotein,AZGP1）是一种分布于多种体液中且功能复杂的蛋白质,因此成为多种学科的研究热点。早在1961年Burgi W等就对正常人血浆中的AZGP1进行了分离提纯,并对其化学结构及化学特性进行研究。AZGP1是一种41 kDa的分泌性糖蛋白,因能够被锌离子沉淀而得名,并存在于多种体液中。
- 宋琦王学春
- 关键词：生物标志物肿瘤肿瘤恶病质
- 非转移性细胞-5在结肠癌组织中的表达及其意义被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨非转移性细胞-5（NME5）基因在结肠癌发生发展中的意义.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测35例结肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织NME5基因mRNA的表达水平,通过Western blot以及免疫组织化学法分别检测4例及64例结肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织NME5的蛋白表达水平.结果 Real-time PCR结果显示,35例样本中19例（54.3％）样本的癌旁组织中NME5 mRNA的表达水平是结肠癌组织的2倍以上,癌旁组织中NME5mRNA的表达水平（14.61 ±2.63）显著高于结肠癌组织（17.86±1.72,P＜0.05）.Western blot结果 显示,4例样本中3例样本的癌旁组织NME5蛋白表达明显高于肿瘤组织.免疫组织化学结果显示,NME5蛋白在正常组织中高表达[70.31％ （45/64）],在肿瘤组织中无表达或弱表达[82.81％（53/64）].NME5的表达水平与肿瘤分期（P＜0.01）和分化（P＜0.01）呈高度负相关.结论 NME5基因在正常组织及早期分化良好的结肠癌组织中较高表达,可能参与抑制结肠癌的发生发展.
- 宋琦李传伟冯晓冬崔菲菲彭志海王学春
- 关键词：结肠癌
- 悬浮培养与贴壁培养对乳腺癌MCF-7细胞形态及CD44、CD24表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的采用悬浮培养和贴壁培养两种方法分别孵育人乳腺癌MCF-7细胞株,观察细胞形态及干细胞标志物CD44、CD24的变化。方法将乳腺癌MCF-7细胞株同时进行第一代悬浮培养和贴壁培养,用倒置显微镜观察悬浮细胞及贴壁细胞形态及生长方式,收集贴壁细胞及第二代悬浮细胞,对其表面分子CD24及CD44进行免疫荧光染色,荧光显微镜下观察细胞表面标志物的表达,同时采用流式细胞术检测不同亚群的细胞数量。结果悬浮细胞以大小不等的微球方式进行生长,并在第二代悬浮培养中维持此生物学特性;贴壁细胞呈单层贴壁簇状生长。与贴壁细胞相比,CD44分子在悬浮细胞中表达含量增高,CD24分子表达含量减少。CD44+/CD24-/low表型细胞在悬浮细胞和贴壁细胞中所占比例分别为(87.0±0.43)%和(40.1±1.05)%(P<0.05);CD44+/CD24+表型所占比例分别为(11.7±0.39)%和(57.2±0.75)%(P<0.05)。结论悬浮培养法可使乳腺癌MCF-7细胞株贴壁细胞去分化,可富集CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞。
- 曹露李传伟于爱莲王兆辉牛丽婷吴开祥王学春
- 关键词：癌干细胞CD24
- 乳腺癌悬浮微球细胞与普通贴壁细胞中Notch1、钙黏蛋白、血管内皮生长因子A和C以及趋化因子受体4基因的表达差异被引量：1
- 2013年
- Notch1是参与调控细胞分化的重要分子，其表达异常与许多肿瘤的转移密切相关。在乳腺癌发展过程中，Notch1分子可能通过增强乳腺癌干细胞迁徙活性促进其转移，如果证实这一机制，对于研制靶向于乳腺癌干细胞Notch1分子的药物，阻断其转移有重要意义。我们通过悬浮微球培养技术富集乳腺癌干细胞，分析Notch1、钙黏蛋白（E-cadherin）、血管内皮生长因子（VEGF）-A、VEGF-C、趋化因子受体（CXCR）4在乳腺癌干细胞和普通乳腺癌细胞中的表达差异，为研究Notch1促进乳腺癌干细胞迁徙的作用及相关机制提供依据。
- 王兆辉李传伟于爱莲于广福赵英会张亚曹露牛丽婷王学春
- 关键词：血管内皮生长因子A乳腺癌干细胞NOTCH1趋化因子受体4钙黏蛋白贴壁细胞
- 无血清培养有效富集乳腺癌干细胞被引量：1
- 2015年
- 目的探讨无血清培养技术从人乳腺癌MCF-7细胞株中有效富集乳腺癌干细胞的影响。方法采用无血清和有血清两种培养技术分别培养人乳腺癌MCF-7细胞株,观察并收集两种细胞,对CD24、CD44标志物进行免疫荧光染色;使用倒置荧光显微镜检测该标志物的表达差异;应用流式细胞仪检测不同亚群细胞的比例,并检测两种细胞周期的差异。结果无血清培养的细胞以大小不等的微球体形式在培养液中悬浮生长,有血清培养的细胞以类似多边形的形式在培养液中单层贴壁生长。CD44在悬浮微球体细胞和贴壁细胞中的表达无明显差异,CD24在悬浮微球体细胞中的表达明显减少;悬浮微球体细胞和贴壁细胞中CD44^+/ CD24^(-/low)表型细胞的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.05),CD44^+/CD24^+表型细胞的比例分别为(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)%(P<0.05)。分裂期(S)细胞在悬浮微球体细胞和贴壁细胞中的比例分别为(18.85±2.26)%和(43.91±1.81)%(P<0.05);静止期(G1)细胞的比例分别为(64.92±2.07)%和(39.82±1.77)%(P<0.05)。结论无血清培养技术可以有效富集CD44^+/ CD24^(-/low)表型乳腺癌干细胞。
- 尹燕雪李传伟于爱莲王学春
- 关键词：乳腺肿瘤干细胞
