广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013246)
- 作品数：7 被引量：14H指数：4
- 相关作者：梁宁生何睿林淳于柳爽卢美珍安娜更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学泰山医学院附属医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西医药卫生科学研究基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人ⅡA型磷脂酶A_2衍生多肽M17杀菌作用的研究被引量：4
- 2013年
- 目的：研究和比较人ⅡA型磷脂酶A2（phospholipase A2,PLA2）衍生多肽M17,P26和N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应.方法：根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序分别设计合成3个肽分子M17（p51-67）,P26（p99-124）,N1-11（p1-11）.采用琼脂铺板计数法测定杀菌活性,将不同浓度衍生肽分别与革兰阳性菌（G＋）金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、屎肠球菌和革兰阴性菌（G-）大肠杆菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌在37℃孵育2.5h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18 ～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数（CFU）,并计算多肽作用后的杀菌率.结果：ⅡA型PLA2M17对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌的杀菌回归方程分别为：Y=1.464X＋3.795（ED50 6.65 mg·L-1）,Y=1.152X ＋3.419（ED50 23.57 mg·L-1）,Y 0.836X＋3.832（ED50 24.95mg·L-1）；对大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌的杀菌回归方程分别为：Y=0.877X＋4.054（ED5012.00 mg·L-1）,Y=1.094X＋3.371 （ED50 30.83 mg·L-1）,Y=1.027X＋3.626（ED5021.77 mg·L-1）;M17肽分子对G＋菌与G-菌均有较强的杀菌活性.P26和N1-11对金黄色葡萄球菌的杀菌回归曲方程分别为：Y=0.915X ＋2.766（ED50276.39 mg·L-1）,Y=1.389X＋1.668（ED50250.52 mg·L-1）,P26和N1-11对大肠杆菌的杀菌回归方程为：Y=1.327X＋1.437（ED50 484.18 mg·L-1）,Y =0.881X ＋2.903（ED50 240.02 mg·L-1）；N1-11和P26对G＋菌有较强的杀菌活性,但对G-菌杀菌活性较弱.M17肽分子对金黄色葡萄球菌的杀菌活性强于P26及N1-11,M17肽分子对大肠杆菌的杀菌活性明显强于P26及N1-11.结论：衍生自人ⅡA型PLA2保守区域17个氨基酸残基的肽M17对G＋菌和G-菌均有较强的杀菌活性,这可能与M17肽分子更易于与细菌结合并发挥作用有关.
- 淳于柳爽梁宁生
- 关键词：抗菌肽衍生肽
- 人ⅡA型磷脂酶A_2衍生肽P26抗菌作用与结构修饰的研究被引量：4
- 2011年
- 目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的两种多肽分别与6种细菌在37℃孵育2 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果两种多肽对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和炭疽杆菌有较强的杀菌活性,环肽P26的作用比直链肽P26强4倍左右;对革兰阴性菌大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,而环肽P26的作用更弱。结论衍生自人ⅡA型PLA2 C末端26个氨基酸残基的肽P26和修饰得到的环肽P26对G+菌有较强的杀菌活性,经修饰成环肽后作用更强,可能与环肽分子带的正电荷更集中有关。
- 何睿林梁宁生
- 关键词：C末端环肽结构修饰
- 人ⅡA型磷脂酶A_2碳末端衍生多肽结构与杀菌活性关系的研究
- 2012年
- 目的:研究人ⅡA型磷脂酶A2(groupⅡA phospholipase A2,PLA2GⅡA)碳末端衍生多肽的分子结构与杀菌活性的关系。方法:以人PLA2GⅡA一级结构碳末端的26个氨基酸残基为模板,分别合成3条多肽如下:①直链肽P1-26;②将其中一半的碱性氨基酸替换成中性氨基酸的P2-26;③碱性氨基酸(组氨酸和赖氨酸)全被替换成精氨酸的P3-26。采用琼脂铺板计数法测定多肽的杀菌活性。将不同浓度的3种多肽分别与G+菌(枯草杆菌)和G-菌(大肠杆菌)在37℃孵育2h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果:①碱性氨基酸减少的P2-26杀G+菌活性降低,仅为P1-26的1/4,但对G-菌杀菌效应稍增高;②碱性氨基酸全为精氨酸的P3-26杀G+菌和G-菌的活性与P1-26相比均明显降低。结论:人PLA2GⅡA衍生杀菌多肽P1-26的杀菌作用与其所含有的碱性氨基酸密切相关,减少碱性氨基酸的量可以减低它杀G+菌的活性,改变碱性氨基酸的类型也可以影响它的杀菌活性。
- 卢美珍梁宁生
- 关键词：衍生肽杀菌活性分子结构构效关系
- 灵长生物抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A_2氨基酸取代与分子进化的关系
- 2011年
- 目的:了解灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2氨基酸取代的特点及其与分子进化的关系。方法:对人、猩猩和猴3种哺乳类灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2的氨基酸顺序进行两两比较,分析它们之间相互取代的位点、频率和性质。结果:①人和猩猩、人和猴、猩猩和猴之间分别有4,12,12个氨基酸残基发生取代,且主要发生在带电荷的氨基酸;而在发生的氨基酸取代中,又以带正电荷的氨基酸(碱性氨基酸)为主;②氨基酸取代主要集中在有限的4个区域,且为功能重要的区域。结论:哺乳类灵长生物抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2的蛋白质分子进化较快,与其所具有的较强的杀菌活性相适应。
- 何睿林卢美珍梁宁生
- 关键词：磷脂酶A2灵长类抗菌蛋白分子进化杀菌活性
- 衍生自人ⅡA型磷脂酶A_2 N-端的多肽hPLA_2N_(1-11)杀菌活性的研究被引量：6
- 2012年
- 目的观察衍生自人ⅡA型磷脂酶A2(PLA2)N-端的多肽hPLA2N1-11对不同细菌在体外的杀菌效应。方法根据人ⅡA型PLA2N-端11个氨基酸残基的顺序,合成hPLA2N1-11。将不同浓度的多肽分别与革兰阳性菌和革兰阴性菌在温度为37℃中水浴2 h,取出铺板,置于37℃培养18～24 h,取出并记录每块琼脂板的菌落生成数(CFU),计算杀菌率。结果 hPLA2N1-11对同属革兰阳性(G+)菌的金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌的杀菌作用较强;对同属革兰阴性(G-)菌的大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,人ⅡA型PLA2衍生肽虽然只有原分子1/10的大小,但仍具有与ⅡA型PLA2类似的杀菌效应。结论多肽hPLA2N1-11对革兰阳性菌杀菌作用强,对革兰阴性菌杀菌作用弱,可能具有与ⅡA型PLA2类似的杀菌机制。
- 安娜梁宁生
- 关键词：革兰阳性菌革兰阴性菌
- 蛇毒I型和Ⅱ型磷脂酶A_2基因密码使用的比较和分析
- 2013年
- 目的:通过比较和分析蛇毒中I型和Ⅱ型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)基因编码的特点,了解蛇毒中两类PLA2分子生物学的信息。方法:从国际基因库中搜寻所有蛇毒PLA2基因信息(mRNA),对于符合研究条件的基因,利用CodonW分析软件和计算机进行分析,计算出两类PLA2的同义密码相对运用值(Relative Synonymous Codon Usage,RSCU),编码区鸟嘌呤/胞嘧啶(GC)含量和GC在三联体密码子中第3位置上所占的百分比(GC3S)含量,以及4种类型的碱基的含量。结果:眼镜蛇科I型PLA2和蝰蛇科Ⅱ型PLA2基因编码区GC含量明显不同,蝰蛇科Ⅱ型PLA2的GC含量和GC3S含量分别为53.05%和65.53%,明显高于眼镜蛇科的I型PLA2的49.48%和49.68%;RSCU值显示眼镜蛇科I型PLA2对29个密码子具有偏好性,蝰蛇科Ⅱ型的有27个密码子,两类PLA2偏好使用的密码有明显不同;蝰蛇科Ⅱ型PLA2的RSCU相对较高;在可以选择密码子的19个氨基酸中,两类PLA2在12个氨基酸有着不同的偏好性;终止密码子具有特殊的偏好性,RSCU值均很高。结论:眼镜蛇科和蝰蛇科的两类PLA2基因在密码子使用上有明显不同的偏好性,蝰蛇科的PLA2偏好程度更强些,这可能与蝰蛇科的PLA2基因位于GC丰富的区域有关。
- 淳于柳爽史晓雄陶廷婷梁宁生
- 关键词：密码子蛇毒
- ⅡA型磷脂酶A_2 mRNA在结、直肠癌组织中的表达水平及其意义被引量：4
- 2011年
- 目的探讨ⅡA型磷脂酶A2(PLA2GⅡA)mRNA的表达水平与结、直肠癌的关系,为评估PLA2GⅡA对结、直肠癌的临床诊断、病程监测和预后预测的价值和意义提供实验依据。方法应用RT-PCR方法检测33例结、直肠癌患者的结、直肠癌配对组织(癌组织、癌旁组织和肿瘤远端切缘组织)中PLA2GⅡA mRNA的表达水平。用SPSS13.0统计学软件分析3组组织中的PLA2GⅡA mRNA水平的差异及结、直肠癌组织中PLA2GⅡA mRNA表达水平与临床病理因素的相关性。结果①PLA2GⅡA mRNA在结、直肠癌组织的表达水平明显高于癌旁及远端切缘组织,其表达阳性率分别为癌组织组90.91%,癌旁组66.67%,肿瘤远端切缘组51.52%(P<0.05)。②女性组、早期组和无转移组患者结、直肠癌组织的PLA2GⅡA mRNA表达水平比男性组、晚期组和有转移组高(P<0.05)。结论 PLA2GⅡA基因可能参与了结、直肠肿瘤的发生和发展过程。
- 谭露露梁宁生张雷
- 关键词：直肠癌聚合酶链反应
