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陕西省自然科学基金(2008k09-09)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：左毅章翔霍军丽张家墅张瑞更多>>
相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇基因
  • 1篇胶质
  • 1篇胶质瘤
  • 1篇胶质瘤细胞
  • 1篇胶质瘤细胞系
  • 1篇靶向
  • 1篇靶向性
  • 1篇RNA干涉
  • 1篇SURVIV...
  • 1篇SURVIV...

机构

  • 1篇第四军医大学
  • 1篇第四军医大学...

作者

  • 1篇王鹏
  • 1篇甄海宁
  • 1篇张瑞
  • 1篇张家墅
  • 1篇霍军丽
  • 1篇章翔
  • 1篇左毅

传媒

  • 1篇中华神经外科...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
稳定整合靶向性Survivin基因RNA干涉载体胶质瘤细胞系的建立
2009年
目的构建针对细胞凋亡抑制蛋白survivin(SVV)基因的特异性RNA干涉载体,并建立稳定转染该干涉载体的人胶质瘤细胞系。方法设计合成针对SVV基因和针对荧火虫荧光素酶(FLF)基因特异性RNA干涉片断,并分别克隆入pSilencer3.1-H1neo载体中,成功构建SVV基因RNA干涉载体pSilencer3.1-SVV和无关序列载体pSilencer3.1-FLF。RNA干涉载体、无关序列载体和空白载体经脂质体法转染胶质瘤细胞系U251,经G418筛选,采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)、免疫蛋白印迹(Westernblot)和免疫细胞化学方法分别检测SVV基因在转染细胞中的表达情况。结果酶切鉴定和核苷酸序列分析证实,成功构建了SVV基因RNA干涉载体pSilencer3.1-SVV。获得了稳定转染干涉载体、无关序列载体和空白载体的细胞系分别命名为U251-S、U251-F和U251-P。U251-S细胞中SVV的mRNA和蛋白表达受到明显抑制,U251-F和U251-P细胞中SVV基因表达水平无明显变化。结论SVV基因特异性RNA干涉载体能够明显抑制SVV基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究SVV在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。
张家墅甄海宁章翔张瑞左毅王鹏霍军丽
关键词：RNA干涉SURVIVIN胶质瘤
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