国家科技重大专项(2009ZX08009-019B) 作品数:6 被引量:17 H指数:3 相关作者: 王茅雁 王学峰 叶乃好 张锋 李记园 更多>> 相关机构: 内蒙古农业大学 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛科技大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
沙冬青AmDREB3基因的克隆及植物表达载体构建 被引量:4 2012年 脱水应答元件结合蛋白(Dehydration-responsive element/DRE binding proteins,DREBs)属于植物AP2/EREBP(APETALA2/Ethylene-responsive element binding protein)转录因子大家族中的一个亚族,在植物对低温、干旱和盐碱等非生物胁迫的适应中起重要作用。本论文从强耐寒耐旱植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到AmDREB3基因的编码区cDNA,对其编码蛋白的结构域和系统进化关系进行了分析,并将其成功构建到分别由CaMV35S和拟南芥rd29A启动子驱动的植物表达载体pCAMBIA3301上,为进一步通过转基因植物等方法验证该基因在耐逆性中的功能奠定了基础。 张锋 王学峰 董博 王茅雁关键词:沙冬青 DREB 基因克隆 电子鼻在紫菜识别中的应用 被引量:3 2010年 采用电子鼻技术对不同生产日期的坛紫菜进行识别,并对所获得数据进行主成分分析(PCA)、线性判别法(LDA)分析,发现电子鼻可以区分所选的不同生产日期的坛紫菜。研究还发现,电子鼻能够识别随着货架期延长造成的坛紫菜的气味变化,将所选的生产日期不同的种坛紫菜区分开来。坛紫菜的Loadings分析表明,2号传感器对第一主成分贡献率最大,6号传感器对第二主成分贡献率较大。 陈利梅 李德茂 叶乃好关键词:电子鼻 紫菜 气味 绿潮爆发后青岛海域石莼属绿藻的多样性分析 被引量:6 2010年 绿潮爆发后在青岛沿海潮间带采集了12株石莼属绿藻,形态学结合分子生物学手段对这些绿藻进行多样性鉴定。经过PCR扩增获得了12株藻的核糖体转录间隔区(ITS)序列以及完整的5.8SrDNA序列。经过序列分析发现,不同藻株的ITS区域在序列长度上存在差异;G+C含量也存在差异,但是都处于较高的水平,最高的接近72%。ITS区域多序列比对结果及系统发育分析显示这些藻株存在种的多样性,而且由分子鉴定得出的多样性与形态上呈现的多样性并不完全一致。本研究结果显示在青岛海域绿潮爆发后石莼藻类仍然存在较好的多样性。 梁成伟 张晓雯 宿烽 叶乃好关键词:ITS序列 多样性 蒙古沙冬青干旱胁迫全长cDNA文库构建及序列分析 被引量:3 2012年 为了规模化分离强抗逆植物蒙古沙冬青Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.)Cheng f.的抗旱基因并探讨其抗旱性分子机理,用SMART(Switching mechanism at 5′-end of RNA transcript)技术构建了其在干旱胁迫下的全长cDNA文库。原始文库滴度为1.6×107PFU/mL,重组率为97.7%,插入片段长度多数接近和超过1 kb。对3 000个阳性克隆进行了5′端测序和序列分析,共获得1 450条Unigene序列。在Nt、Nr和Swissprot等数据库中进行Blast搜索,结果有919条(占63.4%)与已知或推测功能的基因具有同源性,其余531条(占36.6%)为功能未知的新基因。将Unigene进行Gene Ontology(GO)功能分类,其中与生理过程、细胞过程、结合、催化活性和细胞组分相关的基因所占比例较高,其次是与细胞器、蛋白复合体、运输和结构分子活性相关的基因,与刺激应答、基因表达调节、生理生化调节和信号转导相关的基因也占相当比例。许多有功能注释的Unigene属于抗逆相关基因,用半定量RT-PCR方法分析其中6个基因的表达变化,证明其均参与对干旱胁迫的应答反应。为进一步开展表达谱分析和克隆、鉴定抗旱基因奠定了基础。 林清芳 王学峰 李记园 赵鸿彬 王茅雁关键词:沙冬青 干旱 CDNA文库 蒙古沙冬青胰蛋白酶抑制剂基因AmTI的克隆及其功能分析 被引量:2 2012年 蛋白酶抑制剂(Protein inhibitors,PIs)是一类小分子多肽或蛋白质,在植物抵抗生物和非生物逆境中起中起重要作用。利用PCR方法从强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到一个胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitors,TIs)基因AmTI,分析了其在非生物胁迫下的表达变化,构建了其植物表达载体。结果表明,AmTI的编码蛋白含197个氨基酸残基,分子质量为21.5kDa,在N端有信号肽序列,属于Kunitz型;在正常生长条件下,该基因只有微量的基础表达,但在脱水、低温和盐胁迫处理下,其表达量显著上调。本研究为进一步揭示AmTI的功能奠定了基础。 王学峰 李记园 李连国 张锋 王茅雁关键词:沙冬青 蛋白酶抑制剂 基因克隆 异源表达蒙古沙冬青AmDREB1F基因提高转基因拟南芥的耐逆性 2021年 脱水应答元件结合蛋白(Dehydration-responsive element binding proteins,DREBs)是一类重要的植物耐逆相关转录因子。蒙古沙冬青Ammopiptanthus mongolicus是中国西北荒漠区特有的强耐逆常绿阔叶灌木。为探明其AmDREB1F基因在耐受非生物逆境中的功能和作用机理,文中对该基因编码蛋白的亚细胞定位、表达模式和转基因拟南芥的耐逆性进行了分析。结果表明:AmDREB1F编码的蛋白质定位于细胞核内;在室内培养幼苗中,该基因在正常条件下不表达,在低温和干旱胁迫下有较明显表达,在高盐和高温胁迫下仅有微弱表达,而在脱落酸(Abscisicacid,ABA)处理下不表达;在野外生长植株的叶片中,其表达量在秋末、冬季和早春远高于其他季节,而不同器官相比,其在根和未成熟果荚中的表达量远高于其他器官;将AmDREB1F在拟南芥中组成型表达可提高多个受DREBs调控的胁迫响应基因的转录水平,增强转基因株系对干旱、高盐和低温以及氧化胁迫的耐性,同时导致其生长发育延滞,外施赤霉素3可消除生长延滞现象;将该基因进行胁迫诱导表达也可提高转基因拟南芥对上述非生物胁迫的耐受性,而不影响其生长发育。这些结果说明AmDREB1F可能通过ABA非依赖的信号途径在响应和耐受逆境胁迫中起正调节作用。 唐宽刚 董博 温小俊 殷玉梅 薛敏 苏子先 王茅雁关键词:沙冬青 转基因 耐逆性