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广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600007)
作品数:
2
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林帆
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范少峰
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骨桥蛋白靶向干扰RNA对体外人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
2012年
目的:观测骨桥蛋白靶向干扰RNA对体外人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的短发夹RNA(shRNA)质粒载体与阳离子脂质体结合介导转染HUVEC,同时设计空白载体转染对照和空白对照,用MTT法等方法检测各组HUVEC生长增殖情况的变化,并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:OPN-shRNA载体转染HUVEC后明显抑制细胞增殖(P<0.05)和使细胞分裂周期出现阻滞,凋亡二倍体数量增加,凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:骨桥蛋白靶向干扰RNA在体外能够抑制HUVEC的增殖,升高细胞凋亡率。
温雯
林帆
刘坚初
范少锋
李坤平
关键词:
骨桥蛋白质
RNA干扰
脐静脉内皮细胞
RNA干扰对骨桥蛋白不同片段表达的影响
2012年
目的观察RNA干扰技术对肝癌细胞株内骨桥蛋白(osteopontin,OPN)不同片段的抑制效果,以期为针对OPN的靶向治疗提供更准确、有效的位点。方法应用合成OPN序列特异性双链RNA(OPNi-A、OPNiB、OPNi-C),转染人HEP-G2肝癌细胞株,用荧光定量PCR和免疫组化检测比较OPN的mRNA和蛋白表达情况。结果OPNi—A、OPNi—B、OPNiC转染HEP—G2后,A片段的荧光强度大于B片段和C片段。RNA干扰HEP-G2细胞株48h后,A、B、C、三个片段的OPNmRNA的△CT值分别从干扰前的8.31±1.58、8.78±1.49、8.25±1.51上升至12.14±1.43、10.22±1.97、10.48±1.88(P〈0.05);三个片段的OPN蛋白水平免疫组化评分也从干扰前的6.44±1.67、5.43±2.05、5.45±2.52下降到2.84±1.52、4.43±1.65、3.95±1.43。结论RNA干扰对肝癌细胞株内骨桥蛋白不同片段有不同的抑制作用。合成更具针对性的siRNA可能对抑制肝癌侵袭转移具有重要的科学和卫生经济学意义。
林帆
古维立
范少峰
李坤平
林春明
裴正浩
关键词:
肝细胞癌
RNA干扰
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