国家重点基础研究发展计划(G2000016207) 作品数:25 被引量:490 H指数:13 相关作者: 高希武 郑炳宗 梁沛 傅强 张志涛 更多>> 相关机构: 中国农业大学 中国农业科学院中国水稻研究所 中国农业科学院植物保护研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 更多>>
九种常用杀虫剂对二化螟线粒体ATPase活力的抑制作用 被引量:13 2006年 研究了二化螟Chilo suppressalis线粒体Na^+-K^+-ATPase和Ca^2+,Mg^2+.ATPase的生物化学性质以及9种常用杀虫剂对这两种酶活性的影响。结果表明,二化螟线粒体Na^+-K^+-ATPase和Ca^2+-Mg^2+-ATPase的最适反应条件为pH值7.4,温度37℃。Na^+-.K^+-ATPase的米氏常数(Kw)为0.42mmol/L,最大反应速度(Vmax)为302.47nmol/(min·mg)。Ca^2+-Mg^2+-ATPase的Km为0.40mmol/L,Vmax为128.04nmol/(min·mg)。药剂浓度为1×10^-4mol/L时,5种菊酯类杀虫剂对离体ATPase活性抑制的顺序为:溴氰菊酯〉联苯菊酯〉百树菊酯〉三氟氯氰菊酯和氟硅菊酯;对二化螟Na^+-K^+-ATP8se的抑制率分别为40.12%、39.69%、27.27%、19.49%和18.71%;对Ca^2+-Mg^2+-ATPase的抑制率分别为29.27%、23.78%、19.88%、11.64%和14.34%。硫丹对二化螟Na^+-K^+-ATPase和Ca^2+-Mg^2+-ATPase的抑制率均为17.46%。甲胺磷和呋喃丹对Ca^2+-Mg^2+-ATPase的抑制率分别为27.16%和17.42%,对Na^+-K^+-ATPase则几乎没有抑制作用。实验结果还表明,在1.6×10^-7~1×10^-4mol/L的浓度范围内,上述9种杀虫剂对二化螟ATPase活性的抑制率存在明显的剂量-效应关系。 李海平 冯涛 陶岭梅 刘学 姜辉 林荣华 梁沛 高希武关键词:二化螟 腺苷三磷酸酶 杀虫剂 酶活性 抑制率 杀虫药剂混用对棉铃虫乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的联合抑制作用研究 被引量:8 2002年 选用辛硫磷、对硫磷、敌敌畏和氧乐果 4种有机磷类杀虫剂以及灭多威和甲萘威两种氨基甲酸酯类杀虫剂分别以 1∶ 1、1∶ 3和 3∶ 1的比例混用 ,以棉铃虫 H elicoverpa armigera为试虫 ,分别测得单剂和混剂对其乙酰胆碱酯酶 (ACh E)和羧酸酯酶 (Car E)的抑制中浓度 (I50 ) ,以联合抑制系数作为增效作用的参考指标进行了比较。研究发现 ,两种药剂不同配比的混剂对同种酯酶的联合抑制作用也往往不同。对 ACh E和 Car E同时具有抑制作用的只有其中的对硫磷 +甲萘威 (1∶ 3)、辛硫磷 +对硫磷 (1∶ 3)和灭多威 +氧乐果 (1∶ 3) ,而甲萘威 +敌敌畏 (1∶ 3)、甲萘威 +氧乐果(1∶ 1)、辛硫磷 +甲萘威 (1∶ 1)、对硫磷 +氧乐果 (1∶ 1)、对硫磷 +氧乐果 (1∶ 3)、敌敌畏 +氧乐果(1∶ 3)、灭多威 +对硫磷 (1∶ 1) 7种混剂对 ACh E和 Car 聂秋林 梁沛 高希武 郑炳宗关键词:棉铃虫 杀虫剂 乙酰胆碱酯酶 羧酸酯酶 蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽S_转移酶的部分纯化 被引量:4 2005年 通过用聚乙烯亚胺(PEI)、硫酸铵、聚乙二醇(PEG)沉淀技术和GSH-Sepharose 4B亲和柱对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中谷胱甘肽S-转移酶进行了部分纯化研究.结果表明PEG10000和PEG20000的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效果.通过PEI沉淀去核酸后,再用硫酸铵沉淀,中肠和脂肪体GST活性分布在70%~75%和60%~65%沉淀段,比活力分别为1081.49和596.41 nmol/(min·mg),纯化倍数分别为2.53和2.2.在6种PEG中,PEG10000和PEG20000的纯化效果较好.在中肠和脂肪体中PEG10000沉淀的GST活性峰分别在40%~45%和30%~40%,GST比活力分别为795.11和1 080.18 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.4和3.97.PEG20000沉淀中肠和脂肪体GST的活性峰分别在25%~40%和25%~45%,比活力分别是767.57和945.96 nmol/(min·mg),纯化倍数分别是2.81和3.05.用GSH-Sepharose 4B纯化中肠GST,GST比活力达到5 888.44nmol/(min·mg),纯化倍数达到107.38. 汤方 张常忠 梁沛 史雪岩 高希武关键词:棉铃虫 谷胱甘肽S-转移酶 硫酸铵沉淀 棉蚜抗氧化乐果品系的羧酸酯酶基因突变 被引量:20 2005年 用氧化乐果对室内敏感品系棉蚜Aphis gossypii (Glover) 进行抗性选育, 经24代筛选, 抗性指数达到124 7倍。以α_乙酸萘酯 (α_NA) 为底物, 比较了氧化乐果敏感和抗性品系棉蚜羧酸酯酶的比活力, 发现抗性品系羧酸酯酶比活力明显小于敏感品系。对这两个品系的羧酸酯酶基因进行了克隆, 通过对抗性和敏感品系羧酸酯酶基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列比较, 发现抗性品系有4个氨基酸残基发生了替代 (His104→Arg, Ala128→Val, Thr333→Asp, Lys484→Arg)。对其蛋白质三维结构分析推测只有His104→Arg的替代是位于其活性中心。棉蚜氧化乐果敏感和抗性品系羧酸酯酶基因 cDNA全长的GenBank登录号分别为AY485216和AY485214。 郭惠琳 高希武关键词:棉蚜 抗药性 克隆 基因突变 氧化乐果 不同抗药性品系甜菜夜蛾呼吸速率的比较 被引量:5 2005年 以甜菜夜蛾Spodoptera exigua(H櫣bner)敏感品系(SS)及高效氯氟氰菊酯选育的抗性品系(RR)和近等基因系-抗性品系(NILs-RR)幼虫为试虫,在25±1℃,相对湿度70%,光照强度3000lx,光周期14L∶10D的条件下测定了3~5龄幼虫呼吸速率的变化。结果表明,抗性品系与敏感品系的同龄期甜菜夜蛾幼虫在不受药条件下的呼吸速率差异不显著,因此抗性水平的提高并未相应引起甜菜夜蛾本底呼吸速率的变化。高效氯氟氰菊酯处理幼虫后,各品系的呼吸速率均随剂量的提高而相应提高,以各品系相应LC20和LC50剂量处理后的呼吸速率,NILS-RR明显高于RR,两者又明显高于SS品系。两个抗性品系呼吸速率峰期均出现在药后5h,而敏感品系出现在药后2h;敏感品系保持较高呼吸速率的时间短,而抗性品系维持高水平呼吸速率的时间长,分别于药后15h和24h恢复到正常水平,这表明用药后抗性品系呼吸速率的提高幅度与代谢解毒能力存在一定相关性。 慕卫 吴孔明 郭予元 张文吉关键词:甜菜夜蛾 抗药性 抗性品系 敏感品系 呼吸速率 高效氯氟氰菊酯 稻褐飞虱田间种群不同世代致害性检测 被引量:7 2003年 测定了稻褐飞虱广西田间种群 (F1 )以及田间种群在室内感虫品种TN1苗上连续繁殖两代 (F2 和F3)的致害性。结果发现 ,F1 代以生物型 2为主 ,F2 代中生物型 1和生物型 3个体占优势 ,F3代以生物型 3及其它生物型为主。不同的接虫顺序对鉴定结果无明显影响。 刘芳 傅强 张志涛 赖风香关键词:稻褐飞虱 致害性 生物型 氰戊菊酯抗性和敏感品系棉蚜部分钠离子通道基因的克隆 被引量:7 2003年 在室内选育出了对氰戊菊酯抗性达 199.5 4倍的棉蚜品系。设计了 3条简并引物进行嵌套式PCR扩增 ,得到了氰戊菊酯敏感品系和抗性品系棉蚜钠离子通道基因IIS4 IIS6区的基因片段。序列分析表明 ,氰戊菊酯抗性品系棉蚜没有发生kdr或super kdr突变 ,但是与敏感品系相比 ,抗性品系钠离子通道基因IIS4 IIS6区有 2个核苷酸发生了突变 (T2A和A34T) ,并由此导致了 1个氨基酸的突变 (M12L) 。 孙鲁娟 高希武 郑炳宗关键词:氰戊菊酯 抗性 敏感品系 棉蚜 钠离子通道 棉蚜抗氧化乐果品系及敏感品系羧酸酯酶性质的比较 被引量:22 2002年 在室内用氧化乐果逐代筛选的棉蚜抗性品系 ,相对于敏感品系的抗性倍数是 17。用α 乙酸萘酯 (α NA)、α 丁酸萘酯(α NB)、α 磷酸萘酯 (α NP)和 β 磷酸萘酯 (β NP)作底物比较研究了氧化乐果抗性和敏感品系棉蚜Aphisgossypii羧酸酯酶的比活力、米氏常数 (Km)和最大反应速度 (Vmax)等有关的动力学常数。以α NA和α NB作底物时 ,抗性品系棉蚜的比活力显著低于敏感品系的 ;以α NP和β NP作底物时 ,两个品系棉蚜的比活力、Km 和Vmax没有明显差异。用α NA、β NA作底物染色做酯酶同工酶电泳 ,抗性品系棉蚜的酯酶同工酶染色比敏感品系棉蚜的浅。 孙鲁娟 高希武 郑炳宗关键词:棉蚜 敏感品系 抗药性 单宁酸对棉铃虫谷胱甘肽S-转移酶的影响 被引量:34 2003年 通过培养基混药法 ,研究了植物次生物质单宁酸对棉铃虫Helicoverpaarmigera (H櫣bner)谷胱甘肽S 转移酶活性的影响。谷胱甘肽S 转移酶活性随棉铃虫发育期的进程而变化 ,在卵期最低 ,5龄、 6龄幼虫和成虫期最高。用含 0 0 0 5 %单宁酸的饲料饲喂棉铃虫后 ,5龄和 6龄幼虫的谷胱甘肽S 转移酶活性明显降低 ,分别为对照的 5 9%和 6 7%。单宁酸低剂量、短时间处理棉铃虫幼虫 ,可诱导中肠和脂肪体中的谷胱甘肽S 转移酶的活性增加 ,高剂量或低剂量长时间处理没有诱导增加作用 ,甚至还有抑制作用。单宁酸连续处理 4代 ,对棉铃虫 6龄幼虫中肠谷胱甘肽S 转移酶均有抑制作用 ,对脂肪体谷胱甘肽S 转移酶活性无明显影响或有抑制作用。单宁酸处理的第 4代幼虫对溴氰菊酯的敏感度有增加的趋势 。 陈凤菊 高希武 雷明庆 郑炳宗关键词:棉铃虫 植物次生物质 单宁酸 谷胱甘肽S-转移酶 Cloning of Partial Sodium Channel Gene From Strains of Fenvalerate-Resistant and Susceptible Cotton Aphid(Aphis gossypii Glover) 2003年 The strain of fenvalerate-resistant cotton aphids was selected using fenvalerate insecticide in the laboratory, the resistance factor of the strain was 199.54. Three degenerate primers were designed and used to perform PCR amplification. A cDNA encoding partial sodium channel gene was cloned from the fenvalerate-resistant and -susceptible strains. There were two nucleotide acid differences between fenvalerate-resistant strain and -susceptible strain, resulting in an amino acid mutation, Met→Leu. It is predicted that the mutation is related to the cotton aphid resistance to fenvalerate. SUN Lu-juan, GAO Xi-wu and ZHENG Bing-zong(Department of Entomology , China Agricultural University, Beijing 100094 , P.R.China)