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褐飞虱谷胱苷肽转移酶基因cDNA片段的克隆、测序及表达分析: 2007年; 谷胱苷肽转移酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,研究水稻害虫褐飞虱的谷胱苷肽转移酶基因在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,可为有效防治褐飞虱提供新的理论依据。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱谷胱苷肽转移酶基因编码区的cDNA片段,并使用Northern杂交技术检测了该基因对两种不同抗性水稻的分子反应。结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为201bp,该片段所编码的氨基酸序列与来自大劣按蚊、细小按蚊、冈比亚按蚊、果蝇和木瓜果实蝇的谷胱苷肽转移酶的片段存在高度同源性。Northern杂交显示,在褐飞虱取食抗性水稻后,谷胱苷肽转移酶基因表达水平明显升高,但褐飞虱取食感虫水稻TN1后,该基因的表达水平没有明显变化。; 杨之帆何光存; 关键词：褐飞虱

褐飞虱诱导的水稻RH3基因的克隆及其表达特性被引量：2: 2003年; 组蛋白H3基因的表达与个体发育、细胞组织特异性以及胁迫反应等相关.在褐飞虱取食后的水稻cDNA差减文库中筛选到编码水稻组蛋白H3(RH3)的EST(GenBank登录号:BU572343),以该EST为探针,从褐飞虱取食后的水稻CDNA文库中分离到RH3基因的全长。DNA.该基因编码一个含136个氨基酸残基的H3蛋白,与以前克隆出的一种抗病相关蛋白基因(GenBank登录号:AF467728)只有1个碱基的差异,蛋白质的氨基酸序列第 126位上由赖氨酸取代了天冬氨酸.应用 Northern blot技术,研究了褐飞虱取食后不同时间段水稻RH3基因的表达水平,同时分析了植物激素、干旱、盐胁迫及机械损伤等因素对其转录水平的影响.结果表明,褐飞虱取食8 h后 RH3基因表达开始增强,96 h后达到峰值.干旱处理和稻瘟病菌接种能诱导RH3基因的表达增强,而脱落酸处理则对该基因的表达起负调控作用.利用 RNA原位杂交技术,对接种褐飞虱48 h后水稻的茎叶切片进行了 RH InRNA的原位定位.结果显示,在褐飞虱取食后,RH3基因的转录本在维管束及短细胞中的积累尤其明显.水稻组蛋白H3基因的表达与水稻对褐飞虱的应激反应相关.; 王小兰翁清妹游艾青祝莉莉何光存; 关键词：水稻克隆基因表达防卫反应组蛋白H3

一个受褐飞虱取食诱导的水稻GST类似蛋白基因的克隆: 2005年; BpHi006AcDNA长度为1943bp,具有一个795bp组成的完整的读码框,其表达受褐飞虱取食的诱导。BpHi006A蛋白含有谷胱苷肽S-转移酶(glutathioneS-transferase)的N-末端结构域和C-末端结构域,为谷胱苷肽S-转移酶超家族的成员。BpHi006A蛋白与拟南芥四氯氢醌还原性脱卤素酶相关蛋白有61%的一致性,序列分析表明这两种蛋白质构成一类新的植物GST。; 袁红雨祝莉莉唐明何光存; 关键词：褐飞虱水稻

利用抑制消减杂交分离受褐飞虱取食下调的水稻基因被引量：7: 2004年; 为了分离受褐飞虱取食抑制的水稻基因,采用抑制消减杂交的方法,以正常生长的水稻幼苗为目标群体,以褐飞虱胁迫32 h的水稻幼苗作为对照群体,构建了含200个重组质粒的SSH cDNA文库。随机挑选50个重组质粒进行反向Northern差异筛选后,再经Northern杂交验证,得到2个受褐飞虱取食抑制的基因:一个是Lhca,编码水稻光系统Ⅰ天线蛋白;另一个基因(BpHd002)与肌苷-5’-单磷酸脱氢酶基因有同源性。以BpHd002为探针筛选水稻幼苗cDNA文库分离出该基因的全长cDNA(BpHd002A)。其长度为1 285bp,含有一由519 bp组成的完整的阅读框,编码的蛋白质具有两个CBS结构域。; 袁红雨祝莉莉唐明何光存; 关键词：抑制消减杂交褐飞虱水稻

褐飞虱羧酸酯酶基因cDNA片段的克隆及表达分析被引量：2: 2006年; 利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱羧酸酯酶基因编码区的cDNA片段,并进行了序列测定.结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为396 bp,经BLAST查找比对发现,该片段所编码的氨基酸序列与来自铜绿蝇、家蝇、沟鼠、黑腹果蝇、线虫和埃及伊蚊的羧酸酯酶的片段存在高度同源性.Northern杂交分析显示,在褐飞虱取食抗性水稻后,羧酸酯酶基因表达水平明显升高.以上结果表明,羧酸酯酶基因的表达受抗性水稻的诱导,该基因在有毒化学物质解毒及增强褐飞虱对抗性水稻的耐受性方面可能起着重要作用.; 杨之帆何光存; 关键词：褐飞虱 RT-PCR

褐飞虱细胞色素P450基因cDNA片段的克隆、测序及表达分析被引量：1: 2006年; 利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱细胞色素P450基因编码区的cDNA片段,并进行了序列测定.结果表明,所克隆到的cDNA片段长度为237bp,经BLAST查找比对发现,该片段所编码的氨基酸序列与来自烟草天蛾、棉铃虫、埃及伊蚊、家蝇、黑腹果蝇和线虫的CYP6家族的P450的氨基酸序列存在同源性.Northern杂交分析显示,在褐飞虱取食抗性水稻后,P450基因的表达水平明显升高.以上结果表明,P450基因的表达受抗性水稻的诱导,该基因在褐飞虱对抗性水稻的耐受性和解毒方面可能起着重要作用.; 杨之帆何光存; 关键词：褐飞虱 RT-PCR 细胞色素P450基因

药用野生稻应答稻飞虱取食过程中基因表达的研究被引量：5: 2005年; 褐飞虱和白背飞虱是水稻的刺吸式害虫。为了探讨水稻对虫害反应的分子机理,采用cDNA-AFLP(互补DNA扩增片段长度多态性)技术,研究了药用野生稻受这两种飞虱取食后基因表达的变化。通过调查约7%的虫应答后的药用野生稻转录本组,共分离了258个差异片段,测序112个;44个片段对应于已知或假定功能基因,其中35个基因的表达水平在白背飞虱为害后发生改变,24个基因在褐飞虱为害后改变。下调的基因比上调的基因多。有14个基因受这两种飞虱共同调节(2个上调,12个下调)。结果表明,药用野生稻对两种飞虱为害作出的反应有所不同。; 张富铁庄延杨之帆杨海元祝莉莉何光存; 关键词：褐飞虱白背飞虱药用野生稻

褐飞虱取食水稻幼苗cDNA文库的构建及筛选被引量：3: 2005年; 以褐飞虱取食 3 2 h的水稻幼苗为材料构建了 c DNA文库 ,初始文库含 3 .2× 1 0 6 个克隆 ,重组率为 86%,取 1 .0× 1 0 6个克隆子扩增一次 ,收集到 80 m L滴度为 1 .2× 1 0 9pfu/ m L的扩增文库 .随机挑取 2 0个克隆以 T7和 M1 3 reverse为引物进行 PCR扩增 ,以鉴定插入片段的大小 ,结果发现多数片段的长度在 1～ 4.0Kb左右 ,少数片段在 4Kb以上 ,个别片段在 6Kb左右 .以在受褐飞虱取食的水稻幼苗中特异表达的 ESTBp Hi0 0 8为探针 ,筛选 c DNA文库 ,得到该基因的 c; 袁红雨祝莉莉何光存; 关键词：全长CDNA文库水稻褐飞虱

In situ localization of proteinase inhibitor mRNA in rice plant challenged by brown planthopper被引量：10: 2003年; Proteinase inhibitor (PI) mRNA was localized by in situ hybridization in tissue sections of root, stem and leaf of the resistant rice (B5) plant fed by brown planthopper nymphs. In the rice material without BPH feeding, PI gene was expressed in the root, stem and leaf, while the abundance of PI mRNA was low. In the rice material fed by BPH, PI gene was expressed substantially in the parenchyma of rice stem and leaf, but weakly in the root. The results indicated that the PI gene was up-regulated in the rice plant challenged by brown planthopper. For the first time, we reported the expression changes of proteinase inhibitor gene in plant which was infested by a piercing/sucking insect.; WENG Qingmei, HUANG Zhen, WANG Xiaolan, ZHU Lili & HE Guangcun Key Laboratory of the Ministry of Education for Plant Developmental Biology, College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China; 关键词：蛋白酶抑制剂 MRNA 褐飞虱病虫害防冶

褐飞虱NADH泛醌氧化还原酶51kDa亚基cDNA片段的克隆及表达分析被引量：3: 2006年; NADH泛醌氧化还原酶是动物体内呼吸链电子传递系统的第一个酶,克隆水稻害虫褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶基因,及研究其在褐飞虱与水稻互作中的表达变化,将为科学防治褐飞虱提供新的线索。利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术克隆了褐飞虱NADH泛醌氧化还原酶51 kDa亚基基因的cDNA片段,并进行了序列测定;使用Northern杂交技术检测了该基因对两种不同抗性水稻的分子反应。分子杂交结果表明,在取食抗性水稻品种B5后,褐飞虱的NADH泛醌氧化还原酶51 kDa亚基基因表达水平明显升高,而取食感虫水稻TN1后,该基因的表达水平没有明显变化。; 杨之帆何光存; 关键词：褐飞虱

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