国家自然科学基金(81060286) 作品数:8 被引量:17 H指数:3 相关作者: 黄礼明 姚宇红 马武开 仇江辉 宋益青 更多>> 相关机构: 贵阳中医学院 贵阳中医学院第二附属医院 北京市昌平区南口医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
扶正透毒祛毒复方对髓系微小残留白血病患者CD34^+细胞源树突状细胞的影响 被引量:5 2013年 目的研究扶正透毒祛毒复方加味青蒿鳖甲汤对髓系微小残留白血病(MRD-L)患者骨髓CD34+细胞源树突状细胞(DC)的影响。方法用Ficoll离心法分离急性髓系MRD-L患者骨髓单个核细胞(BMNC),采用免疫磁珠分选出CD 34+细胞,并培养扩增,用不同浓度中药含药血清联合细胞因子进行体外诱导培养DC,倒置显微镜下观察DC的形态学特征,流式细胞术检测DC表面分子CD 83、CD 80、CD 86、CD 1a、HLA-DR的表达。诱导转化成熟的DC分别激发异体、自体T细胞,MTT法检测激发后的T细胞在不同效靶比时对人白血病细胞株K562的杀伤作用。结果各中药含药血清联合细胞因子培养髓系MRD-L患者CD 34+9 d后均能促进CD 34+分化为形态特征典型的DC,各中药联合细胞因子组、细胞因子组均明显上调CD 83、CD 80、CD 86、HLA-DR的表达,与胎牛血清及空白兔血清对照组比较有统计意义(P<0.01),中剂量及低剂量含药血清组能促进CD 1a的表达提高,与高剂量组、细胞因子组比较有差异(P<0.01),其余各组无明显差异。DC激发T细胞杀伤K562细胞,各中药联合细胞因子组的杀伤率均高于细胞因子组、胎牛血清组和空白兔血清组,其中中剂量和低剂量组又明显优于(P<0.01)或优于(P<0.05)细胞因子组、胎牛血清组和空白兔血清组。T细胞的杀伤作用随效靶比的增高而增强,正常T细胞与患者T细胞对K562细胞的杀伤作用无明显差异(P>0.05)。结论加味青蒿鳖甲汤能促进髓系MRD-L患者CD 34+细胞向DC转化。 仇江辉 黄礼明 赵国静 宋益青 刘健 马武开 姚宇红 李秀军 冯晓燕 王雷关键词:微小残留白血病 加味青蒿鳖甲汤 树突状细胞 青蒿鳖甲汤对急性白血病缓解期患者CD34^+源DC诱导过程中IL-12的影响 被引量:2 2014年 目的:探讨青蒿鳖甲汤对AML-CR患者CD34+源DC诱导过程IL-12的影响。方法:选择贵州省人民医院AML-CR患者4例,免疫磁珠法提取CD34+细胞后以细胞因子扩增CD34+细胞,再以含药血清与细胞因子共诱导DC,观察DC形态,ILISA法分别检测第0、6、9天的IL-12水平。结果:各组IL-12水平随DC的逐渐成熟而逐渐升高,其中含药血清组与空白、因子组比较有显著差异(P<0.05),其中高剂量组与中低剂量组比较有显著差异(P<0.05),高剂量组与因子、空白组比较有显著差异(P<0.01),中剂量组与低剂量组、因子与空白组比较无显著差异(P>0.05)。结论:青蒿鳖甲汤在体外能从造血干细胞层面提高AML-CR患者IL-12水平,且以高剂量组效果最佳。 肖洋 黄礼明关键词:IL-12 青蒿鳖甲汤 CD34+细胞 DC 透毒复方对急性髓系白血病完全缓解患者CD34+胞源树突状细胞生物学效应的影响 被引量:1 2013年 目的研究透毒复方青蒿鳖甲汤对急性髓系白血病完全缓解期(AML—CR)患者骨髓c毗细胞来源树突状细胞(DC)生物学效应的影响。方法分离纯化骨髓CD34细胞,体外不同浓度透毒中药含药血清与细胞因子联合诱导分化为DC,观察DC形态特征,流式细胞术检测DC表面分子CD80 CD83、CD86的表达,将DC分别与自体、异体外周血T细胞共同培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测激活的T细胞不同效靶比对人类白血病细胞株(K562细胞)的杀伤效应。结果青蒿鳖甲汤联合细胞因子能促进AML-CR患者骨髓CD;分化为形态典型DC,不同剂量含药血清均能上调DC表面特征性分子及共刺激分子CD80 CD83、CD86比例,较单纯细胞因子组比较差异有统计学意义(P〈0.01),且含药血清组较单纯细胞因子更能激发外周血T淋巴细胞对K562细胞的杀伤作用,两者间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论青蒿鳖甲汤能促进髓系微小残留白血病患者CD34细胞向DC转化,提高DC的生物学效应。 宋益青 黄礼明 马武开 姚宇红 李秀军 唐志宇 冯晓燕 刘健 仇江辉 赵国静关键词:青蒿鳖甲汤 CD34+细胞 树突状细胞 微小残留白血病 扶正透毒祛毒复方对髓系MRD-L患者CD34+细胞源DC诱导过程中TNF-α、sTNF-αR的影响 目的:观察加味青蒿鳖甲汤对髓系MRD-L患者CD34~+细胞源DC诱导过程中对TNF-α、sTNF-αR的影响,探讨扶正透毒祛毒复方影响MRD-L患者CD34~+细胞源DC诱导及生物学效应的机制。方法:制备中药含药血清。... 赵国静 黄礼明 仇江辉 宋益青 刘健 马武开 姚宇红 李秀军 冯晓燕 王雷关键词:DC 文献传递 青蒿鳖甲汤对MRD-L患者CD34+细胞源DC诱导过程中sTNFαR的影响 被引量:6 2014年 目的:观察青蒿鳖甲汤对髓系微小残留白血病(MRD-L)CD34+细胞源树突状细胞(DC)诱导过程中sTNFR的影响。方法:体外扩增从MRD-L患者骨髓单个核细胞(BMNCs)中分离的CD34+细胞,在高、中、低剂量青蒿鳖甲汤含药血清联合细胞因子的作用下诱导为DC,收集第3、6、9天上清液并观察DC形态,ELISA法测sTNFαR含量。结果:含药血清均能促进DC的诱导,降低sTNFαR含量,与正常兔血清组、细胞因子组有显著差异(P<0.05),且高剂量组效果更甚(P<0.05)。结论:青蒿鳖甲汤含药血清联合细胞因子能更好地诱导MRD-患者来源的CD34+细胞成为DC,降低sTNFαR含量。 陈竹 黄礼明关键词:青蒿鳖甲汤 微小残留白血病 CD34+ 扶正透毒祛毒复方对髓系MRD-L患者CD34^+细胞源DC诱导过程中IL-2、sIL-2R的影响 被引量:3 2014年 【目的】研究扶正透毒祛毒复方(加味青蒿鳖甲汤)中药含药血清对髓系微小残留白血病(minimal residual disease in leukemia,MRD-L)患者CD34+细胞源树突状细胞(DC)诱导培养的不同阶段血清中白细胞介素-2(IL-2)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)的含量变化,探讨扶正透毒祛毒复方影响MRD-L患者CD34+细胞源DC诱导及生物学效应的机制。【方法】将急性髓系白血病缓解期(AML-CR)患者骨髓经Ficoll密度梯度离心获得骨髓单个核细胞(BMNC)后,用免疫磁珠阳性选择法提取CD34+细胞,培养扩增后用不同浓度中药含药血清与细胞因子进行体外培养诱导DC,培养过程中观察细胞的形态,流式细胞仪检测DC表面CD83、CD80、CD86、CD1a、人白细胞DR抗原(HLA-DR)的表达。在培养的第0天、第6天和第9天采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测、比较各组血清中IL-2、sIL-2R的含量。【结果】(1)各中药含药血清联合细胞因子组能促进CD34+细胞分化为形态特征典型的DC,并高表达CD83、CD80、CD86、HLA-DR等DC的表面标志,与胎牛血清及空白兔血清组比较差异有统计学意义(P<0.01),中药中剂量及低剂量含药血清组能促进CD1a的表达提高,与中药高剂量组、细胞因子组比较差异有统计学意义(P<0.01)。(2)IL-2含量:含药血清制成后(第0天),各中药含药血清组均高于空白兔血清组;各中药含药血清联合细胞因子组第9天、第6天均高于第0天,中药中剂量联合细胞因子组第9天显著高于第6天(P<0.01),中药高剂量联合细胞因子组第9天高于第6天(P<0.05);在同一时间内,各中药含药血清联合细胞因子组均高于空白兔血清组。(3)sIL-2R含量:含药血清制成后(第0天),各中药含药血清组均低于空白兔血清组;各中药含药血清联合细胞因子组第9天均显著低于第0天、第6天(P<0.01),中药高剂量联合细胞因子组第6天低于第0天(P<0.05),其余各组第6天与第0天比较差异无统计 仇江辉 黄礼明 赵国静 宋益青 刘健 马武开 姚宇红 李秀军 唐志宇 王雷关键词:DC 青蒿鳖甲汤含药血清对AML-CR患者CD34^+细胞源DC诱导过程中TNF-α的影响 被引量:4 2015年 目的观察透毒复方青蒿鳖甲汤对急性残留白血病(AML-CR)患者CD34+细胞源树突状细胞(DC)诱导过程中对TNF-α含量及DC成熟的影响。方法采取AML-CR患者骨髓,体外扩增从中分离的CD34+细胞,以高、中、低剂量青蒿鳖甲汤含药血清联合细胞因子诱导为DC,收集第0、6、9天上清并观察DC形态,ELISA法测TNF-α含量,流式细胞术检测DC表面抗原表达。结果含药血清均能促进DC的成熟,降低TNFα含量,与正常兔血清组、细胞因子组有显著差异(P<0.05),使DC较高表达CD83、CD86、CD1a、HLA-DR。结论青蒿鳖甲汤含药血清联合细胞因子可促进AMLCR患者来源的CD34+细胞诱导成为成熟DC,并降低TNF-α含量。 陈竹 黄礼明 唐志宇 姚宇红 马武开 肖洋 毕爽 谢昱伟关键词:青蒿鳖甲汤 CD34^+ TNFΑ 加味青蒿鳖甲汤对髓系MRD-L患者CD_(34)^+细胞源DC诱导过程中IL-12的影响 被引量:1 2014年 目的:探讨加味青蒿鳖甲汤对树突细胞(DC)诱导和对IL-12分泌的影响。方法:本研究采用体外培养的方法,用含不同剂量(高、中、低)加味青蒿鳖甲汤动物血清联合细胞因子、不含药血清联合细胞因子及单纯用细胞因子,共同培养缓解期急性髓系白血病(AML-CR)患者骨髓中分离提取的CD+34细胞,诱导其成为DC,观察各组在不同阶段对DC成熟的影响,以及各组血清中IL-12的分泌变化。结果:含药血清均能上调DC表面特征性分子及共刺激分子CD80、CD83、CD86表达水平,较单纯细胞因子组比较有显著性差异(P<0.01),且含中剂量药血清更能促进DC分泌IL-12(P<0.01)。结论:联合细胞因子的含加味青蒿鳖甲汤的血清,可使来源AML-CR骨髓的CD+34,在体外比单纯用细胞因子诱导培养DC能够更好地促进DC的生长、成熟和分化,并能促进DC分泌IL-12,增加抗肿瘤作用。 刘健 黄礼明 唐志宇 宋益青 仇江辉 赵国静 马武开 严鲁萍 姚宇红 李秀军关键词:加味青蒿鳖甲汤 CD34+ DC IL-12 加味青蒿鳖甲汤对急性髓性白血病完全缓解患者CD34^(+)源树突细胞诱导过程中IL-6的影响 被引量:1 2022年 目的探讨加味青蒿鳖甲汤对急性髓性白血病完全缓解患者CD34^(+)源树突细胞(dendritic cell,DC)诱导过程中IL-6的影响。方法以高、中、低剂量的加味青蒿鳖甲汤煎剂灌胃新西兰大白兔制备不同浓度的含药兔血清备用。Ficoll梯度离心法分离骨髓单个核细胞,继予CD34^(+)免疫磁珠提纯得到CD34^(+)细胞。使用Flt-3、IL-3、TPO、SCF等细胞因子体外扩增后,以IFN-α、GM-CSF、IL-4、TNF-α等细胞因子配以不同浓度的含药兔血清进行体外诱导DC。在DC诱导的第0天、第6天、第9天取上清采用ELISA法检测上清液中IL-6的含量,并在第9天使用流式细胞术检测DC表面分子CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR的表达。结果各含药血清+细胞因子组、正常血清+细胞因子组及单纯细胞因子组中IL-6的含量都随着DC诱导成熟天数的增加而逐渐升高(P<0.05);在同一时间内各含药血清+细胞因子组IL-6浓度均较正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组升高(P<0.05)。CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR表面分子在各组中均可表达。CD80表面分子在各组中的表达差异均无统计学意义(P>0.05);CD83、CD86、HLA-DR等的表达在各含药血清+细胞因子组中均较正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组高(P<0.05);含药血清中剂量+细胞因子组与低剂量+细胞因子组中CD1a的表达较高剂量+细胞因子组、正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组高(P<0.05)。结论加味青蒿鳖甲汤能促进急性髓性白血病完全缓解患者CD34+源DC的成熟,且在诱导DC成熟的过程中促进DC分泌IL-6。 尹尚瑾 黄礼明 常宝珠 姚宇红 李秀军 陈涛 宋娟 陈孟豪关键词:急性髓性白血病 加味青蒿鳖甲汤 树突细胞 白细胞介素-6