江西省自然科学基金(2007GZY0589)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：华中科技大学江西省人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- EGFP-N1/hNGFβ逆转录病毒载体的构建及其表达
- 2011年
- 目的构建高表达含人神经生长因子β基因(hNGF-β)的逆转录病毒载体,并检测其在施万细胞中的表达情况。方法从含有hNGF-β的pAAV-SP质粒中克隆出hNGF-β,连接到pEGFP-N1载体中,形成重组逆转录病毒载体pEGFP-N1-NGFβ。用重组体转染施万细胞,经G418筛选出阳性克隆后,用ELISA法检测NGF的表达量。结果 hNGF-β的RT-PCR产物约750bp,双酶切鉴定重组载体为正确重组子。荧光显微镜下观察证实转染的施万细胞表达EGFP,ELISA检测证实转染的施万细胞分泌hNGFβ升高。结论应用体外连接法成功构建了hNGF-β逆转录病毒载体,而且施万细胞能够高效表达NGFβ。
- 陈钢杨彩虹田林强郭风劲陈安民
- 关键词：神经生长因子施万细胞基因表达
- 人神经生长因子基因修饰的许旺细胞治疗脊髓损伤的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)基因修饰的许旺细胞(Schwann cells,SCs)对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复及GAP-43的表达情况,探讨其对脊髓损伤修复的作用机制。方法:清洁级SD大鼠52只,随机分为EGFP-N1-NGF转染许旺移植组16只(A组),许旺细胞移植组16只(B组),PBS对照组12只(C组)和假手术组8只(D组),用改良Allen法制造大鼠脊髓损伤模型。分别于术后7,14,21,28d用BBB评分法观察动物行为学的变化,用肌电图检测动物中枢传导速度和波幅;然后处死动物,取损伤区1cm范围脊髓节段,常规石蜡包埋,组织切片,GAP-43免疫组织染色观察脊髓损伤的组织学变化。结果:BBB评分结果D组>A组>B组>C组;肌电图检测结果显示中枢传导速度A、B、C组间差别有统计学意义P<0.05,D组明显高于其它三组;GAP-43免疫组化检测结果提示A>B>C组,D组仅有少量表达。结论:本研究证实NGF基因修饰的许旺细胞能够促进脊髓损伤的恢复,可能是促进神经轴突的生长有关。
- 田林强陈钢杨彩虹王秋郭风劲陈安民
- 关键词：脊髓损伤神经生长因子许旺细胞
- 体外纯化乳鼠雪旺细胞的三种方法比较被引量：5
- 2010年
- 目的:比较3种体外纯化乳鼠雪旺细胞方法的差异。方法:分别用低浓度胰酶(0.125%)和双十差速贴壁消化法、冷喷注法、磁珠分选法3种不同的方法纯化雪旺细胞,并比较3种方法获得细胞的活力和纯度。结果:差速贴壁消化法所得到的细胞纯度稍低,活力尚可;冷喷注法获得的细胞纯度和活力均较高;磁珠分选法获得的细胞纯度和冷喷注法相当,但是活力稍差。结论:冷喷注法可以获得高纯度和高活力的雪旺细胞。
- 田林强陈钢杨彩虹郭风劲陈安民陈少坚孙凯
- 关键词：许旺细胞纯化
- 体外纯化乳鼠许旺细胞的4种方法比较(英文)被引量：4
- 2010年
- 背景:许旺细胞是外周神经系统中修复神经损伤及神经疾病的主要种子细胞之一。但是,许旺细胞的来源有限,且由于成纤维细胞的污染,使许旺细胞的纯度受到影响。有学者提出了其他的纯化方法,但每种方法都存在其不足之处而不能很好的满足临床应用的需要。目的:比较差速贴壁消化法、冷喷注法、磁珠分选法和G418筛选法4种体外纯化乳鼠许旺细胞方法的差异。方法:取SD大鼠坐骨神经得到所需神经组织。分别用差速贴壁消化法、冷喷注法、磁珠分选法和G418筛选法纯化许旺细胞。比较4种方法获得细胞的活力,免疫组织化学法鉴定许旺细胞并计算纯度。结果与结论:差速贴壁消化法所得到的细胞纯度稍低,活力尚可;冷喷注法获得的细胞纯度和活力均较高;磁珠分选法获得的细胞纯度和冷喷注法相当,但是活力稍差;G418筛选法活力差,纯度高。
- 陈钢杨彩虹田林强郭风劲陈安民孙凯
- 关键词：许旺细胞磁珠分选
