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吉林省科技厅资助项目(20030434)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
徐波
郑永晨
费邵阳
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相关机构:
吉林省第三人民医院
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吉林省科技厅资助项目
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相关领域:
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徐波
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年份
1篇
2007
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人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定
被引量:1
2007年
目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。
徐波
郑永晨
费邵阳
关键词:
基因克隆
原核表达
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