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国家质检总局科技计划项目(J2005J0115)

作品数：6 被引量：40H指数：4
相关作者：樊学军裴晓方邱晋孙敏许欣更多>>
相关机构：四川大学四川出入境检验检疫局成都大学更多>>
发文基金：国家质检总局科技计划项目四川省科技攻关计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 2篇荧光
  • 2篇志贺菌
  • 2篇沙门菌
  • 2篇实时荧光
  • 2篇多重PCR
  • 2篇杆菌
  • 2篇肠杆菌
  • 2篇大肠杆菌O1...
  • 1篇荧光定量
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇质粒
  • 1篇食源
  • 1篇食源性
  • 1篇食源性致病菌
  • 1篇实时荧光PC...
  • 1篇实时荧光定量
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇重组蛋白质
  • 1篇重组质粒

机构

  • 7篇四川大学
  • 6篇四川出入境检...
  • 1篇成都大学
  • 1篇四川国际旅行...

作者

  • 7篇樊学军
  • 6篇裴晓方
  • 3篇邱晋
  • 3篇孙敏
  • 2篇许欣
  • 2篇田绿波
  • 1篇汪东篱
  • 1篇左浩江
  • 1篇周倩
  • 1篇王翠苹
  • 1篇谢志梅
  • 1篇占利
  • 1篇陈肖潇
  • 1篇周爱萍
  • 1篇叶盛
  • 1篇吴志云
  • 1篇沈圣
  • 1篇刘丽英
  • 1篇曾力
  • 1篇张祖昌

传媒

  • 2篇现代预防医学
  • 1篇卫生研究
  • 1篇中国卫生检验...
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇中国国境卫生...

年份

  • 2篇2008
  • 3篇2006
  • 2篇2005
共 6 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR快速检测体系的初步探讨被引量：12
2005年
目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157∶H7的uidA基因、志贺菌的ipaH基因及沙门菌的invA基因序列设计各菌引物,进行PCR扩增及电泳检测。同时优化反应体系,测定体系灵敏度和特异性。结果该多重PCR体系能在12h内同时检测3种目的菌;灵敏度为10～30cfuml;通过对23株目的菌和15株非目的菌检测,提示该体系特异性高。结论初步探讨出能在12h内快速、灵敏、特异地同时测定沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。
何超樊学军汪东篱刘丽英王翠苹裴晓方
关键词：多重PCR沙门菌志贺菌大肠杆菌O157:H7
TaqMan--实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌被引量：7
2008年
[目的]建立TaqMan-实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus,VP)的方法,用于食物中毒快速诊断和食品中VP的污染状况调查。[方法]根据GenBank公布的VP tdh基因序列,设计引物和探针,建立TaqMan-实时荧光PCR快速检测体系,应用于食品中VP检测。[结果]TaqMan-实时荧光PCR快速检测体系灵敏度为1.3×104cfu/ml(33 cfu/PCR反应体系),特异性好,无交叉反应。[结论]TaqMan-实时荧光PCR检测体系灵敏度高,特异性强,能提高VP的检出率和准确性,可应用于VP食品污染状况调查和食物中毒的快速诊断。
叶盛樊学军裴晓方李永儒邱晋
关键词：副溶血性弧菌
裸磁珠对高菌量细菌吸附性能的初步研究被引量：10
2006年
目的:研究不同实验条件下自制裸磁珠对细菌吸附效率,优化吸附条件,为后续裸磁珠的应用研究奠定基础。方法:考察不同的磁珠用量、菌量、孵育温度、孵育时间下磁珠对细菌吸附效率,比较磁珠的保存方法对其吸附率的影响。用磁珠吸附定量细菌后计数残留菌数,计算其吸附率。结果:磁珠用量与吸附率近似正相关,吸附容量与原始菌量存在对数线性相关。温度影响吸附效率。孵育时间40 m in后吸附率无明显差异,达到平衡。此外,干式和湿式保存的磁珠,对试验细菌的吸附率无明显差异。结论:自制裸磁珠以50 mg(干式)37℃孵育40 m in对高菌量试验菌(>106cfu/m l)有较高的吸附效率(>80%),可望用于样品中细菌的分离富集。
樊学军陈恒孙敏邱晋田绿波曾力裴晓方
关键词：吸附率
自制裸磁珠对常见食源性致病菌吸附性能的研究被引量：12
2006年
目的:研究自制裸磁珠对常见食源性致病菌和卫生指示菌的吸附性能,摸索从样品中快速分离和浓集细菌的方法。方法:试验裸磁珠对细菌的吸附性能,摸索温度和样品成分对其吸附性能的影响。结果:自制裸磁珠在37℃对常见食源性致病菌和卫生指示菌有很强的吸附,吸附率均高于97%。食品成分对其吸附有一定影响,吸附率最低为58.42%。结论:自制裸磁珠可望用于环境和食品样品中多种细菌的非特异性吸附分离和浓集,值得进一步研究和推广。
邱晋樊学军沈圣孙敏谢志梅腾毅许欣裴晓方
关键词：食源性致病菌
重组沙门菌侵袭蛋白A的原核表达与纯化被引量：3
2006年
目的在大肠杆菌中表达重组沙门菌侵袭蛋白A,并对表达产物进行分离和纯化。方法提取沙门菌基因组模板,PCR扩增侵袭因子invA基因目的片段,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-invA重组子,经双酶切和测序证实后,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE和Westernblot检测鉴定表达蛋白。结果成功构建了沙门菌pET-invA大肠杆菌表达重组子,实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达,分离纯化的表达产物纯度达到电泳纯。结论沙门菌侵袭蛋白A的成功表达和分离纯化,为该蛋白的免疫学性能研究、相应抗体的制备以及沙门菌快速检测方法的建立奠定了基础。
周爱萍张祖昌许欣樊学军占利孙敏裴晓方
关键词：重组蛋白质原核表达
实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌重组质粒标准的构建被引量：1
2008年
〔目的〕构建蜡样芽胞杆菌16s-23sITS重组质粒,为实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌提供质粒标准。〔方法〕选择蜡样芽胞杆菌16s-23sITS特异基因作为目的靶序列,设计、合成引物和探针,采用普通PCR扩增特异靶序列,克隆到pGM-T载体后,转化感受态大肠埃希菌DH5,α经蓝白斑筛选,再分别用EcoRI酶切,普通PCR及测序3种方法证实目的片段已成功重组。建立荧光定量PCR检测蜡样芽胞杆菌的标准曲线。〔结果〕成功构建目的重组质粒,并以此为标准制作荧光定量PCR标准曲线,重组质粒标准具有较大的线性范围(102copies/μl～108copies/lμ)和灵敏度。〔结论〕该方法构建的16s-23sITS基因重组质粒能满足实时荧光定量测定对参考标准的要求,为后续实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的推广应用提供了条件。
田绿波左浩江陈肖潇周倩樊学军吴志云裴晓方
关键词：重组质粒实时荧光定量PCR
沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7的多重PCR快速检测体系的初步探讨
目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157.H7的多重PCR体系。方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157 H7的uidA基因、志贺菌的i...
何超樊学军汪东篱刘丽英王翠苹裴晓方
关键词：多重PCR沙门菌志贺菌
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