国家教育部博士点基金(20070226015)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：林志国刘利沈红杨富明宋洪利更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学武警黑龙江省总队医院靖江市人民医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金黑龙江省“十五”科技攻关项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经干细胞移植于慢性癫痫鼠海马CA3区对其癫痫发作影响的研究被引量：3
- 2009年
- 目的研究神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植到慢性海人酸(kainic acid,KA)癫痫鼠海马CA3区后对大鼠癫痫发作的影响。方法用KA脑室注射制作慢性癫痫模型。将原代培养的、EGFP标记的NSCs移植到慢性癫痫鼠的海马CA3区。分别在移植后第2周、第4周、第8周和第12周连续进行7天观察大鼠癫痫发作频率和程度,在移植后第10周进行发作间期右侧海马深部脑电监测。然后取脑冰冻切片,在倒置荧光显微镜下直接观察移植细胞的存活和迁移,用免疫荧光染色观察移植细胞分化情况,Ti mm's染色观察海马齿状回异常苔状纤维发芽。结果移植后12周仍有大量移植细胞存活(65,045.00±881.72)。NSCs在移植区以胶质细胞分化为主,在齿状回和海马各区以神经元分化为主,γ-氨基丁酸(GABA)能神经元在齿状回门区和海马CA3区分化比率较高。NSCs移植后第4周移植组癫痫鼠的发作次数与对照组相比开始减少,Ti mm's染色计分和发作程度也有明显改善,两组发作间期脑电图尖、棘波在每个观察期的发放次数分别是3.83±4.96和27.16±21.08。结论将NSCs移植到慢性KA癫痫鼠的海马CA3区,移植细胞不仅能够长期存活、迁移到海马齿状回的各区,而且能够分化为神经元和神经胶质细胞,特别是GABA能神经元,同时还能够抑制齿状回颗粒细胞的苔状纤维发芽,从而减少癫痫发作次数,减轻癫痫发作程度。
- 车彦军林志国杨富明刘利
- 关键词：神经干细胞海马癫痫
- GAD_(65)基因转染神经干细胞的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的检测神经干细胞经谷氨酸脱羧酶(GAD65)基因转染并诱导分化后γ-氨基丁酸(GABA)的表达,为GAD65基因修饰神经干细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法采用新一代高效脂质体作为转染试剂的基因转导方法转染神经干细胞,通过免疫细胞荧光方法鉴定神经干细胞分化为GABA阳性神经元情况。结果采用脂质体转染方法能成功地将GAD65基因转染至神经干细胞中,转染的神经干细胞在分化第7天及第14天GABA阳性神经元分别占(31.9±4.2)%、(26.5±2.3)%,未转染的神经干细胞分化的GABA阳性神经元则分别占(28.4±1.9)%和(20.3±3.5)%,转染者与未转染者相比,分化的GABA阳性神经元百分比有显著性差异(P<0.05)。结论采用脂质体基因转染技术,可以将GAD65基因转染至神经干细胞中,并促进神经干细胞分化为GABA神经元。
- 沈红李洪武宋洪利刘利林志国
- 关键词：Γ-氨基丁酸
- 癫痫细胞悬液对海马干细胞分化的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 观察癫痫大鼠海马细胞悬液对海马干细胞分化的影响.方法 实验分为对照组、谷氨酸组（包括5 μmol/mL、25 μmol/mL2个亚组）、正常大鼠海马细胞悬液组（包括20μg/mL、40μg/mL 2个亚组）及癫痫细胞悬液组（包括20 μg/mL、40 μg/mL 2个亚组）,分别向接种了海马干细胞神经球的96孔培养板内加入培养基、相应浓度谷氨酸、正常大鼠海马细胞悬液及癫痫细胞悬液,应用MTT法比较4组在分化第1、7、10、14天之间海马干细胞分化活力.结果随着分化时间的延长,各组MTT值均呈增加趋势.各浓度谷氨酸组及正常海马细胞悬液组细胞活力较对照组下降,而癫痫细胞悬液组的细胞活力较对照组轻微增加.但差异没有统计学意义（p〉05）.相同浓度的癫痫细胞悬液组与正常海马细胞悬液组之间 MTT值差异没有统计学意义（p〉0.05）.结论 癫痫细胞悬液未对海马干细胞的分化产生影响.
- 沈红刘利林志国
- 关键词：干细胞移植细胞分化癫痫微环境
