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新疆生产建设兵团科技攻关计划项目(NKB025DXNK01SW)
作品数:
1
被引量:8
H指数:1
相关作者:
李晨
王爱英
张煜星
祝建波
沈海涛
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相关机构:
石河子大学
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发文基金:
新疆生产建设兵团科技攻关计划项目
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1篇
2010
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利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库
被引量:8
2010年
以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重组反应将雪莲cDNA重组到植物表达载体pLEELA上,从而构建了天山雪莲cDNA表达文库。结果表明:cDNA入门文库滴度达到1.2×107cfu/mL,文库总容量为4.8×107cfu。表达文库的滴度为6.9×106cfu/mL,文库总容量为2.76×107cfu,插入片段平均大小1000 bp。阳性克隆率100%。天山雪莲cDNA表达文库的建立为进一步高通量筛选天山雪莲抗寒基因奠定了基础。
李晨
沈海涛
张煜星
王爱英
祝建波
关键词:
天山雪莲
CDNA表达文库
GATEWAY技术
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