目的探讨Beclin 1蛋白与三阴性乳腺癌细胞对5-Fu敏感度的关系。方法应用慢病毒介导p Len O-GTP-BECN1表达载体稳定转染至BT-549细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞,设立对照组。使用不同浓度5-Fu处理各组细胞,MTT法比较细胞对5-Fu的敏感度;流式细胞术和Hoechst33342实验检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-8表达情况。结果成功构建稳定表达Beclin 1蛋白的BT-549细胞株。p Len O-GTP-BECN1组对5-Fu敏感度显著高于其他两组;5-Fu作用48 h后,p Len O-GTP-BECN1组的IC50为(3.54±0.20)μg/ml,显著低于空白载体p Len O-GTP组(14.45±1.81)μg/ml和空白组(79.40±8.34)μg/ml(F=207.902;P<0.00)。5-Fu作用前,p Len O-GTP-BECN1组凋亡率为(12.14±0.76)%,同p Len O-GTP组(13.57±1.04)%和空白组(13.75±1.29)%(F=2.096;P=0.204)之间差异并无统计学意义;5-Fu作用48 h后,p Len O-GTP-BECN1组凋亡率为(51.01±3.26)%,显著高于p Len O-GTP组(42.17±4.6)%和空白组(38.42±2.93)%(F=9.32;P<0.01);接受5-Fu处理后,p Len O-GTP-BECN1组细胞核凋亡特征改变较其他两组更明显。5-Fu作用后,p Len O-GTP-BECN1组细胞Caspase-3相对表达量为(0.57±0.0028),显著高于p Len O-GTP组(0.42±0.010)和空白组(0.30±0.046)(F=46.134;P<0.01);p Len O-GTP-BECN1组细胞Caspase-8相对表达量为(0.44±0.0038),显著高于p Len O-GTP组(0.18±0.0095)和空白组(0.27±0.00060)(F=1006.757;P<0.00)。结论Beclin 1显著提高三阴性乳腺癌细胞对5-Fu的敏感度,其中促进凋亡发生可能是重要机制之一。
