国家自然科学基金(30571049)
- 作品数：12 被引量：68H指数：5
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- 2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响被引量：11
- 2009年
- [目的]探究2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织培养的影响。[方法]在愈伤组织诱导和分化培养基中设置不同的2,4-D和6-BA浓度,研究2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导、成苗及再生幼苗生根的影响。[结果]在含0.5 mg/L2,4-D的培养基中,嘉育948、盐恢559、扬籼6547、中二软占、明恢86、广恢998、遵籼3号等7个品种的愈伤组织诱导效果最佳;在含最适2,4-D浓度的诱导培养基中再添加0.2 mg/L6-BA对愈伤组织诱导率作用不明显,但抑制愈伤组织分化成苗;在分化培养基中适当降低6-BA浓度,既能保证愈伤组织成苗率不下降甚至上升,又可以提高再生植株的质量。[结论]该研究结果为2,4-D和6-BA在籼稻愈伤组织培养中的合理使用提供借鉴。
- 苗春波万志刚孙丙耀
- 关键词：籼稻愈伤组织2,4-D6-BA
- 适于TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法的优化被引量：3
- 2009年
- [目的]筛选适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[方法]采用5种方法提取水稻叶片基因组DNA,筛选出DNA纯度及浓度较高的、适合作为TAIL-PCR模板的水稻基因组DNA提取方法。[结果]改良的SDS法及CTAB法提取的基因组DNA纯度及浓度较高,效果明显优于脲法及简易法。以TAIL-PCR技术对选择的同一个含Ds元件的样品的5种提取方法的基因组DNA作为模板进行Ds侧翼序列的扩增,改良的SDS法及CTAB法得到的条带特异,这些产物经回收、纯化后可直接用于序列的测定。但考虑到CTAB价格比较昂贵,毒性较大,一般不主张采用。[结论]改良的SDS法提取的水稻基因组DNA最适作为TAIL-PCR的模板。
- 袁云香孙丙耀
- 关键词：水稻基因组DNA
- 一个有Ds插入引起的泡状细胞异常水稻卷叶突变体被引量：2
- 2012年
- 基于Ac/Ds插入突变系统,筛选到一株水稻卷叶突变体.对该突变体进行了初步的表型观察和叶片组织的解剖结构显微观察.利用PCR技术对Ds插入进行了验证,同时,扩增分离了Ds侧翼序列,通过在线比对分析了Ds在该突变体基因组上的插入位点.结果显示,该突变体在幼苗期和成熟期均呈稳定的卷叶表型,叶片泡状细胞在数目和形状上存在明显不同于野生型的异常.研究还证实,突变体基因组含Ac/Ds双元件,Ds定位于水稻第10号染色体上.因而,该突变体为Ds插入的泡状细胞异常的水稻卷叶突变体.本研究为在分子水平上揭示Ds标记基因在泡状细胞发育和分化中的作用奠定了基础.
- 王晓顾福根孙丙耀
- 关键词：水稻卷叶
- 2,4-D和6-BA对籼稻成熟胚愈伤组织诱导和植株再生的影响被引量：15
- 2009年
- 1材料与方法
1．1材料供试材料为12个籼稻品种的成熟种子（籽实）。其中，籼小粘、嘉育948、中二软占、湘晚籼1号、遵籼3号、中鉴1006个品种由国家水稻种质资源中期库提供，扬稻6号、扬籼6547、盐恢559、镇恢084、广恢998、明恢86六个品种由江苏太湖农业科学研究所提供。
- 苗春波万志刚孙丙耀
- 关键词：愈伤组织诱导植株再生6-BA成熟胚嘉育948盐恢559
- Ca^(2+)对水稻Ac/Ds愈伤组织增殖·分化及生根的影响被引量：4
- 2008年
- [目的]研究Ca2+对水稻Ac/Ds愈伤组织增殖、分化及生根的影响。[方法]选用水稻品种Dongjin的Ac/Ds插入突变株系的种子,从成熟胚盾片诱导出愈伤组织,在筛选出的最适增殖、分化及生根培养基中添加不同浓度的Ca2+,研究Ca2+对水稻愈伤组织增殖、分化及生根的影响。[结果]适当增加Ca2+浓度能提高水稻愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株生根条数及根长,当Ca2+浓度为6.0mmol/L时效果最佳,当Ca2+浓度为7.5~15.0 mmol/L时水稻愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株的生根条数及根长呈下降趋势。[结论]适当增加培养基中Ca2+浓度可提高水稻Ac/Ds愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株生根条数及根长。
- 袁云香万志刚石丹白建江孙丙耀
- 关键词：水稻CA^2+再分化
- 水稻Ac×Ds后代基因组DNA中Ds侧翼序列的扩增及其Ds插入分析被引量：8
- 2006年
- 采用TAIL-PCR技术从经鉴定含Ac/Ds双元件的材料中扩增Ds侧翼序列并测序,对水稻Ac×Ds后代基因组DNA进行Ac和Ds插入的PCR分析。利用NCBI的BLAST软件,以Ds侧翼序列为待查询序列进行GenBank在线搜索比对,获得Ds插入相关基因的染色体定位和功能注释等信息。对扩增的93个有效Ds侧翼序列进行分析,结果显示,有21个水稻杂交后代中Ds插入于基因编码区,其余72个插入在基因间序列,其中12个插入在特定基因的上游3kb以内的间隔区。本研究强调了提高Ds侧翼序列扩增和Ac/Ds植株筛选效率的技术关键。
- 孙丙耀谈建中陆小平曲春香万志刚顾福根
- 关键词：水稻
- 水稻愈伤组织再分化培养方法的优化被引量：17
- 2008年
- 在水稻愈伤组织再分化培养基中添加不同浓度配比的6-BA、iP、NAA三种植物生长调节物质,组成34种不同的幼苗分化培养基,对水稻愈伤组织进行再分化培养。结果表明:(1)培养基中添加2 mg/L 6-BA+2 mg/L iP+0.2 mg/LNAA有利于水稻愈伤组织形成绿点;(2)采用三步分化法,对于已分化出绿点的水稻愈伤组织,能明显提高成苗率。
- 袁云香万志刚孙丙耀
- 关键词：水稻愈伤组织再分化
- 水稻分离群体中半矮秆和致死性黄苗突变体的形成机理研究
- 2010年
- [目的]鉴定sdwrky和lysrcc1突变体的Ds插入突变基因,初步分析sdwrky和lysrcc1突变体形成的分子机理。[方法]采用TAIL-PCR技术,分别从sdwrky突变体和lysrcc1突变体克隆Ds侧翼基因序列,并进行序列分析。[结果]Ds分别插入sdwrky突变体4号染色体Os04g0597300(sdwrky)基因和lysrcc1突变体3号染色体Os03g0599600(lysrcc1)基因,导致sdwrky和lysrcc1基因突变。[结论]sdwrky基因编码包含WRKY结构域的蛋白质(SDWRKY),推测SDWRKY与OsWRKY24具相似功能,作为糊粉层细胞内ABA和GA信号传导途径中共同的抑制因子,调控水稻种子萌发及幼苗生长,Sdwrky基因突变导致形成sdwrky突变体。lysrcc1基因编码包含RCC1结构域的蛋白质(LYSRCC1),LYSRCC1可能作为RanGEF参与核质运输,影响叶绿体合成的某一环节,lysrcc1基因隐性突变导致形成ylrcc1突变体。
- 张永华孙丙耀
- 关键词：水稻WRKY
- 水稻Ds插入双分蘖突变体形成机理的分析被引量：10
- 2007年
- 在水稻Ds插入突变株筛选过程中,发现1个在同一分蘖节形成大、小2个分蘖的双分蘖突变体dt1(double tillersmutant),两个分蘖均可正常抽穗形成有效分蘖。采用TAIL-PCR技术,从该突变体中克隆了Ds插入的侧翼序列,将该序列作为查询序列进行核苷酸序列数据库(NCBI-BLAST)在线比对分析,发现所克隆的Ds侧翼序列与3号染色体的克隆OJ1345H02(gi|21281466)序列同一性达100%。以FGENESH和GeneMark.hmm两种软件分别对Ds插入基因的结构进行分析,在外显子的数目、大小、位置等方面均得出高度一致的结果。同时,用NCBI Entrez server和Pfam等软件对该基因进行功能预测,推测的基因编码产物含保守的FH2结构域,为水稻类形成素蛋白。突变体后代Ds插入基因型分析显示,其后代出现分离,表明该突变体为Ds插入杂合体。
- 孙丙耀顾福根袁云香谈建中万志刚陆小平
- 关键词：水稻
- 水稻Ds插入具芒突变体相关基因的功能预测被引量：1
- 2011年
- [目的]研究水稻Ds插入具芒突变体形成的分子机理。[方法]采用TAIL-PCR技术,从水稻Ds插入具芒突变体中克隆出Ds侧翼基因序列,分析被插入基因的结构,并分析预测基因编码的蛋白功能。[结果]Ds插入在具芒突变体7号染色体Os07g0588700基因前1 339 bp处。Ds插入位置的下游基因编码产物含一个锌指区CX2CX3FX5LX2HX3H,且含高度保守的QALGGH保守区,为水稻的单锌指蛋白。[结论]Ds转座元件插入基因组中,影响了编码锌指蛋白基因的表达调控,使突变体显示出具芒的表型。
- 张楠孙丙耀
- 关键词：水稻突变体
