“十二五”国家科技计划农村领域(2011AA10020605)
- 作品数：30 被引量：144H指数：8
- 相关作者：徐碧玉金志强贾彩红刘菊华张建斌更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学华中农业大学更多>>
- 发文基金：“十二五”国家科技计划农村领域国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 几丁质酶及基因参与水杨酸诱导香蕉枯萎病抗性被引量：4
- 2015年
- 由尖孢镰刀菌古巴专化型真菌引起的香蕉枯萎病已成为最具毁灭性的香蕉病害,严重威胁香蕉产业的健康可持续发展。因此对香蕉枯萎病病程相关基因的研究显得尤为重要。比较了Foc4侵染下,香蕉6个病菌应答相关基因的表达;分析了Foc4处理和SA+Foc4处理的易感病巴西蕉幼苗外部形态特征、几丁质酶活性及几丁质酶基因表达的变化。结果发现Ma-14-3-3c、Ma-14-3-3d、Ma-14-3-3e、Ma-14-3-3f、Ma-Cel和MaChi 6个基因都能在转录水平响应Foc4的胁迫;与Foc4处理相比较,SA+Foc4处理的香蕉幼苗枯萎病抗性增强,根系几丁质酶活性和几丁质酶基因表达水平提高。表明几丁质酶等6个基因参与了香蕉枯萎病的生物逆境胁迫应答,同时外源水杨酸处理能够通过诱导香蕉几丁质酶的活性及几丁质酶基因的表达增强香蕉对枯萎病的抗性。
- 侯晓婉徐碧玉胡伟颜彦金志强
- 关键词：香蕉水杨酸几丁质酶
- MaAQP1过表达拟南芥及对转基因植株抗旱性的分析被引量：3
- 2014年
- MaAQP1属于水通道蛋白家族的基因,其能响应干旱胁迫。构建植物表达载体pCAMBIA1304-MaAQP1获得转基因拟南芥植株,GUS染色分析表明,其主要分布于转基因植株的根部。通过Southern blot检测,选取双拷贝和单拷贝的两个转基因植株进行后续试验。与野生型植株相比,经过干旱胁迫处理后,转基因植株具有较高的存活率,脯氨酸、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量增加,同时其丙二醛含量降低,提高了对干旱胁迫的抵御能力。
- 许奕徐碧玉胡伟宋顺李羽佳王安邦金志强
- 关键词：水通道蛋白转基因拟南芥GUS
- 染色质免疫共沉淀超声波破碎条件的研究被引量：2
- 2012年
- 意在找出拟南芥幼苗适宜的染色质免疫共沉淀(ChIP)超声波破碎的条件,为后期抗体的沉淀提供适当大小的片段。以拟南芥(Columbia ecotype)幼苗为材料,用1%浓度甲醛的缓冲液交联DNA和蛋白质,利用超声波将其染色质随机断裂成适当大小的片段。结果表明,适用于拟南芥幼苗的最佳ChIP试验条件为:用1%甲醛溶液交联DNA和蛋白质的复合物;用65%功率,每次工作20s,间隔4min,8次破碎该复合物,可以得到400～800bp大小的片段,用于后续的试验。经本实验的研究得到了拟南芥幼苗染色质免疫共沉淀超声波破碎的最佳条件,为后续实验奠定了基础。
- 张丽丽徐碧玉刘菊华贾彩红张建斌王甲水金志强
- 关键词：拟南芥
- 香蕉果实MaGBSSI基因家族的克隆及表达分析被引量：3
- 2014年
- 以＂巴西＂蕉（Musa acuminata L.AAA group cv.Brazilian）为试材,利用同源克隆法获得4个颗粒结合淀粉合成酶I（Granule-Bound Starch Synthase I,GBSSI）基因家族成员的cDNA全长,运用MEGA 5.05软件进行聚类分析,并通过quantitative real-time PCR（qPCR）技术检测MaGBSSI基因家族成员在香蕉果实不同发育时期及成熟阶段和不同组织中的表达情况。结果表明：香蕉4个MaGBSSI基因家族成员MaGBSSI-1、MaGBSSI-2、MaGBSSI-3、MaGBSSI-4的cDNA全长分别为1 851、1 851、675、1 845bp,登录号分别为KF512020、KF512021、KF512022、KF512023。聚类分析发现,香蕉MaGBSSI基因家族与其它植物GBSSI基因同源性达65%。qPCR分析发现,MaGBSSI-1、MaGBSSI-2、MaGBSSI-4在香蕉根、球茎、叶片和苞片等营养器官中明显上调表达,而MaGBSSI-3在花、果皮、果肉等生殖器官中表达量比较高,在根、球茎及叶片中几乎不表达。香蕉果实发育过程中,MaGBSSI-1、MaGBSSI-2、MaGBSSI-4在0~30d明显上调表达,而MaGBSSI-3在香蕉果实发育30~60d表达量比较高,在0~30d几乎不表达,且随着果实的成熟,MaGBSSI-3表达量逐渐下降。研究结果为阐明香蕉果实的直链淀粉生物合成及降解机制并对其进行表达调控奠定了基础。
- 苗红霞金志强孙佩光刘菊华贾彩红徐碧玉张建斌
- 关键词：香蕉果实克隆
- 香蕉凝集素基因启动子5′远端的分离分析及鉴定
- 2012年
- 在已知香蕉果实特异表达凝集素(BanLec)启动子670 bp序列的基础上,利用染色体步移方法,克隆获得该段序列5′端上游远端序列330 bp,从而得到该启动子1 000 bp序列。通过Promoter predictions、Plant CARE软件分析表明,新获得的BanLec启动子5′端330 bp序列中具有更多组织特异性表达调控元件。构建总长度为1 000 bp的BanLec启动子表达载体,以35 S启动子和原有670 bp长度BanLec启动子表达载体为对照,利用基因枪转化香蕉根、叶和果实,测量GUS基因和GFP基因瞬时表达,结果证明长度为1 000 bp BanLec启动子为果实特异表达启动子,启动活性高于原有的670 bp BanLec启动子和35S启动子。
- 张建斌金志强王纪刘菊华贾彩红徐碧玉
- 关键词：启动子
- 香蕉苹果酸脱氢酶基因克隆及其逆境胁迫表达被引量：14
- 2012年
- 从香蕉果实抑制差减文库中获得一条香蕉苹果酸脱氢酶基因片段,采用RACE技术获得全长,命名为MaMDH;MaMDH基因全长1 249bp,编码332个氨基酸。生物信息学分析预测其编码蛋白分子量约35 448Da,等电点为6.53。与已知植物苹果酸脱氢酶基因相比,氨基酸同源性均达92%。保守结构域分析发现,MaMDH基因具有NAD结合位点、苹果酸结合位点和二聚体结合位点。系统进化树比对分析表明,MaMDH与玉米和小麦的亲缘关系较近。MaMDH基因在乙烯利处理香蕉苗中上调表达;在盐、Al 3+胁迫和香蕉尖孢镰刀菌4号生理小种处理幼苗中先上调表达,后下调表达;在冷害胁迫幼苗中先下调表达,后上调表达;而在干旱胁迫、伤害胁迫幼苗中表达没有明显变化。研究表明,香蕉中的苹果酸脱氢酶基因具有响应生物胁迫和非生物胁迫能力,可能在香蕉适应衰老、盐、铝、低温胁迫和枯萎病菌侵染等逆境中发挥重要作用。
- 张建斌贾彩红邓秋菊金志强刘菊华张建平徐碧玉
- 关键词：香蕉苹果酸脱氢酶逆境胁迫荧光定量PCR
- 香蕉水通道蛋白SIP2-1基因的克隆和表达分析被引量：3
- 2016年
- 从香蕉中克隆了一个水通道蛋白(AQP)基因MaSIP2-1。序列分析表明,该基因存在一个完整的开放阅读框(ORF)717 bp,编码239个氨基酸。多序列比对和进化树分析表明,MaSIP2-1所编码的蛋白与其他植物中AQP编码的蛋白具有较高的一致性。其中与马来西亚野生香蕉、油棕、麻风树、野茶树的AQP编码的氨基酸序列的同源性较高,分别为98%、74%、65%和63%。器官特异性分析表明,Ma SIP2-1在香蕉的根、茎、叶片、花和果实中均有所表达,其中在茎中表达量较高。通过对其在干旱、高盐、低温、涝害胁迫下的表达结果分析显示,该基因响应干旱、高盐、涝害3种胁迫。
- 许奕侯晓婉徐碧玉金志强胡伟宋顺
- 关键词：水通道蛋白SIP香蕉胁迫荧光定量PCR
- 植物小G蛋白基因ROP生物学功能研究进展被引量：5
- 2013年
- ROP(Rho-related GTPases from plants)是高等植物中惟一一类分布广泛的信号小G蛋白,在植物生长、发育、抗逆、抗病和激素信号转导过程中起重要调控作用,被称为"分子开关"。该文综述了近年来植物ROP蛋白的生物学功能研究进展,为其它植物ROP蛋白功能研究提供借鉴。
- 孙佩光苗红霞徐碧玉金志强
- 关键词：植物
- 香蕉海藻糖合成酶基因(MaTPS5)生物学及表达特性分析被引量：6
- 2017年
- 通过研究香蕉Ma TPS5基因的生物学功能,探讨海藻糖合成酶基因在香蕉植株抗逆反应中的作用。利用随机克隆测序法从香蕉根系转录组中获得海藻糖合成酶基因,命名为Ma TPS5。生物信息学分析表明,Ma TPS5全长c DNA序列3 081 bp,完整开放阅读框2 559 bp,编码852个氨基酸;Ma TPS5蛋白属于不稳定、疏水性蛋白,等电点p I6.52,有两个结构域GT1-TPS和TPP,定位于细胞质中,含2个跨膜区域,不存在信号肽;与已知植物TPS氨基酸序列同源性达到77.31%;进化分析表明,香蕉Ma TPS5氨基酸序列与野蕉TPS氨基酸序列聚为一类,说明二者亲缘关系较近,具有共同的祖先。组织特异性表达研究表明Ma TPS5在球茎、叶、花中表达量较高,在根中表达量最低。q RT-PCR分析表明,Ma TPS5响应激素ACC和盐的处理,表达量在24 h均达到极显著水平。在Foc TR4病原菌处理后,表达量升高,并在3个时段保持一致。结果表明,Ma TPS5可能依赖乙烯信号传导途径诱导自身表达,合成海藻糖,参与香蕉抗逆反应。
- 邢文婷李科明贾彩红舒海燕王安邦孙佩光许桂莺
- 关键词：香蕉生物信息学
- 香蕉MaTET基因的克隆与表达分析
- 2015年
- 采用RACE技术克隆香蕉果实采后成熟相关基因Ma TET的全长c DNA,利用生物信息学方法分析Ma TET基因及推导蛋白的序列,再利用RT-PCR技术对该基因的组织器官表达特性和在果实采后成熟过程中的表达特性进行分析。结果表明,Ma TET的c DNA序列全长为1 234 bp,包含一个852 bp的完整开放阅读框,编码283个氨基酸残基,5′端非编码区222 bp,3′端非编码区160 bp,起始密码子为ATG,终止密码子为TAG。Ma TET蛋白具4个跨膜区域,属于四跨膜蛋白(Tetraspanins),拥有多个与信号传导有关的修饰位点,在系统发生上更接近鹰嘴豆、野草莓和番茄等双子叶植物。Ma TET可在香蕉根、茎、叶、花以及果实中表达,在根和叶中的表达量高于其它器官;Ma TET在自然成熟香蕉果实中的微黄(TY)阶段开始上调表达,在黄多于绿(MY)阶段表达量急遽升高,随后降低,乙烯可增强Ma TET表达且表达高峰提前至绿多于黄(MG)阶段,1-MCP抑制Ma TET的表达。
- 姜成东刘菊华徐碧玉贾彩虹苗红霞金志强
- 关键词：香蕉克隆生物信息学
