河南省科技攻关计划(624410041)
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 相关作者：王天云杨瑞杨献军秦川昝玉玺更多>>
- 相关机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 2种制备Taq DNA聚合酶方法的比较被引量：2
- 2008年
- 目的比较2种制备纯化Taq DNA聚合酶的方法,为PCR提供实验用酶。方法Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,IPTG诱导12 h后收集菌体,分别用硫酸铵沉淀法和冻融法进行纯化,SDS-PAGE电泳和PCR扩增分析比较其纯度和活性。结果硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶活性能可有效扩增DNA片段;冻融法制备的Taq DNA聚合酶活性较低。结论硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶优于冻融法,能够达到分子生物学实验中基因扩增的要求。
- 秦川杨献军杨瑞王天云
- 关键词：TAQDNA聚合酶纯化
- 基因载体图谱的阅读
- 2007年
- 载体(vector)是基因工程运载基因的工具,也成为分子生物学研究的常用工具之一。随着基因工程技术的发展,载体的种类也越来越多。介绍了载体的分类、特点,载体的基本要素,并对常见的质粒载体、病毒载体图谱的识别等作了介绍。
- 王天云井长勤
- 关键词：基因工程
- 基因重组Taq DNA聚合酶的制备被引量：7
- 2007年
- 目的制备重组Taq DNA聚合酶,为PCR提供试剂。方法用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导12 h表达Taq DNA聚合酶,溶菌酶、NP40裂解细菌,硫酸铵沉淀、4℃透析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和PCR扩增分析其纯度和活性。结果分离纯化制备的Taq酶,纯度、活性都可与同类产品相比,能有效扩增DNA片段。结论该方法制备可用于PCR的Taq酶具有快速简便的优点。
- 王天云秦川杨瑞杨献军
- 关键词：TAQDNA聚合酶基因工程分离纯化
- 半定量反转录-聚合酶链反应分析大鼠不同组织肌肉生长抑制素基因的表达被引量：9
- 2008年
- 目的：有许多实验已证实，肌肉生长抑制素基因在骨骼肌中有特异性表达，在胚胎成体心脏以及乳腺组织中也检测到表达；但也有报道心脏、肺、脑、肾脏等多种组织中均未检测到肌肉生长抑制素的表达。本实验拟验证肌肉生长抑制素基因在大鼠不同组织中的表达情况。方法：实验于2006-11／2007-05在新乡医学院分子生物学实验室完成。①实验动物：2月龄清洁级SD大鼠，体质量240～280g。②实验方法：采用Trizol试剂从大鼠的肺脏、脑、骨骼肌和心脏组织中提取总RNA。③实验评估：采用半定量反转录-聚合酶链反应技术检测大鼠肺、脑、骨骼肌和心脏组织中肌肉生长抑制素基因的表达情况。结果：在肺、骨骼肌和心脏组织中均检测到肌肉生长抑制素的表达，以骨骼肌中的表达量最高，而在脑中未检测到。结论：肌肉生长抑制素在各个组织中表达情况不一，主要在骨骼肌中进行表达，是组织差异性表达基因。
- 郭丽王天云王俐昝玉玺杨保胜
- 关键词：肌肉生长抑制素
