国家自然科学基金(20672021)
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
- 相关作者：叶秀云饶平凡霍玉书柯李晶李仁宽更多>>
- 相关机构：福州大学美国德州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省教育厅科技项目国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鹿茸冻干粉的酶解及其酶解产物性质的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:通过研究鹿茸冻干粉酶解产物的促成骨细胞增殖活性,抗氧化性以及血管紧张素转化酶I(angiotensin Iconverting enzyme,ACE,EC3.4.15.1)抑制活性,为阐明鹿茸强筋健骨的机制以及揭示鹿茸体内生理功能发挥的机制提供研究线索。方法:采用体内常见的消化酶胃蛋白酶和胰蛋白酶分别和同时对鹿茸冻干粉进行酶解,确定酶解完全的条件,收集相对分子质量小于1万的多肽混合物,对其抗氧化性,ACE抑制活性以及促成骨细胞增殖活性进行研究。结果:鹿茸冻干粉的不同酶解产物对羟自由基的清除效果非常明显,其IC50均低1g·L-1,远低于维生素C的5.5g·L-1,同时胃蛋白酶和双酶酶解产物对ACE抑制效果极佳,胰蛋白酶酶解产物对大鼠成骨细胞(UMR-106细胞)的促增殖作用达73.43%。结论:本实验进一步验证了鹿茸强筋健骨以及强身抗老等传统功效,对于ACE抑制活性的试探性研究也表明鹿茸酶解产物具有潜在的高血压防治功能;本实验结果也为进一步分离提取鹿茸酶解产物中的抗氧化性多肽,ACE抑制活性肽以及促成骨细胞活性肽提供强有力的依据。
- 郑帆李仁宽王辉林庄君明叶秀云
- 关键词：鹿茸酶解成骨细胞ACE抑制活性
- 过氧化氢酶基因定向进化文库的构建及其评价
- 2011年
- 采用易错聚合酶链反应和DNA改组技术构建野生型梅花鹿过氧化氢酶(CAT)基因的突变体文库,并随机对两种方法所得产物各5个样品做序列测定。序列分析结果表明突变率分别为0.329%和27.58%,易错聚合酶链反应体系的错配率可以比普通PCR体系提高约10倍,DNA改组的突变率则更高,但是难以避免由于突变率太高造成的目的基因无法正确翻译这一情况。另外,应用邻接法(neighbor-joining,NJ)对随机选择的过氧化氢酶基因突变体序列和野生型序列做核酸和蛋白质序列的NJ进化树,进化关系与突变率分析基本一致。
- 田亚茸王颖慧徐美爱林峻林娟叶秀云
- 关键词：DNA改组进化树
- 不同加工工艺鹿茸的蛋白成分和活性比较被引量：19
- 2008年
- 比较冻干、冷冻和传统热加工工艺制备的鹿茸药材的蛋白成分和活性差异,并探讨加工工艺对鹿茸药效的影响。用Folin-酚法测定冻干鹿茸水溶性蛋白含量最高(126.54 mg/g),为热炸茸的13.1倍;蛋白在SDS-PAGE电泳上分布广,以分子量60.0 kDa^50.0 kDa的蛋白浓度最高。冻干鹿茸水提物促大鼠成骨样细胞增殖活性(MTT法)高达245.25%,是传统热炸鹿茸的2.2倍;IGF-I分泌量也高达66.3 ng/ml,是热炸茸的1.2倍;抑制肝癌细胞活性为47.64%,是热炸茸的1.4倍。冷冻鲜茸的活性虽低于冻干茸,但也远高于热炸茸。结果说明冻干有可能最大限度地保存鹿茸的活性蛋白,有利于提高鹿茸的药效。
- 柯李晶林冬云黄晓南霍玉书饶平凡叶秀云
- 关键词：鹿茸蛋白活性
- 梅花鹿鹿茸中促PC12细胞增殖蛋白的分离和活性研究被引量：7
- 2009年
- 目的对冻干鹿茸水溶性组分进行分离,并考察鹿茸水溶性组分及其分离组分对PC12细胞的促增殖活性。方法应用S-200分子筛凝胶液相色谱和DEAE阴离子交换液相色谱分离鹿茸水溶性组分,进行蛋白质SDS-PAGE电泳分析,Folin-酚法测定鹿茸样品中的蛋白,并用MTT法测定PC12细胞增殖率。结果鹿茸水溶性组分在13.3 mg/mL能促进PC12细胞增殖47%(P<0.01),其蛋白质量分数为84.2%;经分子筛色谱分离的S200-P2组分具显著促PC12细胞增殖活性(46.0%,97.0μg/mL,P<0.01);经离子交换色谱进一步分离的DEAE-P1组分在51.0μg/mL下的PC12细胞的增殖率为111.5%(P<0.001)。DEAE-P1组分的蛋白主要集中分布于Mr56 000和大于Mr 100 000处。结论冻干鹿茸的水溶性组分及其液相色谱分离的一个大分子蛋白组分具有显著的促PC12细胞增殖活性,提示这个组分与鹿茸的神经生长因子样活性相关。
- 柯李晶聂毅磊叶秀云霍玉书饶平凡周建武
- 关键词：鹿茸阴离子交换色谱PC12细胞细胞增殖
- 梅花鹿骨形态发生蛋白BMP4基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2012年
- 通过提取梅花鹿肝脏总RNA以及采用RT-PCR技术,成功克隆梅花鹿骨形态发生蛋白BMP4基因序列,并对其核酸序列、蛋白质序列,功能保守区、亲疏水性进行生物信息学分析,同时构建序列进化树以及部分结构的三维模型.该序列已提交Genbank(索取号:HQ877675).该研究可为日后通过基因工程手段表达重组梅花鹿BMP蛋白并探究其药理作用提供基础.
- 林峻李仁宽林娟杨捷叶秀云
- 关键词：梅花鹿鹿茸骨形态发生蛋白克隆
