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天山雪莲LEA14基因克隆及功能分析被引量：6: 2013年; 从天山雪莲叶片低温诱导的EST文库中获得了1个胚胎发育晚期丰富蛋白基因(LEA)cDNA全长序列。序列分析表明,该基因含有1个468bp编码155个氨基酸的开放阅读框。NCBI保守域预测此蛋白属于LEA_2家族,命名为SiLEA14。系统进化分析表明,该蛋白与北柴胡的LEA-2蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,SiLEA14表达量在低温、盐和干旱胁迫条件下迅速升高。亚细胞定位结果表明,SiLEA14蛋白定位于细胞核中。利用农杆菌介导法将该基因导入烟草,测定并分析转基因植株在冷冻和盐胁迫处理下的生理指标,结果表明,SiLEA14基因在烟草中的过量表达提高了烟草的抗冻和耐盐能力。; 张林华刘超邱红林王爱英邓福军祝建波; 关键词：天山雪莲基因克隆功能分析

新疆雪莲rbcs基因的克隆及序列分析: 2014年; 为获得新疆雪莲Rubisco(1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶)小亚基基因,并对其序列进行生物信息学分析;从已建立的新疆雪莲cDNA文库中,随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增并测序,测序结果在NCBI网址进行Blast比对,结果发现了2个与rbcs基因同源的序列并命名为sikrbcs1和sikrbcs2;生物信息学分析表明:sikrbcs1基因包含l个540 bp的完整开放阅读框,编码179个氨基酸,sikrbcs2基因包含l个420 bp的完整开放阅读框,编码139个氨基酸。sikrbcs1基因编码的蛋白质的理论等电点是8.90,分子量为20.1042 kD,具有2个跨膜区域,sikrbcs2基因编码的蛋白质理论等电点是7.58,分子量为15.1093 kD,不具有跨膜区域。氨基酸多序列比对表明,Sikrbcs1与黄顶菊和向日葵的相似性最高,达到83.89%,Sikrbcs2与向日葵的相似性最高达到57.54%;系统进化树显示表明,sikrbcs1和sikrbcs2都与菊花亲缘关系最近。; 杨晶张亚敏李曹龙王爱英祝建波; 关键词：新疆雪莲克隆 RBCS

蔗糖转运蛋白VvSUC11和VvSUC12累加作用对提高转基因甜菜含糖量的影响被引量：5: 2014年; 【目的】甜菜是重要的糖料作物,块根中的蔗糖含量是其品质的决定因子。利用基因工程技术将葡萄蔗糖转运蛋白基因(VvSUC11和VvSUC12)导入甜菜块根中,以了解蔗糖转运蛋白是否能提高甜菜的含糖量。【方法】利用葡萄蔗糖转运蛋白基因VvSUC11和VvSUC12构建的根特异性表达植物双价表达载体(pCAMBIA2301-SP1-VvSUC11-SP2-VvSUC12),通过农杆菌介导法转化到甜菜(Beta vulgaris L.)品种KWS-9103中。利用PCR和RT-PCR技术检测目的基因是否整合到甜菜中并表达。将获得的转基因甜菜和对照甜菜生根后移栽大田,对其叶片性状、相关的生理指标、块根重和含糖量进行测定。【结果】通过PCR和RT-PCR检测,获得13株转基因甜菜。测得转基因植株叶长、叶宽、叶柄长和叶片数量平均分别为25.16 cm、19.31 cm、29.17 cm和38.33个,与对照相比,叶宽增加31.81%,叶柄缩短16.61%,叶片数目增加17.04%,都存在极显著差异,而叶长增加1.68%,无显著差异;叶绿素a含量(1.31 mg·g-1)、叶绿素b含量(0.562 mg·g-1)和叶绿素总含量(1.87 mg·g-1)与对照无显著差异;叶中可溶性糖含量(14.59 mg·g-1)降低13.04%,与对照(16.51 mg·g-1)存在极显著差异,叶柄中可溶性糖含量(21.90 mg·g-1)增加3.36%,但与对照(21.6 mg·g-1)差异不显著;单株转基因甜菜的块根重和含糖量分别平均为3.067 kg和183.2 g·kg-1,与对照(2.894 kg)相比,块根增重5.91%,差异不显著,含糖量增加9.41%,与对照(167.5 g·kg-1)存在显著差异。说明转基因甜菜叶面积和叶片数的增加,扩大了其光合叶面积,同时叶柄缩短有利于提高糖分子从源叶到库的转运,促进甜菜块根的形成和加快糖分的积累。【结论】利用蔗糖转运蛋白VvSUC11、VvSUC12能够有效地提高转基因甜菜的含糖量。; 闫甜甜郭新勇向本春祝建波; 关键词：甜菜蔗糖转运蛋白农艺性状含糖量

天山雪莲未知蛋白基因的克隆及其耐铝特性分析被引量：1: 2014年; 从天山雪莲叶片低温诱导的cDNA文库中克隆了一个未知蛋白基因(SikSD-82)cDNA全长序列。生物信息学分析表明SikSD-82基因共编码262个氨基酸,具有小麦铝诱导蛋白Wali7的保守结构域,属Gn_AT_Ⅱ家族的可溶性蛋白;其氨基酸序列与蓖麻的茎部特异性表达蛋白相似性最高为60.89%;进化树分析显示,该蛋白与番茄的茎部特异性表达蛋白关系最近。亚细胞定位结果表明,SikSD-82蛋白主要定位于细胞核。在铝胁迫条件下,转SikSD-82烟草幼苗根的伸长明显优于野生型,根部铝离子和丙二醛含量均显著低于野生型烟草,转SikSD-82烟草显示出较强的耐铝性。; 王海霞张林华杨晶张亚敏张伟王爱英胡鸢雷祝建波; 关键词：天山雪莲铝胁迫基因克隆亚细胞定位功能分析

低温胁迫对转新疆雪莲sikRbcs2基因烟草光合作用的影响被引量：8: 2015年; 研究分布于新疆的雪莲(Saussurea involucrata)中的sikRbcs2基因在低温条件下对植物光合作用的影响,以16、10、6、4℃温度梯度处理非转基因型和转sikRbcs2基因型烟草,每个温度处理72 h,比较研究其叶绿素荧光特性和光合特性。实验分析结果:低温胁迫下,转基因型烟草叶片叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)、叶绿素a+b(Chla+Chlb)、类胡萝卜素(Car)含量都显著高于非转基因型烟草。叶绿素荧光参数分析:低温胁迫下,转基因烟草PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、q P(光化学猝灭系数)、ETR(电子传递效率)都显著或极显著高于非转基因型,光合参数测定:随着低温胁迫程度的加剧,转基因烟草和非转基因型烟草净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO_2浓度(Ci)总体都呈下降趋势,但转基因烟草的净光合速率有一个明显的动态变化,先急剧下降后有一个稳定上升的趋势。通过对生长指标的测定发现:在低温处理后和恢复后转基因烟草生物量的积累都显著高于非转基因型烟草。研究结果表明:转新疆雪莲sikRbcs2基因的烟草在低温条件下具有较高的Fv/Fm、q P、ETR,对光合机构的损伤小,降低了低温胁迫效应,提高了烟草在低温胁迫条件下的耐受性。; 杨晶祝建波张亚敏李曹龙王海霞王爱英; 关键词：低温胁迫叶绿素荧光光合作用 RBCS

天山雪莲PsaH基因的克隆及序列分析被引量：3: 2013年; Ps I H(Subunit H of photosystem I)是属于光合系统I亚族的分子量约10 kD的内在膜蛋白,是真核生物特有的3个组成光合系统I的亚基之一,在植物光合作用中起重要作用。从天山雪莲(Sasussured involucrataKar.et Kir)叶片全长cDNA文库中,筛选克隆得到PsaH基因。序列分析表明,该基因的开放阅读框为432 bp,编码143个氨基酸,包括由47个氨基酸组成的转运肽和96个氨基酸组成的成熟PS I H。预测该蛋白质相对分子量为15.04 kD,理论等电点(Theoretical pI)为9.81,存在一个跨膜结构。序列比对表明,SikPsaH编码蛋白与蓖麻(Ricinus communis)、毛果杨(Populus trichocarpa)PsaH基因编码的蛋白质具有83.3%的相似性。系统进化树显示,天山雪莲与石蒜(Lycoris radiata)亲缘关系最近。。; 张林华邱红林刘超王爱英邓福军祝建波; 关键词：天山雪莲克隆

小花棘豆对家兔血清蛋白的影响被引量：1: 2014年; 探讨了小花棘豆对家兔血清蛋白含量的影响,进一步揭示了小花棘豆对家兔的毒性作用机理。结果表明,各试验组家兔的血清总蛋白、α球蛋白含量无明显变化(P>0.05);血清球蛋白、β球蛋白含量均显著高于对照(P<0.05);血清γ球蛋白含量呈先升高后降低趋势;血清白蛋白含量低于对照(P<0.05),试验组家兔血清白蛋白与球蛋白含量的比值(A/G)在试验期间均呈降低的趋势;小花棘豆对试验家兔的肝脏具有损害作用。; 王帅胡建军陈根元张玲马春晖; 关键词：小花棘豆血清蛋白家兔

杂交狼尾草胚性愈伤组织的诱导与植株再生被引量：5: 2015年; 以杂交狼尾草初级愈伤为材料,运用方差分析的方法研究不同因素对杂交狼尾草胚性愈伤诱导率与植株再生率的影响。结果发现,2,4-D和TDZ对杂交狼尾草胚性愈伤诱导影响显著,最佳的胚性愈伤诱导培养基为MS＋3.0 mg·L-1 2,4-D＋0.4mg·L-1 6-BA＋0.2 mg·L-1 TDZ,诱导率为54%;愈伤分化培养基以附加0.1 mg·L-1 TDZ＋0.2 mg·L-1 6-BA＋3.2 mg·L-1 Cu SO4的MS培养基为最佳,再生率为68.33%,褐化率为8.33%;分化培养基中添加0.8-3.2mg·L-1的Cu SO4均能促进杂交狼尾草愈伤组织分化,而添加Ag NO3对杂交狼尾草愈伤分化无显著影响。该技术为离体诱变获得杂交狼尾草低温种质材料奠定了基础。; 刘逸泠祝建波; 关键词：杂交狼尾草胚性愈伤组织植株再生

拟南芥冷诱导型启动子CBF3驱动IPT基因在烟*草中的表达被引量：2: 2012年; 用PCR的方法获得拟南芥冷诱导型启动子CBF3和农杆菌Ti质粒上的IPT基因,构建由启动子CBF3驱动IPT植物表达载体,并经农杆菌介导将基因整合到烟草的基因组中,利用Kan筛选、PCR和RT-PCR检测,最终获得转基因的植株。通过对烟草的植物学性状和农艺学性状的分析发现,随着启动子CBF3驱动的IPT基因在烟草中的表达,使得植株性状发生很大的改变,如株型变为塔型,株高增高,节距增长,且有很多的分枝和侧芽,叶片明显增多,表现出短窄且平滑的性状,茎围、腰叶长和腰叶宽都减小许多,相应的最大叶面积、顶叶面积和叶质量也都下降,但叶的密度却有所增加。; 郭新勇程晨张选祝建波; 关键词：表型

天山雪莲冷调节蛋白基因siCOR转化烟草植株的抗旱性分析被引量：11: 2012年; 冷调节蛋白(cold regulated proteins,CORPs)是植物在冷驯化下产生的特异性蛋白,与植物的抗寒性密切相关。然而,大量研究表明,绝大多数植物冷诱导基因同样会响应水分胁迫。采用半定量RT-PCR分析天山雪莲(Sasussured in-volucrata)冷调节蛋白基因siCOR的表达,结果表明siCOR是一个受干旱胁迫诱导表达的基因。为研究siCOR基因是否与抗旱性相关,以siCOR转基因烟草为研究材料,利用水分胁迫处理进行抗旱性分析。结果表明与野生型(wild-type,WT)相比,转siCOR植株叶片萎蔫较迟且程度较轻,复水后恢复快且较完全;其叶片相对含水量和PSII相对量子产率的降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株。采用PEG6000模拟干旱胁迫,发现转siCOR植株T3代种子的萌发率较高,主根生长的受抑制程度较野生型轻。以上结果表明,siCOR基因在植物对干旱胁迫的响应中起重要作用。; 郭新勇程晨王爱英张煜星王重喻娜祝建波; 关键词：抗旱性天山雪莲烟草

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