国家自然科学基金(31001057)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：刘全魏峰张莹光许越王巍更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林农业大学吉林省畜牧兽医科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 弓形虫感染鼠脾细胞microRNA表达谱的检测分析(英文)被引量：2
- 2012年
- MicroRNA(miRNA)是一类约22个核苷酸组成的单链非编码RNA,在分化、发育、肿瘤形成等方面起着重要作用。本研究对弓形虫RH株感染小鼠脾细胞miRNA的表达进行了特异性基因芯片检测分析,并应用荧光定量RT-PCR方法进行验证。结果表明,感染鼠脾细胞中与免疫应答及细胞增殖和肿瘤发生相关的三大类miRNA中,有39种表达下调,同时有36种表达上调。上述结果揭示,弓形虫感染机体后伴随着靶细胞功能性miRNA表达谱的显著改变,这为进一步研究弓形虫感染致病的分子机制开辟了新的方向。
- 金洪涛商立民刘全
- 关键词：弓形虫基因芯片荧光定量RT-PCR
- 转座酶对piggyBac转座子在弓形虫内转座活性的影响被引量：1
- 2013年
- 为研究转座酶(PBase)对转座子piggyBac在弓形虫细胞内转座效率的影响,将转座酶质粒Toxo-PBase和带红色荧光蛋白(RFP)的转座子质粒PB-Toxo-RFP共同电转染刚地弓形虫RH株速殖子,流式细胞仪检测转染后的弓形虫红色荧光蛋白的转座效率。结果显示,PB-Toxo-RFP和Toxo-PBase共转染组转座效率为73%,PB-Toxo-RFP转染组转座效率为43%,前组显著高于后组(P<0.01),表明转座酶能够提高piggyBac转座子在弓形虫细胞内的转座效率。
- 宋鑫帅魏峰张莹光曹莉莉刘全
- 关键词：PIGGYBAC转座子转座酶刚地弓形虫
- 弓形虫棒状体蛋白ROP18的原核表达及其免疫保护性研究被引量：6
- 2013年
- 目的克隆弓形虫ROP18基因并构建该基因的原核表达系统。方法根据GenBank发表的弓形虫ROP18序列设计合成1对特异性引物,PCR扩增ROP18抗原基因,并亚克隆到pET-28a原核表达载体,重组质粒转入大肠埃希菌BL21感受态细胞,用IPTG诱导表达,重组蛋白用SDS-PAGE及Western blot鉴定。重组蛋白经纯化后免疫小鼠,ELISA法检测血清抗弓形虫IgG,并通过攻虫试验观察重组蛋白的免疫保护作用。结果成功构建了ROP18基因原核表达质粒pET-28a-ROP18,表达重组蛋白的分子质量单位约为55ku,该蛋白可被鼠抗弓形虫多抗血清识别;经ELISA检测,重组蛋白免疫小鼠产生了较高水平的血清抗体;攻虫试验中,重组蛋白免疫小鼠生存时间较对照组小鼠显著延长(P<0.05)。结论成功构建了ROP18基因原核表达质粒,表达的重组蛋白具有一定的免疫保护作用。
- 许越张莹光徐丹曹利利王巍魏峰刘全
- 关键词：弓形虫原核表达
