国家科技支撑计划(2008BAI54B06)
- 作品数：15 被引量：68H指数：5
- 相关作者：赵德明杨利峰周向梅尹晓敏杨建民更多>>
- 相关机构：中国农业大学中国药品生物制品检定所邯郸市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家级星火计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 狂犬病研究进展被引量：14
- 2010年
- 狂犬病是一种急性致死性脑炎疾病。狂犬病病毒(rabies virus)是一种嗜神经性病毒,属于弹状病毒科(Rhabdovi-ridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus)。多种野生动物和家畜等可以发生狂犬病病毒的自然感染与传播,并且可以通过咬伤、抓伤或密切接触等形式感染人类而引起狂犬病。在全球范围内,每年约有60000人不幸死于狂犬病,而这些事件大部分发生在亚洲和非洲。狂犬病是人畜共患的自然疫原性传染病,目前尚无有效的治疗方法,一旦发病,死亡率近乎100%,预防狂犬病的发生尤其重要,狂犬病基本上是可以通过暴露后的预防进行阻止的。
- 李泽盛刘爱林谭荣荣任伟周向梅尹晓敏杨建民杨利峰张振山赵德明
- 关键词：狂犬病狂犬病病毒
- 牛结核病诊断方法的研究进展被引量：19
- 2010年
- 牛结核病是由牛分支杆菌、结核分支杆菌、禽分支杆菌等引起的一类慢性消耗性疾病,是牛各种传染病中致死率最高的疾病之一,该病在人畜之间可以相互传染,很难根治,是影响养牛业和全人类健康的重大疾病,因此控制本病的传播和蔓延迫在眉睫。控制牛结核病的主要措施是及时检疫和根除病牛,定期对牛群进行检疫监控。近年来,随着生命科学的发展,进一步将传统细菌检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法3种方法相结合,特别是分子水平上科学技术的发展,使牛结核病的诊断方法逐渐得到完善,同时获得了许多牛分支杆菌的特异性抗原及其基因,对于阐明结核分支杆菌和牛分支杆菌的分子进化和遗传变异规律等方面都具有重要的流行病学意义。
- 王金果刘爱林周向梅苑方重尹晓敏杨建民杨利峰赵德明
- 关键词：牛结核病分支杆菌
- 宁夏滩羊朊蛋白的免疫组化检测及其基因多态性分析
- 本研究运用免疫组织化学技术,首次对我国一类保护物种宁夏滩羊各组织中朊蛋白（PrP）的分布进行了定性、定位研究,结果显示,PrP在滩羊的大脑、脑干、肝脏、脾脏、肾脏及淋巴结均有表达.对朊蛋白部分基因片段扩增后并进行测序,多...
- 许立华张珠明周向梅赵德明
- 关键词：滩羊朊蛋白免疫组化多态性
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR构建朊病相关细胞因子标准品质粒和标准曲线被引量：2
- 2010年
- 为能够用实时荧光定量PCR检测PrP106-126作用的鼠巨噬细胞细胞因子的表达水平,构建目的基因IL-1β、TNF-α、IL-6和内参基因β-actin的标准品质粒和标准曲线。根据GenBank中鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物;细胞经PrP106-126作用后,提取总RNA。经反转录、PCR扩增、纯化、连接和转化后,提取质粒并测序鉴定,获得IL-1β、TNFα-、IL-6和β-actin质粒;将质粒梯度稀释,进行荧光定量PCR,获得标准曲线及回归方程。结果显示,产物溶解曲线峰值单一,引物特异性高;标准曲线相关系数r2=0.999,表明线性关系好,成功构建了目的基因和内参基因的标准品质粒和标准曲线。
- 刘爱玲周向梅杨鸣琦刘爱林赵德明
- 关键词：REAL-TIMEPCR质粒
- Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定
- 目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exsomes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exsomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗...
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云张交儿刘爱林赵德明
- 关键词：免疫胶体金
- 文献传递
- 犬毛母质瘤的病理学观察被引量：3
- 2011年
- 毛母质瘤（pilomatricoma）是一种良性的皮肤肿瘤,来源于毛囊的毛母质细胞,由于正常毛母质的生长过程受到阻碍,其凋亡受到抑制,进而增殖、聚集而形成的一种良性上皮瘤，常单独发生，有恶变的可能。
- 张珠明汪仁莉许立华赵德明
- 关键词：病理学观察母质皮肤肿瘤毛囊
- Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定
- 2010年
- 目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。结果:电镜下可以观察到提取的exosomes平均大小为50～100nm。免疫印迹法分析结果显示,提取的exosomes表达Flotillin、Tsg101和Hsp70蛋白,相对分子质量(Mr)分别为45000、43000和70000,但不表达calnexin蛋白;免疫电镜分析显示ex-osomes膜表面和内部有明显的金颗粒。结论:Ana-1巨噬细胞分泌exosomes。
- 王桂花周向梅尹晓敏杨利锋周海云张交儿刘爱林赵德明
- 关键词：免疫胶体金免疫印迹
- 乙脑病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：7
- 2010年
- 目的:建立乙脑病毒RT-PCR检测方法。方法:参照已发表的乙脑病毒全基因组序列,针对其衣壳蛋白C基因设计1对引物,提取乙脑病毒的RNA,逆转录为cDNA,进行PCR扩增,对检测方法进行优化,验证该方法的特异性及敏感性,并对90份临床样本进行检测。结果:所建立的乙脑病毒RT-PCR检测方法特异性和敏感性良好,以含乙脑病毒衣壳蛋白C基因的重组质粒DNA为模板,最低可检出10pgDNA。90份样本经RT-PCR检测,有23份扩增出特异性的目的条带。从小型猪脑组织中能分离鉴定出乙脑病毒。结论:已建立了乙脑病毒逆转录PCR检测方法,为乙脑病毒检测、流行病学调查奠定了基础。
- 高正琴岳秉飞贺争鸣
- 关键词：乙脑病毒逆转录聚合酶链式反应特异性敏感性
- 羊瘙痒因子263K感染金黄地鼠后生物学特性的检测
- 2011年
- 本次研究将感染羊瘙痒因子263K的脑匀浆通过颅内接种于金黄地鼠,应用临床特征观察、组织病理学观察、免疫组织化学观察以及Western blotting等技术对该毒株的生物学特性进行检测,分析和探讨其对金黄地鼠有无致病性以及致病特点,并为国内朊病毒的研究建立263K动物模型。结果表明,根据潜伏期及临床症状、组织病理学特征、免疫组织化学特征和Western blotting检测结果等判断,该毒株在金黄地鼠体内所表现的生物学特性与原毒株基本一致,由此也建立了国内该毒株的金黄地鼠动物研究模型,为进一步深入研究朊病毒疾病打下重要的基础。
- 鲁云赵德明杨利峰
- 关键词：生物学特性朊病毒羊痒病
- 乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立被引量：8
- 2010年
- 目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。
- 王吉高正琴卫礼付瑞岳秉飞贺争鸣
- 关键词：乙型脑炎病毒免疫荧光试验
