国家自然科学基金(30571265)
- 作品数：7 被引量：38H指数：4
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- 番茄离体花柄脱落区多聚半乳糖醛酸酶提取纯化体系的优化
- 2008年
- 多聚半乳糖醛酸酶是植物器官脱落过程中的重要水解酶,实验以20μL.L-1乙烯处理的离体番茄花柄为试材,建立了与脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶提取与纯化体系:以50 mmol.L-1乙酸缓冲液(pH=5.5)为提取液,加入0.1 mol.L-1NaCl、1 mmol.L-1DTT提取效果较好;将酶的粗提液低温浓缩后,经Sephadex G-75凝胶层析分离纯化,最佳流速为0.2 mL.min-1,适宜上样量为3.5 mL;再将凝胶层析分离的活性部分低温浓缩后,经CM Sepharose CL-6B离子交换层析再次纯化,流速为0.3 mL.min-1、洗脱液pH值5.5纯化效果最好。经上述提取纯化过程,得到了分子质量为30.2 kD的多聚半乳糖醛酸酶蛋白。该提取纯化体系为探讨与脱落相关酶的性质及其活性调控提供了参考。
- 徐杨齐明芳李天来许涛
- 关键词：番茄多聚半乳糖醛酸酶
- 与番茄花柄脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶的分离纯化和特性被引量：3
- 2008年
- 为弄清番茄花柄脱落相关酶——多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)的性质,采用离体培养条件下经乙烯处理的番茄花柄,分离和纯化了多聚半乳糖醛酸酶并测定其性质。结果表明:用Sephadex G-75凝胶过滤层析和CM Sepharose CL-6B阳离子交换层析方法可分离纯化得到分子量约为30.2 kDa的多聚半乳糖醛酸酶,纯化倍数为30.85;纯化的PG活性最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃;K_m值为26.14 mg·mL^(-1);1mmol·L^(-1)Ca^(2+)、Cu^(2+)、Ba^(26)、Co^(2+)和Mn^(2+)可抑制PG活性,而1 mmol·L^(-1)的Mg^(2+)、K^+、Fe^(2+)、Zn^(2+)、Fe^(3+)促进PG活性,20 mmol·L^(-1)的Fe^(2+)和Fe^(3+)促进效果尤为显著。
- 齐明芳徐杨李天来许涛
- 关键词：多聚半乳糖醛酸酶纯化
- 不同温度处理对番茄离体花柄脱落及其相关酶活性的影响被引量：13
- 2007年
- 以番茄品种辽园多丽离体花柄为试材,分别在25(CK),30,35℃下进行番茄花柄外植体培养,研究不同温度处理对番茄离体花柄脱落过程及其相关酶活性的影响。结果表明:在25～35℃培养条件下,番茄离体花柄的脱落率随温度升高而有不同程度降低,其中经32h培养,35℃处理未发生脱落,而25℃和30℃处理的脱落率分别为24.32%和12.39%。35℃处理花柄离区可溶性蛋白含量随处理时间延长迅速降低,而25℃和30℃处理变化不大。35℃处理明显降低了离区纤维素酶与多聚半乳糖醛酸酶的活性,30℃处理纤维素酶活性略有升高,而多聚半乳糖醛酸酶活性在处理32h后显著下降。35℃亚高温抑制番茄离体花柄脱落可能是与纤维素酶和多聚半乳糖醛酸酶活性,特别是多聚半乳糖醛酸酶活性受到抑制有关。
- 李晓红齐明芳李天来王倩许宏伟
- 关键词：番茄亚高温多聚半乳糖醛酸酶
- 园艺作物器官脱落相关酶的研究进展被引量：11
- 2007年
- 植物器官脱落是植物以一种可控方式将其某一器官与母体分离的进程,是多种变化协同作用的结果,而起直接作用的是一些关键酶的作用。现综述在植物器官脱落过程中相关酶-纤维素酶、多聚半乳糖醛酸酶、果胶(甲)酯酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶等酶在脱落过程中的作用,为进一步认识脱落过程及实现对脱落的调控具有重要意义。
- 齐明芳李天来许涛曹霞
- 关键词：纤维素酶过氧化物酶
- 番茄花柄脱落过程中超微结构及亚细胞钙分布的变化被引量：1
- 2008年
- 采用扫描电镜和焦锑酸钙沉淀的电镜细胞化学法,研究了番茄花柄脱落过程中离区细胞以及钙分布的变化。结果表明:离区的分离开始于皮层与维管束周围小细胞,先在这两个区域出现少量不连续的胞间空隙,并逐渐在维管组织区形成连续的断裂面,此后断裂面向中央的髓部组织延伸,先是维管组织的分离,然后是最中间的髓部以及最外侧表皮组织。钙分布研究发现脱落发生之前钙主要分布在细胞壁、质膜及液泡中。脱落发生后,钙颗粒主要分布在退化细胞壁和细胞间隙中,少量分布在细胞质中。皮层、维管束以及髓部细胞在整个脱落过程中钙分布以及钙形态明显不同,这可能是造成离区各组织在脱落中有不同分离程度的主要原因。
- 许涛李天来齐明芳陈伟之
- 关键词：番茄花柄超微结构
- Ca^(2+)对离体培养的番茄花柄脱落的影响以及脱落过程中离区内钙形态的变化被引量：5
- 2007年
- 在自然条件下,Ca^(2+)对离体培养的番茄花柄脱落有抑制作用,而对经乙烯处理的则有显著的促进。无论是在自然还是乙烯条件下,未经任何处理的番茄花柄脱落过程中总钙与果胶酸钙含量下降,而水溶性钙含量升高,Ca^(2+)在不同程度上提高脱落过程中离区总钙、果胶酸钙和水溶性钙含量,尤其是在乙烯下的效果更显著,而经EGTA处理的则相反。
- 齐明芳许涛李天来吴士才
- 关键词：番茄钙乙烯
- 钙处理对乙烯诱导的番茄离体花柄脱落的抑制作用被引量：17
- 2007年
- 以番茄‘辽园多丽’的小花为材料,研究外源乙烯(20μL.L-1)处理下,花柄脱落过程中,离区微粒体膜Ca2+-ATPase、羧甲基纤维素钠酶(CMC-Na)、内切多聚半乳糖醛酸酶(Endo-PG)和果胶脂酶(PE)等活性的变化。结果表明:外源乙烯加速了花柄的脱落,刺激了其离区的Ca2+-ATPase活性先升高后下降,随后离区CMC-Na、Endo-PG、PE活性升高;钙离子专一性螯合剂EGTA和钙调素拮抗剂TFP均在一定程度上抑制了乙烯诱导的上述反应,表明细胞内Ca2+与CaM参与了乙烯反应。
- 许涛李天来齐明芳
- 关键词：番茄乙烯水解酶钙
