浙江省科技计划项目(2009C03011-2)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：陈智邢小康李苏娟朱海红鲁兖更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第一医院浙江大学医学院附属第二医院浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA抑制感染细胞模型中HCV复制的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨siRNA能否有效抑制丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞中HCV的复制。方法:用HCV JC1质粒体外制备HCV RNA转录体,转染Huh-7.5.1细胞,收集细胞上清,再次孵育Huh-7.5.1细胞以建立HCV感染细胞模型,并用间接免疫荧光检测细胞内HCV核心蛋白的表达。将针对HCV NS5B基因的siRNA转染HCV感染细胞(浓度为4、40和200 nmol/L,时间为24 h、48 h和72 h),将4、40和200 nmol/L siRNA转染正常Huh-7.5.1细胞,并设空白对照、脂质体对照、无关siRNA对照以及IFNα-2b(1 000 IU/ml)组,用荧光定量PCR检测细胞内HCV RNA和PKRmRNA水平。结果:HCV感染的Huh-7.5.1细胞中检测出HCV核心蛋白表达。40 nmol和200nmol/L siRNA 24 h组及4、40、200 nmol/L siRNA 48 h和72 h组,HCV RNA水平分别降至58%、54%、29%、17%、17%、33%、22%、19%,明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。1 000 IU/mlIFN的各时间组HCV RNA水平均明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。各浓度siRNA组的PKR mRNA的表达与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:针对HCV NS5B区的siRNA能够明显抑制HCV感染细胞中HCV的复制,而不引起双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)基因表达的激活。
- 邢小康何继亮陈智
- 关键词：HCV复制NS5B感染细胞
- miR-122对IFN-α抗HCV效应的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨miR-122对α-干扰素(IFN-α)抗丙型肝炎病毒(HCV)效应的影响。方法:给感染HCV的Huh7.5.1予miR-122模拟物(20 nmol/L、100 nmol/L、400 nmol/L)和(或)IFN-α(1 000 IU/ml)处理,采用荧光定量PCR检测HCV RNA水平;给Huh7.5.1细胞感染不同数量HCV(107拷贝,106拷贝,105拷贝)和(或)IFN-α处理,荧光定量PCR检测HCV RNA水平。结果:IFN-α以时间依赖方式抑制HCV复制,在48 h时使HCV RNA下降了83%。miR-122模拟物呈剂量依赖性促进HCV RNA复制(P<0.05)。IFN-α的抗病毒效应与miR-122模拟物水平(20 nmol/L、100nmol/L、400 nmol/L)成反比,与对照组比较有显著性差异(73.3%±3.5%,64.67%±5.5%,56.33%±5.1%vs 84%±4.5%,后两组P<0.05)。IFN-α的抗病毒效应与HCV载量呈反比(105拷贝组vs 107拷贝组,P<0.05)。结论:在细胞感染模型中,miR-122促进HCV的复制,并且,miR-122的表达可部分中和IFN-α的抗HCV效应。
- 李苏娟陈智朱海红
- 关键词：MIR-122IFN-Α抗病毒效应
- Huh7.5.1细胞感染HCV观察干扰素治疗后miRNA表达谱变化被引量：1
- 2011年
- 目的:探寻可能对丙型肝炎病毒(HCV)有作用的mi-RNA。方法:用体外转录得到的HCV感染正常的Huh-7.5.1细胞,然后加入干扰素作用,采用mi-RNA表达谱芯片技术,分别测定Huh-7.5.1细胞正常组和HCV感染组及干扰素作用组的mi-RNA的表达,采用2(-ΔΔCT)法分析组间microRNA的表达情况。结果:以正常Huh-7.5.1细胞中表达的mi-RNA为基准,经过筛选发现13种mi-RNA在HCV感染后表达上调,而在干扰素治疗后则出现下调;另外还有7种mi-RNA则在HCV感染后出现表达下调,而在干扰素治疗后则发生上调。结论:mi-RNA10a、mi-RNA21、mi-RNA149和mi-RNA152及mi-RNA210可能与HCV的复制转录有关。
- 鲁兖鲁兖邢小康陈智
- 关键词：丙肝病毒
