国家科技攻关计划(2002BA514A-17-06)
- 作品数：3 被引量：48H指数：3
- 相关作者：陈兆国赵其平黄兵韩红玉姜连连更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所扬州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 柔嫩艾美耳球虫抗马杜拉霉素、地克珠利虫株特异消减文库的构建被引量：20
- 2005年
- 以遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)敏感株孢子化卵囊为驱动组,马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊为试验组,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次PCR分别构建了富含两个抗药株孢子化卵囊与敏感株孢子化卵囊之间差异表达基因的消减cDNA文库。随机从两个消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊的消减文库重组率分别为96%和98%,差异基因片段大小分布在250bp～1.0kb之间。从每个文库中随机挑取65个阳性克隆经斑点杂交试验,分别选择表达量上调的6个克隆进行序列分析和同源性比较。结果发现,有4个cDNA片段可能是新基因片段,与地克珠利抗药株的产生有关;有3个新的cDNA片段可能与马杜拉霉素抗药株的产生有关。这些结果将为克隆全长cDNA和探索球虫抗药性产生及发展的分子机理奠定了一定的基础。
- 韩红玉赵其平姜连连董辉陈兆国黄兵
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素地克珠利消减文库孢子化卵囊
- 禽脑脊髓炎病毒结构蛋白VP3基因真核表达载体的构建及其免疫被引量：10
- 2006年
- 根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)1 143株结构蛋白VP 3基因的序列,设计1对特异性引物,经PCR从原核表达载体pET-VP 3中扩增出VP 3基因片段,克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段,定向克隆入pcDNA 3.1(+)载体,转化大肠杆菌DH 5α,鉴定后大量提取质粒,转染CO S-1细胞,用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB/c小鼠进行免疫,结果2次免疫后就检测到特异性抗体,表明该载体在动物体内有较高的表达水平,可用于动物体内免疫,为进一步研究AEV的核酸疫苗打下了基础。
- 徐建生唐波成大荣曹军吕玲周晓昕
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒VP3真核表达DNA疫苗
- 柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株的实验室诱导被引量：28
- 2004年
- 采用药物浓度逐渐递增的方法 ,以 0 .0 5× 10 - 6 地克珠利和 2 .0× 10 - 6 马杜拉霉素为起始诱导浓度 ,分别经过 18次和 2 0次传代 ,在实验室诱导了柔嫩艾美耳球虫 (Eimeria tenella)对地克珠利和马杜拉霉素的抗药性虫株。经抗药性检测 ,以最适抗球虫指数 (POAA)、病变记分减少率 (RL S)、相对卵囊产量 (ROP)和抗球虫指数 (ACI) 4项指标综合判定及综合抗药性指数 (GI) 2种方法共同判定 ,获得的地克珠利抗药株对 1.2× 10 - 6地克珠利具有完全抵抗力 ,而对马杜拉霉素完全敏感 ;马杜拉霉素抗药株对 7.0× 10 - 6 的马杜拉霉素具有完全抵抗力 ,而对地克珠利完全敏感。
- 韩红玉赵其平陈兆国黄兵
- 关键词：鸡球虫病柔嫩艾美耳球虫地克珠利马杜拉霉素抗药性
