广东省科技计划工业攻关项目(2003A3020302)
- 作品数：8 被引量：72H指数：4
- 相关作者：李永平张文忻聂莉林健贤张波更多>>
- 相关机构：中山大学暨南大学温州医学院附属眼视光医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 视网膜母细胞瘤抗原致敏的树突状细胞疫苗抗SO-RB_(50)细胞系的实验研究被引量：7
- 2004年
- 目的 研究视网膜母细胞瘤 (RB)抗原致敏的树突状细胞 (DC)疫苗体外特异性对RB细胞系SO RB50 杀伤作用 ,为进一步研究RB的治疗提供新的思路。方法 以RB细胞的蛋白抗原体外冲击致敏健康人 (正常对照组 )及RB患者 (患者组 )来源的成熟DC ,并将其与自体T细胞混合培养 ,诱导出抗SO RB50 的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,以Burkitt淋巴瘤Raji细胞作为对照靶细胞 ,采用噻唑蓝 (MTT)分别比较CTL对SO RB50 和Raji细胞的杀伤率及正常对照组与RB患者组来源特异性杀伤率的组间差异性。结果 对SO RB50 与Raji 2种靶细胞 ,正常对照组和RB患者组的CTL细胞毒作用均随着效靶比的增加而增加 ,对SO RB50 细胞的杀伤作用各效靶比均强于相应效靶比的Raji细胞(P <0 .0 1) ;各效靶比正常对照组CTL对SO RB50 细胞的特异性杀伤作用均显著强于RB患者组CTL(P <0 .0 1) ;而各效靶比正常对照组与RB患者组CTL对Raji细胞的非特异性杀伤作用则相近 ,两者比较 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 应用RB抗原负载DC可诱导出针对SO RB50 细胞抗原特异性的CTL ,这种方法对RB的治疗可能具有潜在的临床应用价值。
- 唐松李永平应方微李永强冯官光易玉珍
- 关键词：视网膜母细胞瘤抗原树突状细胞T淋巴细胞
- 眼内硅油填充术后硅油相关并发症的组织病理及超微结构观察被引量：41
- 2005年
- 目的观察眼内硅油填充术后硅油相关并发症的组织病理及超微结构改变,并探讨其发生机制。方法收集中山大学中山眼科中心病理室有眼内硅油填充术史的25例病理标本,其中包括眼球8例,眼内容物1例,视网膜前膜4例,角膜4例及晶状体8例,对其进行组织病理学观察及免疫组化分析,对其中获得的2例新鲜前膜组织行电镜下观察。结果眼内硅油填充术后硅油相关角膜病变以内皮细胞消失(90%)、带状角膜变性(83%)为主;而硅油相关白内障则以上皮细胞纤维化生为主。8例眼球及1例眼内容物组织见到典型硅油相关视网膜病变,即视网膜结构紊乱,增殖膜形成,其内较多大小不一的圆形硅油泡,神经元细胞数量减少。3例硅油存留时间>60个月的眼球,视网膜组织已完全被增殖膜替代,且硅油广泛浸润至角巩缘陈旧创口、小梁、虹膜睫状体、脉络膜、视神经及其鞘膜组织内,提示随着硅油在眼内存留时间的延长,硅油并发症更广泛、严重。2例视网膜前膜光镜下仅见少量硅油,但电镜下可见典型硅油浸润。免疫组化检查结果在硅油浸润部位,可见散在或灶性CD68阳性巨噬细胞;油泡周围的包裹膜部分胶质纤维酸性蛋白阳性、部分波形蛋白阳性,提示硅油可通过巨噬细胞向邻近组织浸润。结论眼内硅油填充术后硅油长期眼内存留可导致眼组织结构和(或)功能异常,应在视网?
- 钟秀风李永平林健贤张文忻郑健梁葛坚冯官光
- 关键词：并发症眼内硅油填充术后油相
- 绿色荧光蛋白标记的恶性组织细胞增生症瘤细胞眼前房移植模型被引量：2
- 2006年
- 目的建立绿色荧光蛋白(GFP)标记的恶性组织细胞增生症瘤细胞cy15在眼前房生长及浸润的模型,探讨cy15细胞在前房生长的规律及GFP标记活细胞的优势。方法将带有GFP的逆转录病毒MP71-GFP-PRE转入cy15瘤细胞,获得稳定表达GFP的cy15GFP细胞系。20只BALB/C小鼠(20只眼)每只眼前房注入2μl细胞密度为2×106个/ml的cy15GFP瘤细胞悬液,术后分别在裂隙灯和荧光显微镜下观察瘤细胞在前房的生长情况,连续观察30d,分别在瘤细胞植入前房后第15d、20d、30d时处死小鼠做眼球HE病理切片。结果成功地建立了稳定表达GFP的cy15GFP细胞系。接种的20只BALB/c鼠眼前房均可见肿瘤细胞生长,借助于荧光显微镜能动态地观察到肿瘤细胞在活体小鼠眼前房的生长浸润过程。结论建立的GFP标记的肿瘤细胞眼前房接种模型为研究眼内肿瘤细胞生长与浸润的规律以及抗肿瘤药物的筛选提供了一种新的手段。
- 聂莉李永平李亮平张文忻林健贤张波
- 关键词：恶性组织细胞增生症绿色荧光蛋白前房
- 视网膜母细胞瘤细胞株SO-RB_(50)中生存素的表达
- 2009年
- 目的研究凋亡抑制因子生存素(survivin)在视网膜母细胞瘤细胞株SO-RB50中的表达。方法收集培养的SO-RB50细胞,通过RT-PCR、Western blot和免疫组织化学法检测SO-RB50细胞中survivin mRNA和蛋白的表达情况。免疫组织化学法检测survivin在正常视网膜组织中的表达。结果SO-RB50细胞中可检测到survivin mRNA和蛋白的表达,免疫组织化学检测显示survivin在SO-RB50细胞核和细胞浆中均有表达。正常视网膜组织中未见survivin表达。结论Survivin参与了视网膜母细胞瘤的发病。
- 聂莉李永平张波张卉颖张文忻
- 关键词：视网膜母细胞瘤生存素
- 绿色荧光蛋白标记的CY15瘤细胞眼前房移植瘤早期转移的观察被引量：4
- 2006年
- 【目的】观察绿色荧光蛋白(GFP)标记的恶性组织细胞增生症CY15细胞在Balb/c鼠眼前房生长及全身转移的规律,探讨GFP作为活细胞标记追踪肿瘤细胞生长、转移的优势并初步探讨肿瘤转移的机制。【方法】将携带绿色荧光蛋白的逆转录病毒MP71-GFP-PRE转入CY15细胞,G418筛选阳性克隆。20只Balb/c小鼠(20只右眼),手术显微镜下每只小鼠眼前房接种2μL细胞密度为2.0×106个/mL的CY15GFP细胞悬液。术后15d、20d和30d分别处死5只小鼠在荧光显微镜下观察全身转移情况。采用流式细胞仪分析术后30d处死的另外4只小鼠和4只对照小鼠外周血单个核细胞中瘤细胞的比率。【结果】稳定表达绿色荧光蛋白的CY15GFP细胞基本保持了亲代细胞的特征,在前房的成瘤率为100%。术后15d处死小鼠在荧光显微镜下观察可见肝、肺、胃肠壁等多个脏器中有散在的单个荧光点分布,为转移的单个肿瘤细胞,这些荧光点在肝脏中分布的数量最多。术后20d、30d分别处死5只小鼠,发现随着时间的推移这些微小转移灶逐渐增大。流式细胞仪分析术后30d处死的小鼠外周血单个核细胞中瘤细胞的平均比率为0.048%±0.021%。【结论】绿色荧光蛋白标记瘤细胞后,利用荧光显微镜能有效地观察到肿瘤发生远距离转移在继发脏器中分布的单个瘤细胞和普通显微镜下无法分辨的微小转移灶,这些微小转移灶逐渐增大,为肿瘤转移的克隆起源学说提供了有力的证据。流式细胞仪能准确定量瘤细胞在外周血中的分布情况。
- 聂莉李永平李亮平张文忻张波
- 关键词：恶性组织细胞增生症绿色荧光蛋白肿瘤转移
- 白内障摘出术后角膜失代偿的病理形态学研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨白内障摘出术后角膜失代偿的组织病理学改变。方法收集91例(91眼)白内障术后角膜失代偿行穿透性角膜移植的受体角膜标本,常规包埋切片,全部做HE染色,部分做PAS染色和胶性铁染色,光学显微镜观察。结果角膜上皮细胞水肿,细胞间隙增宽,上皮下大泡形成,表面不规则,部分病例角膜上皮内生。前弹力层肿胀,局部破坏消失。角膜基质层增厚水肿,基质纤维间隙增宽,部分病例有炎症细胞浸润,伴新生血管和纤维增生。后弹力层略增厚,板层样染色不均,部分形成双层后弹力层样外观。内皮细胞扩大、退变,稀疏甚至消失。部分病例角膜后膜形成。结论角膜内皮细胞大量减少、角膜上皮内生、角膜后膜形成是导致白内障术后角膜失代偿病理改变的原因。
- 石海红李永平张平钟秀风林健贤张文忻郑健粱
- 关键词：白内障角膜失代偿组织病理学
- 视网膜母细胞瘤SO-RB_(50)瘤细胞NOD-SCID鼠皮下异位移植全身转移瘤模型的建立被引量：4
- 2005年
- 目的:建立人视网膜母细胞瘤(RB)的严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficent)小鼠(NOD-SCID鼠)皮下移植模型,并探讨RB转移的发生、分布规律.方法:NOD-SCID小鼠皮下接种人视网膜母细胞SO-RB50细胞,定期观察小鼠的行为及肿瘤的形成、生长、转移.采用HE,免疫组织化学染色方法,对皮下肿瘤原发灶及远处转移灶行病理组织学研究.结果:皮下接种小鼠肿瘤生长的潜伏期为12～19d,成瘤为100%,5只鼠有远处转移灶,发生转移的时间在32d后,时间分布不一,肿瘤转移灶主要分布在腹腔和肾旁,小鼠的异种移植瘤和转移灶组织形态上与人类的RB一致,光镜下细胞胞质少、核深染、可见病理性核分裂,为未分化型.结论:NOD-SCID小鼠的荷瘤人视网膜母细胞瘤模型,成瘤率高,成瘤潜伏期短,较高转移率的特点.
- 张波钟秀风李永平黄文革聂莉张文忻
- 关键词：视网膜母细胞瘤动物模型肿瘤转移
- 冰醋酸固定液对视网膜组织固定效果的探讨被引量：11
- 2006年
- 目的:寻找对视网膜固定效果好的固定液。方法:用福尔马林、酒精、冰醋酸混合(glacialaceticacid,FAA)固定液和10%中性甲醛固定液分别对视网膜组织固定,作HE染色和免疫组化染色,镜下观察其差异。结果:FAA固定液的标本视网膜结构清晰,细胞排列紧密,脱片程度低,适用于视网膜组织的固定。结论:FAA固定液固定视网膜组织的效果优于10%中性甲醛固定液。
- 张文忻李永平林健贤聂莉张卉颖
- 关键词：视网膜冰醋酸固定液
