江苏省自然科学基金(BK2006178)
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
- 相关作者：何冰芳徐娴谢承佳唐啸宇孙洪林更多>>
- 相关机构：南京工业大学徐州生物工程高等职业学校更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程理学化学工程更多>>
- 以恶臭假单胞菌发酵制备D-氨基葡萄糖酸被引量：1
- 2009年
- 从土样中分离到D-氨基葡萄糖酸高产菌株GNA5,综合Biolog细菌自动鉴定系统与16SrDNA序列分析结果,鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).P.putidaGNA5能耐受较高浓度底物D-氨基葡萄糖,可发酵积累D-氨基葡萄糖酸.初步优化培养基为(g/L):D-氨基葡萄糖盐酸盐30,葡萄糖5,尿素5,KH2PO42,MgSO4-7H2O0.5,CaCO310,pH7.0.菌株GNA5在该培养基中发酵48h可制备25.5g/L的D-氨基葡萄糖酸,摩尔转化率达93.91%.自行筛选的P.putidaGNA5显示了底物转化能力强及产物分解能力弱的特点,具有进一步产业化开发的潜力.
- 袁静孟笑何冰芳
- 关键词：恶臭假单胞菌D-氨基葡萄糖
- 枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达被引量：13
- 2007年
- 扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。
- 徐娴谢承佳何冰芳
- 关键词：葡萄糖脱氢酶辅酶再生
- 地衣芽孢杆菌YP1A耐有机溶剂蛋白酶基因的克隆与功能表达被引量：5
- 2009年
- 根据B.licheniformisYP1A来源的碱性蛋白酶具有的高强度耐有机溶剂性能及相关数据库分析,采用PCR克隆B.licheniformisYP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因,序列分析显示该基因(1 264 bp)包含启动子与编码380个氨基酸的开放阅读框(ORF),ORF包括信号肽、前肽及编码254个氨基酸的成熟肽序列。相关基因分析表明,YP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因与地衣芽孢杆菌ATCC14580的碱性蛋白酶基因仅有6个氨基酸残基差异。构建2种含YP1A碱性蛋白酶CDS的组成型穿梭表达载体pHY/aprYP与pHY/aprP43,前者采用YP1A蛋白酶自带的启动子,后者则采用来自于质粒pP43NMK的P43强启动子。利用这2种表达载体在枯草芽孢杆菌WB800中成功进行蛋白酶的功能表达,其中P43强启动子的表达能力明显优于碱性蛋白酶自带的启动子,表达的蛋白酶比酶活为395 U/mL。重组菌表达的碱性蛋白酶在体积分数50%的亲水及疏水有机溶剂中表现出了很好的耐受性,验证了克隆基因为地衣芽孢杆菌YP1A的高强度耐有机溶剂碱性蛋白酶基因。
- 何小丹李霜孙蓓蓓何冰芳
- 关键词：克隆
- 脂肪酶促手性拆分中立体选择性的调控因素
- 2009年
- 脂肪酶催化手性拆分是制备光学活性化合物的重要手段。文章总结了酶法拆分技术近年来的发展,重点探讨了反应溶剂,底物结构,酶的预处理,添加助剂等对酶催化活性及立体选择性的影响规律;以及相关的手性拆分的调控策略。论述了合理利用或调整上述相关因素可有效提高酶促拆分选择性及催化效率。
- 孙磊朱小燕何冰芳
- 关键词：脂肪酶手性拆分
- 耐有机溶剂微生物及酶类在生物催化中的应用被引量：7
- 2009年
- 将生物催化剂运用到有机相催化具有多种优势,然而酶是一类不稳定的催化剂,很容易在有机溶剂存在的条件下失去活性。耐有机溶剂微生物是一类新颖的极端微生物,它们可以在高浓度有机溶剂的存在下生存,而这类微生物所产生的一些酶类往往具有耐有机溶剂的性能。随着这一领域的研究和发展,从这类极端微生物中寻找高效生物催化剂逐渐成为新的研究热点,并被越来越多的运用到有机相生物催化领域。本文综述了新型耐有机溶剂催化剂的开发、应用与发展,并讨论了该领域的研究所带来的机遇与挑战。
- 唐啸宇孙洪林何冰芳
- 关键词：生物催化工业微生物
