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甘肃省生物技术专项: 作品数：68 被引量：497H指数：11; 相关作者：吴建平张盛贵汪月程鸿孔维萍更多>>; 相关机构：甘肃农业大学甘肃省农业科学院中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学化学工程更多>>

牦牛CAST基因部分序列的SNPs研究被引量：2: 2010年; 采用PCR-SSCP技术,设计2对特异性引物分别对牦牛钙蛋白酶抑制蛋白基因部分内含子2、外显子3、部分内含子3和外显子8、内含子8部分序列进行单核苷酸多态性分析.结果表明:在第2内含子存在一段CTTTTTT的缺失,表现出3种基因型,其中AA、AB、BB基因型频率分别为0.7514、0.2265和0.0221,A、B等位基因频率分别为0.8646和0.1354;在第3外显子处发生2个碱基突变,分别是40455bp处G→A和40463bp处A→G的转换,40455bp和40463bp处均表现AA和AB2种基因型,2个位点AA、AB基因型频率均为0.7293、0.2707,A、B等位基因频率均为0.8646、0.1354;在第8内含子85170bp发生了A→G的转换,表现出AA和AB2种基因型,其中,AA、AB基因型频率分别为0.6354、0.3646,A、B基因频率分别为0.8177、0.1823.CAST40400、CAST40455、CAST40463和CAST85170处的遗传杂合度分别为0.2265、0.2707、0.2707和0.2990,多态信息含量分别为0.2067、0.2067、0.2067和0.2537.牦牛在CAST40400处处于Hardy-Weinberg平衡状态,在CAST40455、CAST40463和CAST85170处均处于Hardy-Weinberg不平衡状态.; 王建华杨联张利平吴建平万红玲吴孝杰刘晓敏王磊; 关键词：牦牛钙蛋白酶抑制蛋白基因 PCR-SSCP SNPS

白粉病相关基因MLO在瓜菜类白粉病广谱抗性研究中的应用被引量：1: 2015年; MLO(mildew resistance locus O)被认为是研究植物广谱抗性的模式基因,它编码一种7TM跨膜蛋白,对白粉病菌具有负调控作用。野生或者人工突变获得的mlo基因,对白粉病具有广谱抗性,表明MLO在植物白粉病育种方面具有潜在的应用价值。就MLO的发现、结构定位、细胞学证据、突变抗病的机制等方面的研究现状及在瓜菜类作物广谱抗性材料创制中的应用进行了总结,并讨论了今后的研究重点。; 程鸿孔维萍; 关键词：白粉病 MLO 广谱抗性

中国荷斯坦牛FASN基因部分序列PCR-SSCP多态性与泌乳性状的相关性被引量：5: 2013年; 【目的】研究奶牛脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FASN)基因多态性对产奶量和乳成分的影响,为中国荷斯坦牛的优化育种提供相应的分子遗传学依据。【方法】以464头中国荷斯坦牛为研究材料,参照奶牛生产性能测定(Dairy herd improvement,DHI)方法采集产奶量和乳成分数据;采集试验牛血样,提取DNA,PCR扩增FASN基因,用单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)技术并结合测序确定基因型;用最小二乘法进行基因多态性与泌乳性状的关联性分析。【结果】FASN基因外显子34存在2个等位基因、2种基因型,A、B等位基因频率分别为0.813 9和0.186 1,试验群体在这一位点上极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01),遗传杂合度(He)和多态信息含量(PIC)分别为0.372 3和0.257 0。测序结果显示,与普通黄牛FASN基因序列(GenBank登录号:AF285607)相比,B等位基因在第16 024和16 039位核苷酸处分别发生了A→G和C→T碱基突变,其中A→G突变导致苏氨酸变成丙氨酸,C→T突变导致精氨酸变为色氨酸;A等位基因与AF285607序列相同。最小二乘法分析表明,AA型个体305d乳脂量显著高于AB型个体(P<0.05),等位基因A为高乳脂量优势基因。【结论】FASN基因外显子34突变位点可作为高乳脂的分子遗传标记应用于中国荷斯坦牛的标记辅助选择育种中。; 马彦男贺鹏迦马永生董艳娇朱静雷赵民刘哲吴建平; 关键词：中国荷斯坦牛单核苷酸多态性泌乳性状

野生甜瓜MLO基因突变体对白粉病菌的抗性分析被引量：5: 2015年; 以野生和栽培甜瓜为试材,通过人工接种白粉病菌,对两份材料的抗性进行了鉴定,结果表明野生种质对甜瓜白粉病菌生理小种Race1具有抗性。基因测序发现野生种质与栽培品种的MLO基因序列相差85个碱基。进一步利用荧光标记的农杆菌介导法将Cm MLO2基因在野生种质中表达,白粉病菌能够感染阳性转化植株,说明Cm MLO2突变使野生种质缺失MLO蛋白,导致对白粉病的负调控作用被解除,从而启动了对白粉病菌的广谱抗性。; 程鸿孔维萍吕军芬李继平; 关键词：甜瓜白粉病

孜然根腐病田间药效试验被引量：4: 2008年; 孜然根腐病大田防治试验使用了11种化学药剂和枯草芽孢杆菌B1、B2进行拌种和拌种+喷药两种处理。在两种处理中,3%苯醚甲环唑悬浮种衣剂、50%异菌脲可湿性粉剂、25%丙环唑乳油、70%代森锰锌+2.5%咯菌腈乳油、50%多菌灵+2.5%咯菌腈乳油(1∶1)、枯草芽孢杆菌B1(10倍)液、枯草芽孢杆菌B1(30倍)液和50%多菌灵+[B1(20倍)液+B2倍(20倍)液]拌种处理均与对照存在显著性差异;各处理的相对防效均不同,25%丙环唑乳油、枯草芽孢杆菌B1(10倍)液和50%多菌灵+2.5%咯菌腈乳油(1∶1)相对防效达到41.87%～58.83%,与其它处理间存在极显著差异。在拌种处理后喷施53%精甲霜灵对孜然根腐病也有一定防治效果。; 刘淑娟陈秀蓉袁宏波郭春秀胥宝一; 关键词：孜然根腐病田间试验

种植密度对马铃薯加工品质的影响被引量：6: 2018年; 研究不同种植密度对马铃薯加工品质的影响。以甘肃产区主栽品种"陇薯7号"为试材,通过测定4种种植密度下马铃薯块茎中干物质、淀粉、还原糖、蛋白质等主要成分及褐变度、透明度、溶解度、膨胀度、质构特性等加工主要指标,比较不同种植密度对加工品质的影响。研究发现,不同种植密度可以影响马铃薯加工品质,3500株/亩种植时,马铃薯块茎的干物质、淀粉、蛋白质含量及硬度显著高于其他种植密度,马铃薯淀粉的溶解度、透明度及直链淀粉含量也显著优于其他种植密度;4500株/亩种植时块茎蛋白质含量最高,淀粉的膨胀度最好。马铃薯块茎切面暴露于空气中,其褐变强度随时间而变化,褐变强度与切面接触空气的时间具有相关性。种植密度对马铃薯淀粉的颗粒大小有影响,但对形貌和结晶度没有影响。; 康鹏玲杨素马娟娟夏冰冰牛黎莉汪月张盛贵; 关键词：马铃薯种植密度

马铃薯地上部绿色组织中糖苷生物碱合成调控的研究被引量：4: 2017年; 为提高马铃薯品种(系)地上部分糖苷生物碱(SGAs)的含量,增强其抗逆性并改良块茎的品质。克隆了马铃薯茄啶鼠李糖基转移酶基因(sgt3)cDNA和1,5–二磷酸核酮糖羧化酶小亚基基因启动子(rbcS P);对sgt3亚细胞定位预测显示,该蛋白不具有叶绿体转运肽、线粒体导肽和分泌信号肽序列,推测可能位于细胞质;将克隆的sgt3 cDNA片段及rbcS重组到pCEPSP载体上,构建了具有草甘膦抗性标记的绿色组织特异表达sgt3基因植物表达载体。通过农杆菌介导法对马铃薯品种‘陇薯3号’和‘夏波蒂’进行转化,共获得了12株抗草甘膦的阳性转基因植株。对转基因植株的目的基因表达水平和SGAs含量分析发现,地上部sgt3基因相对表达量较未转化植株提高1.3~3.0倍,SGAs含量增加20%~37%,而转基因植株的块茎中SGAs含量变化不显著。本研究的结果为进一步培育枝、叶中高SGAs而块茎中低SGAs的马铃薯抗性品种提供了理论依据。; 郭海霞张晶晶安然乔岩石文慧石菁张金文; 关键词：马铃薯糖苷生物碱

EGF、EGFR在牦牛卵母细胞中的表达及对胚胎发育能力的作用被引量：13: 2015年; 【目的】探明表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及其受体(EGFR)在牦牛卵母细胞成熟过程中的表达动态,并且研究EGF对牦牛卵母细胞成熟的影响及可能的分子作用机制。【方法】采集牦牛卵巢,捡取质量较好的牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs),进行体外成熟培养;分别处理未成熟和成熟的牦牛COCs,采用Real-time PCR和间接免疫荧光方法检测COCs成熟过程中EGF及EGFR在基因和蛋白水平的表达动态;牦牛COCs成熟培养时在基础培养基中分别添加0、50、100和200 ng·m L-1 EGF及最佳作用浓度的EGFR抑制因子Gefitinib,比较作用前后卵母细胞成熟率、受精后卵裂率及囊胚率;Real-time PCR方法分析不同浓度EGF和Gefitinib作用后成熟COCs中凋亡相关基因Bax和Baxi的相对表达量。【结果】EGF,EGFR基因在成熟COCs的表达显著高于未成熟COCs,成熟COCs中EGF基因的相对表达量为未成熟COCs的2.17±0.36倍,EGFR基因在成熟COCs的表达量为未成熟COCs 6.82±0.21倍,且在未成熟和成熟COCs中EGFR基因表达量均显著高于EGF。免疫荧光检测显示未成熟COCs和成熟COCs均表达EGF和EGFR蛋白,EGF和EGFR蛋白的标记荧光主要集中在卵丘细胞,卵母细胞表达较弱。100 ng·m L-1 EGF可以显著提高COCs成熟率(73.45±2.09)%及其受精后的卵裂率(59.46±1.41)%和囊胚率(26.23±1.08)%;对照组中(0 EGF)COCs成熟率为(54.16±3.25)%,卵裂率为(48.33±1.93)%,囊胚率为(15.34±0.43)%;EGF浓度为50 ng·m L-1时成熟率、卵裂率及囊胚率分别为(61.79±1.04)%、(51.76±0.61)%和(18.62±1.13)%;200 ng·m L-1成熟率、卵裂率及囊胚率分别为(71.26±4.18)%、(57.13±2.06)%和(23.96±0.53)%;而加入EGFR抑制因子Gefitinib显著的降低了COCs的成熟率及其受精后的卵裂率及囊胚率,分别为(43.63±1.46)%、(41.79±2.81)%和(12.65±0.67)%。COCs成熟过程中EGF的作用可以显著抑制促凋亡基因Bax的表达,在50 ng·m L-1、100 ng·m L-1、200; 潘阳阳李秦崔燕樊江峰杨琨何俊峰余四九; 关键词：牦牛卵母细胞体外成熟

草甘膦抗性和磷高效吸收复合基因转化玉米的研究被引量：2: 2019年; 【目的】草甘膦是世界上用途最广的除草剂之一,磷是玉米生长发育所必需的大量营养元素,培育抗草甘膦兼具高效磷素吸收利用的复合性状对玉米生产有重要意义.【方法】构建由Ubiquitin1启动子驱动的两种叶绿体转运肽/CP4 EPSPs融合基因,和根特异性启动子GLU1P驱动的植酸酶基因phyA2双价植物表达载体,通过农杆菌介导法对玉米茎尖进行转化.对转基因植株进行实时定量PCR(RT-qPCR)分析、不同浓度草甘膦检测以及丙酮-磷钼酸铵法测定.【结果】获得9株阳性转基因植株;发现不同转运肽对EPSPs基因的表达量影响不同,且对草甘膦的抗性也不同;转基因植株植酸酶活性比野生型植株平均提高18.7倍.【结论】本研究为获得具有草甘膦抗性和磷素高效吸收利用复合性状的转基因玉米优良种质奠定了基础.; 曹智张晶晶张志恒王威石菁王朋宝张金文; 关键词：玉米

X-射线和红外光谱研究马铃薯蛋糕老化特性被引量：5: 2019年; 以X-射线衍射(XRD)和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)研究马铃薯蛋糕在贮藏期间(1、24、72、120、168h)的老化特性,并利用质构仪和色差研究了老化对蛋糕品质(质构、色差)的影响。结果表明,蛋糕贮藏1h后,在X-射线2θ12.5°和20°附近出现衍射峰,分别对应于禾谷类淀粉的无定形峰和由直链淀粉与脂肪酸形成的螺旋形复合物--V-型结晶,当贮藏时间达到120h时,在2θ17°附近出现由支链淀粉回生产生的B-型结晶。FT-IR在波数925、995、1025、1047、1079、1155和1243cm^-1附近出现吸收峰,1025和1047cm^-1附近的吸收峰分别对应淀粉的非结晶区特征和结晶区特征,(1047/1025)cm^-1峰强度比值能够反映淀粉分子的有序程度,其比值越大,有序度越高。马铃薯蛋糕在贮藏期间的X-射线衍射峰和红外吸收峰强度以及(1047/1025)cm^-1比值均小于普通蛋糕,表明其老化速度慢于普通蛋糕。老化会导致蛋糕硬度、咀嚼性、胶着性、a^*和b^*值增加,黏聚性和L^*值降低,从而使蛋糕失去光泽、口感变粗糙、风味发生劣变。; 张仲柏牛黎莉汪月张珍魏晓岩张盛贵; 关键词：X-射线衍射傅里叶变换红外光谱

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