国家自然科学基金(39700132)
- 作品数：4 被引量：45H指数：2
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- 小鼠肥大细胞瘤P815特异抗原P1A的克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 目的 克隆小鼠肥大细胞瘤P815细胞株的P1A基因以制备肿瘤DNA疫苗。方法 用RT PCR方法制备P1A基因 ,以哺乳细胞高效表达质粒pCI neo为载体 ,构建重组DNA疫苗。重组体用克隆位点上游和下游的T7和T3启动子序列为测序引物 ,用自动测序仪测序鉴定克隆的正确性。再将鉴定过的重组质粒用磷酸钙法转化 2 93细胞 ,用RT PCR法鉴定转化细胞中P1A基因的表达。结果 正确构建了P1A/pCI neo重组质粒 ,并且在转化此质粒的 2 93细胞中检测出了P1A的表达。结论 成功地构建了重组P1A/pCI neo肿瘤疫苗 。
- 倪兵吴玉章唐艳邹丽云万瑛赵建平
- 关键词：RT-PCR肥大细胞瘤克隆DNA疫苗
- HBV新型免疫原的设计、合成及免疫原性研究被引量：39
- 2000年
- 目的 探讨如何将表位构建成有效免疫原。方法 以Pre S( 2 ) 蛋白两优势性B细胞表位和HBcAg两Th细胞表位为基础 ,设计、合成了 2种MAP多肽 ,以此两MAP肽为免疫原免疫兔和小鼠 ,观察体液免疫反应。结果 此两种MAP多肽均比Pre S( 2 ) 蛋白诱发更高抗体滴度 ;Th细胞表位引入可显著增强反应强度。结论 增加肽抗原结构复杂性可提高其免疫原性 ,其表位排列以B细胞表位在赖氨酸核心外侧为佳 。
- 吴玉章刘茂昌贾正才邹丽云
- 关键词：乙型肝炎HBVMAPB细胞表位
- Delta Pak C_(18)填料用于P44纯化制备工艺可行性研究
- 2000年
- 目的 研究DeltaPakC18反相填料用于P44纯化制备工艺可行性 ,为固相合成疏水性肽苗的制备工艺作探索性研究。方法 选用美国Waters公司DeltaPakC18反相色谱填料和高压液相色谱系统Delta6 0 0 ,采用乙腈、三氟乙酸体系为流动相 ,对P44从分析柱、半制备柱、径向加压制备柱 3个水平进行了基线分离载量及放大的研究。结果 目标肽峰面积积分分别为 71.14 %、70 .12 %、6 9.6 8% ,收率放大前后趋一致 ,载量分别为 10 0 μg、<5mg、<10mg ,制备目标肽收峰经SymmetryC18柱分析及PDA纯度鉴定为单一组分。结论 该填料可作为P44的小量精制 。
- 周伟吴玉章王祥智边疆贾正才
- 关键词：DELTAPAK载量
- 技术方法LC/MS鉴定固相合成多肽P14分子异构体存在的方法被引量：1
- 2000年
- 目的 确认固相合成多肽P14分子是否存在异构体。方法 通过HP 110 0与ESI离子源PEAPI2 0 0 0液质联用 (LC/MS)分离P14肽 ,在质谱鉴定合成肽主峰为理论设计分子量前提下 ,应用PESCIEXAn alyst 1.0b3质谱分析软件分析子离子流色谱图。结果 从总离子流色谱图中精确提取P14肽Q1正离子双电荷质量数 ,形成P14肽质量数子离子流色谱图 ,其中有散在的不同保留时间的质量数存在。结论 P14肽有异构体存在 ,与结合理论上分析P14氨基酸组成发现 (P14组成中有 6个胱氨酸 ,其存在无疑增加了分子内二硫键形成的可能性 )
- 周伟吴玉章边疆贾正才
- 关键词：固相合成异构体LC/MS
