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国家教育部博士点基金(200807120007)
国家教育部博士点基金(200807120007)
- 作品数：7 被引量：39H指数：3
- 相关作者：巩振辉李大伟陈儒钢李永新柴贵贤更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 辣椒疫病抗性相关的共显性RGA-STS标记的开发及应用被引量：10
- 2011年
- 采用辣椒抗病基因同源序列(Resistance gene analogues)(RGA2)设计1对特异引物,对高抗辣椒疫病品种CM334和极感疫病品种Early Calwonder(EC)进行多态性扩增,开发出共显性的RGA-STS1200标记。利用STS1200标记在具有不同疫霉菌生理小种抗性的辣椒材料CM334、PBC459、PBC137-1和对辣椒疫霉菌3个生理小种都不具抗性的辣椒材料EC、茄门和B2间进行多态性扩增。结果表明,由3个辣椒疫病抗性材料所扩增出的条带大小一致,而由3个感辣椒疫病品种所扩增出的条带大小一致。说明STS1200标记可用于鉴定辣椒疫病抗、感材料。同时,利用共显性的RGA-STS1200标记在苗期及时剔除CM334和EC正反杂交所得F1代假杂种,进一步构建用于辣椒疫病抗性研究用的F2代分离群体。这是少数报道利用RGA-STS标记对辣椒疫病抗性进行鉴定,也是第一次利用RGA-STS标记对作物种子真伪进行鉴定。
- 李永新巩振辉李大伟陈儒钢
- 关键词：辣椒疫病分子标记纯度鉴定
- 辣椒ML基因植物表达载体的构建及其转化被引量：2
- 2010年
- 为分析辣椒ML基因在抗辣椒疫病方面的作用,构建了ML基因的植物表达载体pBI121-ML,采用快速冻融法将表达载体导入农杆菌EHA105,并用农杆菌介导法转化辣椒感病品种B12,对得到的转化植株经PCR和RT-PCR分子检测,结果显示,获得了4个辣椒转基因株系.
- 包良帅巩振辉李大伟黄炜逯明辉陈儒钢
- 关键词：辣椒植物表达载体
- 辣椒疫霉菌复壮与保存及生长特性研究被引量：3
- 2012年
- 研究了辣椒疫霉菌3个生理小种的孢子囊诱导、回接复壮、短期固体培养基保存方法和复壮、培养基厚度、菌龄、生理小种对菌落生长及其形态的影响。结果表明:打菌饼诱孢较整皿光照诱孢速度快、产孢量大;发病辣椒茎段较发病叶片回接效率高,达到50%;疫霉菌在16℃下固体培养基上保存效果最好,保存时间为3～4个月;辣椒疫霉菌复壮前后Ph1、Ph3生理小种菌丝生长速率无显著差异,Ph2有显著差异,复壮后3个生理小种菌丝都变致密,致病性增强;培养基厚度可影响菌丝生长速率,10～15 mL体积的培养基较适合疫霉菌的培养;疫霉菌菌丝的菌龄对菌丝生长速率无影响;Ph1、Ph2、Ph3随着致病性的增强菌丝生长速率下降。
- 蒋兰君巩振辉赵倩
- 关键词：辣椒疫霉菌生理小种复壮生长速率
- 辣椒疫霉菌单个孢子囊快速分离及复壮技术研究被引量：3
- 2010年
- 通过研究马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和PDA含药选择性培养基(PDAPR)对辣椒疫霉菌单个孢子囊分离的影响,筛选出最佳进行单个孢子囊分离的培养基;利用一对抗、感品种作为寄主,通过常规抗病性鉴定技术,对陕西辣椒疫霉菌复壮前后的致病力进行了测定。结果表明:最佳进行辣椒疫霉菌单个孢子囊分离的培养基是PDA含药选择性培养基,其分离率高达95%,其中污染率只有15.8%;复壮前后菌株对感病品种的致病力有明显的差异,复壮后菌株的致病力比于复壮前提高27.2%,且与刚分离后菌株的致病力相当,说明通过复壮能够恢复辣椒疫霉菌菌株的致病力。
- 柴贵贤巩振辉李大伟黄炜逯明辉陈儒钢
- 关键词：辣椒疫霉菌复壮致病力
- 大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立被引量：15
- 2010年
- 比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率,并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明:高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率,其效率提高了966.1%,而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。-80℃超低温长期保存时,相比较于15%甘油,以7%DMSO为冻存保护剂保存的感受态细胞其转化效率达到1.1×107,较15%甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了69%。温浴5 min,冰浴10 min时,其转化效率最高,达到4.95×107。应用高效法制备的感受态细胞转化不同大小质粒的效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞,其转化效率较普通大肠杆菌感受态细胞的提高了550%,而转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12.5%,仅为15min。
- 杨坤巩振辉李大伟
- 关键词：质粒DNA
- 辣椒抗疫病相关基因的RGA-STS标记的开发被引量：3
- 2010年
- 利用西北农林科技大学园艺学院辣椒课题组克隆的辣椒抗疫病相关的全长基因RGA1(GenBank登录号:GQ386945)设计一对引物,上游引物为BY32,下游引物为RBQC-R。以对辣椒疫病高抗的品种CM334和感病品种EC为试材,利用PCR技术分析辣椒抗疫病的Sequence Tagged Sites(STS)标记。结果表明,在高抗品种CM334中得到700 bp大小的STS700标记,而在感病品种EC中未扩增出相应大小的片段。在多个不同抗疫病辣椒品种中验证说明,STS700标记鉴定辣椒疫病抗性可靠、稳定。
- 王博左星李永新巩振辉李大伟
- 关键词：辣椒疫病分子标记
