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鱼精蛋白抑制血管生成诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究被引量：4: 2002年; 目的 :探讨鱼精蛋白治疗恶性肿瘤的治疗机制。方法 :通过建立动物肿瘤模型 ,鱼精蛋白实验治疗 ,结合免疫组化及原位DNA缺口末端标记法 ,检测肿瘤内血管密度和凋亡指数。结果 :实验组血管密度明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,同时观察到瘤细胞凋亡的现象 ,凋亡指数为 (7.6 7± 1.70 ) %。结论 :鱼精蛋白可明显降低肿瘤内血管密度 ,同时诱导细胞凋亡。; 李龙江温玉明王昌美陈江; 关键词：鱼精蛋白血管生成细胞凋亡恶性肿瘤

615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装被引量：5: 2002年; 目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。; 龚浩李龙江温玉明王昌美陈俊杰彭文珍; 关键词：基因治疗基因载体

人主要组织相容性抗原B/C分子在口腔鳞癌中转录水平的研究被引量：1: 2003年; 目的　从基因转录水平探讨人主要组织相容性抗原 (HLA)I类分子在口腔鳞癌发生、发展过程中的表达改变。方法　采用地高辛标记的HLA_B C基因座特异性DNA探针通过原位杂交技术和图像分析方法分别检测了2 3例口腔鳞状细胞癌原发灶、10例鳞状细胞癌颈淋巴结转移灶和 11例正常的口腔粘膜上皮组织中HLA_B CmRNA的表达 ,应用ImagePro软件检测杂交信号平均积分光密度 (IOD)值。结果　阳性杂交信号出现于正常上皮和肿瘤细胞的胞浆内 ;IOD值在原发灶组与正常粘膜组间存在显著性差异 (P <0 0 5 ) ,而转移灶组的平均IOD值与原发灶组及正常粘膜组均未见统计学差异 ;相同患者原发灶与转移灶的平均IOD值也未见有显著性差异。结论　在口腔鳞癌的发展过程中肿瘤组织通过下调HLA_I分子的转录水平以最终逃脱宿主CTL的免疫监视功能 ,但肿瘤转移灶中HLA_B; 张少平李龙江佟猛; 关键词：口腔鳞癌转录水平原位杂交

人类主要组织相容抗原DR分子在口腔鳞癌中表达的研究: 2003年; 目的　从基因转录水平和蛋白表达水平探讨了人主要组织相容抗原DR(HLA_DR)抗原分子在口腔鳞癌演变过程中的表达改变。方法　应用HLA_DR特异性单抗和HLA_DRβ基因特异性寡核苷酸探针分别通过免疫组织化学及原位杂交的方法分别从蛋白及转录水平检测了 32例人口腔鳞癌原发灶、15例颈淋巴结转移灶和 2 6例正常口腔粘膜上皮标本内HLA_DR的表达。结果　口腔鳞癌原发灶内HLA_DR的表达显著性的高于正常口腔粘膜组 (P <0 0 5 ) ;淋巴结转移灶的HLA_DR表达与原发灶和正常粘膜均未见统计学差异。原位杂交和免疫组化对于HLA_DR表达的检测具有一致性。结论　HLA_DR在口腔鳞癌中存在有表达异常增高的现象。; 李龙江张少平佟猛; 关键词：口腔鳞癌原位杂交免疫组化

615小鼠H-2K^k基因cDNA的克隆及序列测定和分析被引量：2: 2002年; 目的 :克隆 6 15小鼠主要组织相容性复合体 (MHC)Ⅰ分子抗原识别基因H_2Kk 并测序分析 ,为转基因治疗提供目的基因。方法 :采用RT_PCR法从 6 15小鼠肝组织总RNA中获得 1 4kb的H_2Kk 基因cDNA ,将其定向连接至PGEM3Zf(+)载体 ,转化E coliJM10 9,限制性内切酶筛选出阳性克隆PGEM3Zf(+)_H_2KkcDNA ,末端终止法完成H_2KkcDNA的全序列测定。结果 :测得的H_2KkcDNA序列与文献报道序列同源性高达 99% ,编码MHCⅠ分子抗原识别部位的氨基酸残基的核苷酸序列完全相同。结论 :成功克隆了 6 15小鼠MHCⅠ分子抗原识别基因。; 李龙江龚浩陈俊杰王若菡温玉明王昌美; 关键词：主要组织相容性复合体克隆小鼠转基因治疗

口腔癌细胞诱导的淋巴管内皮细胞基因表达谱的变化被引量：1: 2009年; 目的探讨在口腔癌细胞影响下淋巴管内皮细胞分子表型的变化。方法利用体外共培养模型,将淋巴管内皮细胞与口腔癌细胞进行共培养,模拟肿瘤中淋巴管内皮细胞的变化。应用Affymetrix U133Plus2.0基因芯片对肿瘤组织中淋巴管内皮细胞(TLEC)与淋巴管内皮细胞(LEC)基因表达的差异进行了检测和比较。并对功能相似的表达差异基因进行分类。结果差异基因表达谱共发现了677个基因表达差异在1倍以上,其中在TLEC中表达上调的基因有384条,下调的基因有293条。这些基因与细胞黏附、凋亡、运动、发育及血管生成有关。同时这些基因还参与细胞的信号传导、免疫应答、细胞代谢等过程。结论LEC与TLEC在分子水平是有差别的。以此为基础,可以针对淋巴管内皮细胞进行靶向阻断,达到治疗口腔癌淋巴道转移的目的。; 张壮张松涛韩波夏辉潘剑; 关键词：口腔癌淋巴管内皮细胞淋巴道转移

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国家自然科学基金(39700162)