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浙江省科技厅新苗人才计划(2007G60G20700019)

作品数:1 被引量:17H指数:1
相关作者:祝璟琳王国良金珊更多>>
相关机构:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心宁波大学更多>>
发文基金:浙江省科技厅新苗人才计划浙江省科技攻关计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇养殖
  • 1篇养殖大黄鱼
  • 1篇弧菌
  • 1篇黄鱼
  • 1篇多重PCR
  • 1篇病原弧菌
  • 1篇大黄鱼

机构

  • 1篇宁波大学
  • 1篇中国水产科学...

作者

  • 1篇金珊
  • 1篇王国良
  • 1篇祝璟琳

传媒

  • 1篇中国水产科学

年份

  • 1篇2009
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
养殖大黄鱼病原弧菌多重PCR检测技术的建立和应用被引量:17
2009年
溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是浙江省养殖大黄鱼(Pseudnosciaena crocea)弧菌病的主要致病菌。本研究选择针对溶藻弧菌和副溶血弧菌的胶原酶基因,哈维氏弧菌的部分ToxR基因的特异性,优化设计了3对特异性引物,通过进行多重PCR反应体系优化,多重PCR产物的测序鉴定与特异性和敏感性实验,建立了一种检测致病性弧菌的多重PCR检测方法。经过琼脂糖凝胶电泳后的条带分析判断,可以在一个PCR管中同时成功地检测这3种病原细菌,含溶藻弧菌、哈维氏弧菌和副溶血弧菌3种致病弧菌核酸的阳性对照样品分别扩增出大小为737bp、382bp和271bp的预期产物,其灵敏度是102~103CFU/mL。将该方法应用于检测人工感染后的养殖大黄鱼病鱼肝脏和肾脏,结果在6份组织样本中,5份检出原始感染菌株,与API20E鉴定结果相符;对弧菌病流行季节采集的未发病的16份养殖大黄鱼组织样本和16份水体样本进行抽检,结果在1份大黄鱼组织样本中检出哈维氏弧菌,7份水体样本中检出这3种弧菌中的1种或2种,鉴定结果与API20E鉴定结果符合率为93.75%。说明该方法不仅可以检测发病鱼,还可以检测无病症带菌大黄鱼以及带菌水样,且说明海洋水体中存在着大黄鱼弧菌病的致病菌。结果说明,多重PCR检测方法具有较高的敏感性与特异性,可以缩短检测时间,降低检测成本,该方法的建立对养殖大黄鱼弧菌病的快速诊断和分子流行病学的调查具有重要意义。
祝璟琳王国良金珊
关键词:大黄鱼多重PCR
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