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排序方式：

SERK基因片段在平邑甜茶和四倍性后代花期前后的表达特性研究被引量：2: 2011年; 为了探索SERK基因在苹果属植物无融合生殖习性上的功能与作用,阐明该基因在胚胎发育早期在子房或胚珠组织的表达特性,以平邑甜茶及其与扎矮山定子杂交所得四倍性矮生后代28#和33#花期前后的子房中段为试材提取总RNA;利用通过平邑甜茶叶片中扩增并测序的SERK基因片段设计的特异引物,在以18S rRNA为内参基础上,采用RT-PCR技术分析了已得SERK基因片段在3份试材花期前后的表达情况。半定量RT-PCR分析结果表明,再次获得的SERK基因片段在3份试材胚胎发育的不同阶段均有表达,但表达强度有所不同。文中讨论了SERK基因片段的表达特性与胚胎发育和无融合生殖特征的关系。; 甄睿张丽杰梁敏高书燕董文轩; 关键词：无融合生殖半定量RT-PCR 平邑甜茶

平邑甜茶基因组DNA提取方法的比较被引量：3: 2012年; 为获得高质量的基因组DNA,以平邑甜茶及其与扎矮山定子杂交所得四倍性矮生后代33#、45#新鲜叶片为试材,分别采用常规CTAB法、改良的CTAB法和基因组试剂盒法提取平邑甜茶总DNA,进行琼脂糖凝胶电泳,使用核酸蛋白仪对DNA质量和纯度进行检测。结果表明:利用基因组试剂盒法、常规CTAB法和改良CTAB法均可获得DNA,但获得的DNA质量和纯度存在一定的差异。试剂盒法和CTAB法可以获得较高质量的DNA。但由于基因组试剂盒法成本相对较高,改良CTAB法较耗时,建议采用常规CTAB法提取平邑甜茶及其杂交后代33#、45#品种基因组DNA。; 张丽杰王玉霞郜亚婷董文轩; 关键词：平邑甜茶叶片基因组DNA

苹果属无融合生殖SERK1基因的克隆与生物信息学分析被引量：1: 2016年; [目的]为探讨苹果属植物无融合生殖分子机制。[方法]以苹果属平邑甜茶及杂种后代33#为试材,以苹果基因组CDS序列设计引物,通过PCR扩增技术克隆出SERK同源基因的c DNA全长序列,命名为Mh SERK1和MhdSERK1(Gen Bank登录号JQ231273和JQ231272),利用实时定量RTq PCR的方法检测了这两个基因在平邑甜茶和杂种后代各组织和器官中的表达模式。[结果]序列分析显示Mh SERK1和Mhd SERK1编码区序列全长为1 899 bp和1 881 bp,分别编码632和626个氨基酸,其氨基酸序列与其他植物的SERK1同源基因所编码的氨基酸同源性都在80%以上,特别是与葡萄科龙眼品种同源性最高,高达92.56%,与模式植物拟南芥、烟草等植物的SERK同源基因都具有很高的同源性。实时定量PCR结果表明,在平邑甜茶和杂种后代不同组织、花器官中SERK1基因的表达量存在差异,其中在子房中的表达量最高,在营养生长的组织中表达量很低,在平邑甜茶花蕾期的子房中表达量最高。[结论]推测该基因在平邑甜茶和杂种后代的生殖发育过程中可能发挥重要作用。; 张丽杰Mohamed hamad董文轩郭苏漫孟庆娇; 关键词：苹果属 SERK 同源基因生物信息学分析

苹果属无融合生殖相关SERK4基因表达载体的构建: 2013年; 为了探讨SERK4基因影响苹果属平邑甜茶及其杂种后代33#株系无融合生殖能力的分子机理,以平邑甜茶及其杂种后代33#子房cDNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增出SERK4基因,再将SERK4基因克隆到植物表达载体pBI121中,获得了SERK4基因的植物表达载体pBI121-MhSERK4和pBI121-MhdSERK4。测序结果表明,pBI121-MhSERK4和pBI121-MhdSERK4载体构建成功,可用于后续的转基因研究。; 张丽杰董文轩; 关键词：苹果属

苹果属四倍性皱叶矮生株系小孢子败育过程的解剖观察被引量：1: 2010年; 为了研究平邑甜茶与扎矮山定子杂交后代中四倍性皱叶矮生株系10#和23#植株的雄性不育表现和细胞学特征,在观测花朵形态基础上,采用石蜡切片法显微观察了四倍性皱叶矮生株系及父本扎矮山定子(对照)的小孢子发生和败育过程。结果表明,10#和23#株系能产生雄蕊,但在初花期就出现花药干瘪现象,也没有显现花粉。显微观察发现:10#和23#株系在小孢子母细胞的形态特征和发育过程上与对照没有明显区别,它们的小孢子母细胞也能进行减数分裂并形成形态正常的二分体和四分体,但未能形成单核花粉粒;到开花前它们的花药均表现空囊现象;因此,10#和23#株系的小孢子败育时期是在四分体到单核花粉粒期间。; 赵晓东董文轩计永胜甄睿; 关键词：苹果属小孢子败育

苹果属无融合生殖相关基因SERK1遗传转化的研究: 2015年; 本研究以p BI121为植物表达载体,在已构建的无融合生殖基因表达载体p BI121-Mh SERK1和p BI121-Mhd SERK1的基础上,利用根癌农杆菌介导法,将苹果属无融合生殖相关基因SERK1转入受体植株烟草中。研究结果表明:烟草叶片浸染后,经共培养和选择培养形成再生芽,分别获得7株p BI121-Mh SERK1和6株p BI121-Mhd SERK1转烟草抗性植株,PCR检测证明已成功获得Mh SERK1和Mhd SERK1烟草转化株系。本研究可为下一步无融合生殖相关基因功能验证研究奠定基础。; 张丽杰郭苏曼董文轩; 关键词：烟草

平邑甜茶总RNA提取方法研究被引量：2: 2014年; 为探究苹果属富含多糖多酚物质的平邑甜茶总RNA提取的最优方法,本研究以平邑甜茶的幼嫩叶片、盛花期子房、花瓣和萼片为材料,利用常规CTAB法和试剂盒法(TIANGEN生化科技有限公司提供的RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒)分别提取平邑甜茶不同器官、组织的总RNA,并对RNA浓度和和电泳图谱进行比较分析。研究结果表明:利用天根生化科技公司提供的多糖多酚植物总RNA提取试剂盒可提取到纯度较高,完整性较好的总RNA,可以用于获取cDNA全长、RT-PCR及荧光定量RT-PCR等分子生物学实验。; 张丽杰董文轩; 关键词：苹果属平邑甜茶总RNA提取

苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析被引量：1: 2015年; 本研究利用同源克隆法以苹果属平邑甜茶和杂种后代叶片为试验材料,克隆得到4个SERK基因家族片段,并分析了SERKs家族基因在平邑甜茶和杂种后代不同器官和组织中的表达情况。研究结果表明:分离获得的4个SERK基因家族片段的氨基酸序列与模式植物拟南芥、烟草等植物的同源性均在84%以上,同时与其他物种的氨基酸序列进行Blast比对都具有较高的同源性;RT-PCR定量分析结果表明SERK1、SERK2、SERK3、SERK4基因主要在生殖器官中表达。因此,推测SERKs基因在平邑甜茶和杂种后代生殖发育过程中起着重要的调控作用。本研究结果为进一步揭示无融合生殖的发生机理奠定了基础。; 张丽杰郭苏漫董文轩; 关键词：RT-PCR

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国家自然科学基金(30971975)