广东省高等学校中药有效性与安全性重点实验室开放基金
- 作品数：20 被引量：248H指数：10
- 相关作者：王宁生朱晓峰孙升云王攀攀杨丽更多>>
- 相关机构：广州中医药大学暨南大学附属第一医院暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金广东省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 淫羊藿素通过雌激素受体和骨形态发生蛋白信号诱导MC3T3-E1 subclone 14细胞分化被引量：18
- 2011年
- 目的:观察淫羊藿素(ICT)对MC3T3-E1 subclone 14前体成骨细胞株增殖、分化的影响,以及雌激素受体(ER)和骨形态发生蛋白(BMP)信号在分化中的作用。方法:WST-8、BrdU法检测ICT对MC3T3-E1subclone 14细胞活力和增殖的影响;ICI182780阻断ER受体信号后,检测ICT和noggin对MC3T3-E1 subclone 14细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、I型胶原(Col I)和骨钙素(BGP)的影响;实时荧光PCR检测ICT对BMP-2、4、7 mR-NA表达的影响;Western blotting检测ER受体信号阻断后,ICT对Smad1/5/8蛋白磷酸化的影响。结果:ICT(0.1μmol/L、1μmol/L)可以提高MC3T3-E1 subclone 14细胞ALP、Col I、BGP和矿化结节数量(P<0.01或P<0.05),表明ICT有促分化的作用,但对细胞活力和增殖指数无明显影响;阻断ER受体信号后,ICT促分化作用明显下降(P<0.01);ICT可以提高BMP-2、4 mRNA的表达(P<0.01),但对BMP-7 mRNA无作用(P>0.01);阻断ER信号后,ICT促Smad1/5/8磷酸化明显减弱(P<0.01)。进一步阻断BMP/Smad信号可以抑制ICT促分化的作用(P<0.01)。结论:ICT可以通过ER受体激活BMP/Smad信号通路,进而促进MC3T3-E1 subclone 14细胞的分化。
- 朱晓峰张荣华孙升云王攀攀杨丽韩莉金玲
- 关键词：淫羊藿素骨形态发生蛋白
- HPLC法研究当归-红花单煎及共煎液中有效成分含量的变化被引量：7
- 2009年
- 目的研究和探讨当归-红花单煎及共煎液中有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化,初步探索两味中药配伍应用的变化规律。方法采用Phenomenex C18柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-0.05%磷酸水溶液p(H=2.45,25∶75)为流动相;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样温度:5℃;检测波长分别为320nm、403nm,测定追踪当归-红花共煎液与单煎液中主要有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化。结果阿魏酸回归方程为Y=3.8372X+0.0219(r=0.9998),在0.5～10.0μg mL/范围内线性关系良好,平均加样回收率为92.68～101.13%,RSD小于3.2%;羟基红花黄色素A回归方程为Y=1.3647X-0.3714(r=0.9999),在5.0～100.0μg mL/范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.17～102.97%,RSD小于2.8%;当归红花共煎液中阿魏酸含量比当归单煎液中平均升高142.64%,羟基红花黄色素A含量比红花单煎液中平均升高145.37%。结论当归-红花共煎液中阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量高于各单煎液中含量,两者配伍具有一定的合理性。该法快速、简便、准确,可为评价提取物中阿魏酸和羟基红花黄色素A的质量提供依据。
- 张荣刘睿黄天来宓穗卿王宁生
- 关键词：红花羟基红花黄色素A单煎共煎反相高效液相色谱法
- 骨碎补总黄酮对高糖作用下成骨细胞分化及ERK_(1/2)和p38蛋白激酶表达的影响被引量：12
- 2012年
- 目的:研究骨碎补总黄酮(TFDF)对高浓度葡萄糖作用下成骨细胞(OB)分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,为TFDF能否用来防治糖尿病性骨质疏松提供细胞分子学依据。方法:二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨OB及活性观察;MTT法检测TFDF对OB的细胞毒性,确定实验药物在培养基中的添加剂量;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同浓度葡萄糖对OB碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察TFDF对高糖作用下OB分化活性的干预作用;Western-blot检测TFDF对高糖作用下OB ERK1/2和p38蛋白磷酸化的情况。结果:原代分离培养新生SD大鼠OB,具有典型的OB分化特性;根据TFDF对OB的毒性试验,选择TFDF的浓度25、50、100 mg/L为实验梯度浓度;葡萄糖(25、50 mmol/L)可以降低OB表达ALP、ColⅠ、BGP,降低其矿化能力;TFDF能剂量依赖性的提高高糖(25 mmol/L)作用下OB表达ALP、ColⅠ、BGP和矿化能力;TFDF(50 mg/L)能提高高糖(25 mmol/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化。结论:高糖可以降低OB分化和矿化能力,TFDF可提高高糖作用下OB的分化和矿化能力,其作用机理可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关。
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云王攀攀杨丽韩莉金玲
- 关键词：骨碎补总黄酮成骨细胞高糖分化
- 骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及p38和ERK1/2蛋白激酶表达的影响被引量：10
- 2012年
- 目的研究骨碎补总黄酮(TFDF)对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,探讨骨碎补总黄酮防治骨质疏松的作用机理。方法二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞以及活性观察;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同质量浓度晚期糖基化终末产物对成骨细胞碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化的干预;Western-blot检测骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下,成骨细胞p38和ERK1/2蛋白磷酸化的影响。结果晚期糖基化终末产物(2004、00、800 mg/L)可以降低成骨细胞表达ALP、Col I、BGP,降低其矿化能力。骨碎补总黄酮可以剂量依赖性的提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下成骨细胞表达ALP、Col I、BGP和矿化能力。骨碎补总黄酮(50 mg/L)可以提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化。结论骨碎补总黄酮可以提高晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化和矿化能力,其机制可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关。
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云王攀攀杨丽
- 关键词：骨碎补总黄酮晚期糖基化终末产物成骨细胞分化
- 益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及相关机制研究
- 目的研究益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)和骨保护蛋白(OPG)的影响,探讨益骨胶囊防治骨质疏松的作用机理。方法选取10月龄SD雌性大鼠40只,随机分...
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云韩莉王攀攀杨丽
- 关键词：益骨胶囊成骨细胞分化骨形态发生蛋白2骨保护蛋白
- 文献传递
- 当归、红花与硫酸氢氯吡格雷抗血小板聚集的相互作用被引量：20
- 2009年
- 目的观察硫酸氢氯吡格雷与当归、红花抗血小板聚集的相互作用。方法取SD大鼠48只,随机分为6组,即正常对照组、氯吡格雷组(1mg·kg-1·d-1,1次/d)、当归组(0.7g·kg-1·d-1,2次/d)、红花组(0.7g·kg-1·d-1,2次/d)、氯吡格雷加当归组(1mg·kg-1·d-1,1次/d+0.7g·kg-1·d-1,2次/d)、氯吡格雷加红花组(1mg·kg-1·d-1,1次/d+0.7g·kg-1·d-1,2次/d),连续灌胃给药5d后,大鼠腹主动脉取血,观察各组大鼠血小板的聚集情况;另取大鼠54只,观察各组对大鼠动-静脉旁路模型血栓形成的抑制作用;取NIH小鼠60只,采用小鼠断尾法测定出血时间、玻片法测定凝血时间,并抽血检测血常规,观察硫酸氢氯吡格雷与当归、红花联用对小鼠出、凝血时间和血常规的影响。结果除正常对照组外,其余各组均可明显抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集、动-静脉混合血栓形成,显著延长出血时间。合用组较单独用药组的上述作用显著增强。各组对凝血时间和血常规影响不大。结论当归、红花能显著增强氯吡格雷抗ADP诱导的大鼠血小板聚集和动-静脉旁路血栓的形成,显著延长出血时间。
- 李丽李艳红王宁生
- 关键词：当归红花硫酸氢氯吡格雷血小板聚集血栓
- 益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及BMP-2和OPG的影响被引量：9
- 2012年
- 目的研究益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)和骨保护蛋白(osteopro-tegerin,OPG)的影响,探讨益骨胶囊防治骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机制。方法选取10月龄SD雌性大鼠40只,随机分为益骨胶囊高、中、低剂量组及空白组,每组10只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清。二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,传代后分为空白对照组、模型组、中药低、中、高剂量组。模型组用AGEs(400mg/L)处理,中药低、中、高剂量组分别用AGEs(400mg/L)和低、中、高剂量含药血清共同处理,分别用pNPP、ELISA、茜素红染色法检测成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,ColⅠ)、骨钙素(bone gla protein,BGP)以及矿化结节,RT-PCR测定成骨细胞中BMP-2、OPG mRNA的表达,ELISA法检测BMP-2、OPG蛋白的表达量。结果原代分离培养的新生大鼠成骨细胞具有典型的成骨细胞特征;与空白对照组比较,模型组成骨细胞(OB)ALP、ColⅠ、BGP、BMP-2、OPG蛋白及BMP-2、OPG mRNA表达降低,矿化结节减少,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,中药各剂量组ALP、ColⅠ、BGP、BMP-2、OPG蛋白及BMP-2、OPG mRNA表达升高,矿化结节增加,且随剂量增加而明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论益骨胶囊含药血清提高AGEs作用下成骨细胞分化和矿化能力,提高BMP-2、OPG的表达,这可能是益骨胶囊防治OP的机制之一。
- 朱晓峰王廷春张荣华孙升云韩莉王攀攀杨丽
- 关键词：益骨胶囊成骨细胞分化骨形态发生蛋白2骨保护蛋白
- 槲皮素、山奈酚、芦丁对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶的诱导作用被引量：6
- 2010年
- 目的:研究槲皮素、山奈酚、芦丁对大鼠细胞色素P450酶6种亚型的诱导作用。方法:槲皮素组10,50,250mg.kg-1;山奈酚组10,50,250mg.kg-1;芦丁组90mg.kg-1,雄性SD大鼠连续灌胃10d,取肝脏组织,应用液质联用,反转录-聚合酶链反应,免疫印迹杂交方法分别检测CYP450酶活性,基因表达和蛋白表达的变化。结果:槲皮素10,50,250mg.kg-1组对CYP1A2蛋白表达的诱导作用呈剂量依赖型,分别提高了31.1%,82.4%,119.3%;250mg.kg-1组使CYP1A2的基因表达提高了86.3%,CYP1A2的活性增加了44.2%,CYP2E1蛋白表达提高了54.3%,CYP2E1的活性提高36.7%。山奈酚50,250mg.kg-1组诱导CYP1A2的基因和蛋白表达,分别提高了36.2%,86.8%,110.5%,204.1%;3个剂量组使CYP1A2的活性分别提高18.3%,30.1%,53.9%。芦丁90mg.kg-1组能诱导CYP1A2的活性和基因、蛋白表达,分别提高了62.1%,90.7%,176.2%;也使CYP2C11的活性增加30.6%。结论:槲皮素、山奈酚、芦丁对大鼠多种CYP450亚型有诱导作用,提示有发生药物相互作用的可能性。
- 和凡钟国平赵立子毕惠嫦黄民
- 关键词：槲皮素山奈酚芦丁细胞色素P450酶
- 天麻钩藤方对肾性高血压大鼠心脏的保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的研究天麻钩藤方对肾性高血压大鼠(RHR)的心脏保护作用及其机制。方法两肾一夹法造成肾性高血压大鼠模型,随机分为天麻钩藤方高、中、低剂量组、模型组、依那普利组,另设假手术组,检测各组大鼠血压、左心室质量指数(LVMI)及心肌中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的含量。结果天麻钩藤方高剂量组大鼠血压、LVMI、Hyp、MDA均明显低于模型组大鼠;SOD、GSH-PX含量明显高于模型组,差异具有统计学意义。结论该复方可能通过调节肾性高血压大鼠血压和心肌的抗氧化作用,抑制胶原增生以发挥其对心脏的保护作用。
- 李红宇杨蕾王宁生宓穗卿
- 关键词：肾性高血压大鼠左心室质量指数羟脯氨酸
- 茅莓根中对多巴胺神经元保护作用成分的分离鉴定研究被引量：9
- 2008年
- 目的:从茅莓根中分离鉴定出具有保护多巴胺能神经元作用的甜叶苷R1(Suavissimoside R1)。方法:用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)处理的小鼠帕金森病模型检测从茅莓根中提取出的粗提物以及二次提取物(精提物)的保护作用,然后在此基础上对精提物进行分离纯化,最后分离出白色针状结晶性成分,根据化合物的理化常数测定和用红外光谱数据分析鉴定该成分结构为甜叶苷R1。以1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的大鼠中脑多巴胺能神经元为模型,检测了甜叶苷R1对多巴胺能神经元的保护作用。结果:分离得到甜叶苷R1。甜叶苷R1浓度在100μmol/L时,对MPP+处理的多巴胺能神经元有明显的保护作用。结论:甜叶苷R1对多巴胺能神经元有保护作用。
- 于占洋阮浩澜朱小南汪雪兰陈汝筑林永成
- 关键词：茅莓多巴胺能神经元帕金森病
