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浙江省教育厅科研计划(Y201016840)
作品数:
1
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张慧
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基于幽门螺杆菌UreB优势抗原表位多抗原肽疫苗制备及其免疫保护作用
目的构建串联式幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527原核重组表达系统,制备UreB322和UreB527表位与多肽载体Poly-Asp-Lys的多抗原肽(MAP)疫苗并确定其免疫原性和免疫保护性。方...
王艳芳
王欢
严杰
张慧
阮萍
关键词:
幽门螺杆菌
免疫保护
文献传递
基于幽门螺杆菌UreB优势抗原表位多抗原肽疫苗制备及其免疫保护作用
被引量:2
2012年
目的构建串联式幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527原核重组表达系统,制备UreB322和UreB527表位与多肽载体Poly—Asp.Lys的多抗原肽(MAP)疫苗并确定其免疫原性和免疫保护性。方法采用连接引物PCR构建含肠激酶(EK)位点的串联式UreB322和UreB527表位基因及其原核表达系统。表达的目的重组融合蛋白8×[rEK-UreB322-EK-UreB527-EK]经EK水解后用SephadexG-25柱分离rUreB322-EK和rUreB527-EK片段。采用碳二亚胺法将rUreB322-EK、rUreB527-EK与Poly.Asp—Lys载体分子交联,制备出多抗原肽疫苗MAP—rUreB322/B527。采用ELISA和Westernblot分别检测各重组表位肽及MAP-rUreB322/527的抗原性和免疫反应性。采用幽门螺杆菌SS1株感染BALB/c小鼠模型检测MAP—rUreB322/527免疫保护效果。结果获得了8次重复串联的UreB322和UreB527编码基因及其原核表达系统,目的融合蛋白8x[rEK—UreB322-EK—rUreB527-EK]表达量可达细菌总蛋白的48%。肠激酶可将目的融合蛋白完全水解为rUreB322-EK和rUreB527-EK片段。rUreB322-EK和rUreB527-EK与Poly—Asp-Lys交联率高达92.5%。幽门螺杆菌全菌抗体及rUreB.IgG均能识别rUreB322.EK、rUreB527.EK和MAP.rUreB322/527并与之结合。MAP.rUreB322/527免疫小鼠血清抗体水平明显高于rUreB(P〈0.05)。50或100p,gMAP—rUreB322/527对幽门螺杆菌SS1株感染小鼠的保护率(83.3%和91.7%)明显高于等量rUreB(41.7%和50.0%)(P〈0.05)。结论本研究成功地构建了幽门螺杆菌UreB抗原优势表位UreB322和UreB527重复串联式编码基因及其原核表达系统,基于UreB优势抗原表位的多抗原肽疫苗MAP—rUreB322/527能显著提高免疫保护效果。
王艳芳
王欢
张慧
严杰
阮萍
关键词:
幽门螺杆菌
免疫保护
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