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^(60)Coγ射线复合硫酸二乙酯诱变选育高产新型细菌素Plantaricin 163-1菌株的研究被引量：7: 2015年; 为提高Lactobacillus plantarum 163产的新型细菌素Plantaricin 163-1的抑菌相对效价,以Lb.plantarum 163为出发菌株,通过60Coγ射线复合硫酸二乙酯(DES)诱变,以期得到具有稳定遗传性且细菌素高产的菌株。结果表明:60Coγ射线诱变的最佳辐照剂量为0.6 k Gy,获得了抑菌活性提高23.68%的突变株。然后,在35℃下用0.7%硫酸二乙酯复合处理突变菌体25 min,最终得到一株高产突变菌株L150,其相对抑菌效价是原始菌株2.11倍。通过5代传代培养,遗传稳定性良好。; 党丽娟高钰淇别小妹吕凤霞赵海珍陆兆新; 关键词：植物乳杆菌细菌素诱变硫酸二乙酯

不同诱变方法选育嗜酸乳杆菌NX2-6类细菌素高产菌株被引量：7: 2015年; 采用60Coγ射线、硫酸二乙酯(DES)、原生质体紫外3种诱变方法对嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)NX2-6进行诱变,以期获取高产类细菌素菌株。结果表明,60Coγ射线诱变的最佳辐照剂量为2.0k Gy,DES处理的最佳条件是浓度为0.7%的DES处理菌体10min,原生质体紫外诱变最佳照射时间为20s,分别得到高产菌γ56,D47和UV156,它们的抑菌效价分别为6096.78,5384.98U/m L和6230.79U/m L,是出发菌株抑菌效价(2819.36U/m L)的2.16、1.91、2.21倍。传代表明,突变株γ56、D47、UV156具有稳定的遗传性。; 高钰淇党丽娟别小妹吕凤霞赵海珍陆兆新

Lactobacillus plantarum 163产细菌素食品级培养基筛选及发酵条件优化被引量：4: 2016年; 为获得Lactobacillus plantarum 163最佳食品级培养基,首先筛选出Lb.plantarum 163食品级培养基配方,即白菜汁200?m L/L、番茄汁50?m L/L、葡萄糖10?g/L、K2HPO4 2?g/L,蒸馏水补足至1?L。Plackett-Burman试验设计筛选出Lb.plantarum 163食品级培养基配方的关键因子,即接种量、K2HPO4添加量、p H值和大白菜汁添加量。通过Box-Behnken试验构建了Lb.plantarum 163食品级培养基二次多项式模型,得到理想发酵条件,即K2HPO4 1.89?g/L、大白菜汁341.5?m L/L、接种量3.56%、p H?6.95,其抑菌活性比优化前增加30%以上。; 胡美忠党丽娟陆兆新; 关键词：响应面

Taguchi法优化Bacillus amyloliquefaciens fmb50产surfactin工业发酵培养基被引量：5: 2012年; 采用田口方法(Taguchi method)对影响surfactin生产的各因素进行筛选,并对显著因子的水平进行优化后得出最佳配比。统计分析结果表明:玉米粉、硝酸铵和PO43-对其产量影响显著。获得高产工业发酵培养基的配方为:玉米粉35g/L,硝酸铵为15g/L,尿素6g/L,PO34-20mmol/L,Mn2+0.5mmol/L,Mg2+0.1mmol/L,Cu2+12.8μmol/L,Fe2+1μmol/L,Ca2+0.5μmol/L。此培养基surfactin产量达2294.28 mg/L,较原有Landy培养基产量提高15%,生产成本降低40%,为实现surfactin的工业化生产提供了基础。; 姚树林陆兆新吕凤霞王昱沣别小妹; 关键词：田口方法 SURFACTIN

Paenibacillus polymyxa JSa-9发酵培养基优化及其在黄瓜枯萎病中的应用研究被引量：5: 2016年; [目的]本文旨在提高菌株Paenibacillus polymyxa JSa-9的芽孢产量并研究其芽孢液对黄瓜枯萎病的生物防治作用。[方法]采用单因素试验方法筛选最适于P.polymyxa JSa-9产芽孢的碳源、氮源和无机盐,在此基础上采用Taguchi试验方法优化各组分的最佳配比;通过田间试验研究P.polymyxa JSa-9芽孢液与其他药剂对黄瓜枯萎病的相对防效及对黄瓜幼苗生长的作用。[结果]P.polymyxa JSa-9产芽孢各组分的最优配比为麦芽浸粉15 g·L^(-1)、玉米浆15 g·L^(-1)、Ca CO_35 g·L^(-1)、Mg Cl_2·6H_2O 0.5 g·L^(-1),此条件下预测得到的芽孢产量可达到7.44×10~9CFU·m L^(-1),此时培养基的信噪比为60.13;田间试验中P.polymyxa JSa-9芽孢液相对防效达69.02%,优于发酵上清液,经芽孢液处理的幼苗植株高度为7.61 cm,单株叶片数为4.79,能显著促进黄瓜幼苗生长(P<0.05)。[结论]采用单因素试验与Taguchi试验相结合的方法优化培养基,效果显著,得到的P.polymyxa JSa-9芽孢液对黄瓜枯萎病有良好的防治效果,且具有一定促生长作用。; 王美英王芳韩金志陆兆新别小妹; 关键词：培养基优化黄瓜枯萎病生物防治

原生质体融合选育高产脂肽LI-F多粘类芽胞杆菌及融合菌株表达差异分析被引量：4: 2015年; 本研究以多粘类芽胞杆菌JSa-9前期诱变获得的两株带有营养缺陷型标记的菌株N1-37(Phe–)和N2-27(His–)作为亲本菌株,采用聚乙二醇作为促融剂,进行原生质体融合,筛选出高产LI-F类抗菌脂肽的融合菌株。通过HPLC对融合菌株和原始菌株产LI-F类抗菌脂肽进行定量检测,并利用实时荧光定量PCR对菌株JSa-9和融合菌株中LI-F类抗菌脂肽合成酶的关键基因fus A1、fus A2、fus C1和fus C2的差异性表达进行分析。结果表明,经过原生质融合获得一株LI-F类抗菌脂肽高产菌株F5-15。菌株F5-15的LI-F类抗菌脂肽产量为原始菌株产量的3.1倍,LI-F类抗菌脂肽合成酶的4个关键基因在融合菌株F5-15中的表达量分别是其在原始菌株JSa-9中的10.48、2.48、2.1和11.8倍。; 闫冬韩金志别小妹陆兆新吕凤霞赵海珍张充; 关键词：原生质体制备原生质体融合实时荧光定量PCR

植物乳杆菌fmb10产细菌素发酵条件的优化被引量：6: 2015年; 通过单因素试验对影响植物乳杆菌fmb10发酵产细菌素的8个影响因子进行初筛,采用Plackett-Burman设计法确定显著影响因子,利用最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域,运用Design-Expert软件的中心组合试验设计(central composite design,CCD)对显著影响因子的重要水平和交互作用进行研究。结果表明,菌株fmb10产细菌素的最佳发酵条件为:发酵温度30.38℃、葡萄糖质量浓度21.1 g/L、酵母膏质量浓度11.0 g/L,在此条件下,植物乳杆菌fmb10发酵上清液对大肠杆菌抑菌圈直径平均为22.90 mm,与预测值22.89 mm高度吻合,优化后植物乳杆菌fmb10发酵上清液抑菌圈直径较原始抑菌圈直径(18.37 mm)提高了24.66%。; 陈芸芸陆兆新卢静杨杰魏照辉; 关键词：植物乳杆菌细菌素 PLACKETT-BURMAN设计响应面

Surfactin抑菌稳定性及其在米饭和面包中的应用被引量：9: 2016年; 本文研究了温度、p H、紫外、糖、盐对Surfatin抑菌效果的影响以及其在米饭和面包中的初步应用。结果表明：在弱酸性条件下,Surfatin的抑菌活性随温度变化不大,p H6,100℃处理20 min,对藤黄微球菌的抑菌圈由17.52±0.22 mm变为16.44±0.03 mm;而在碱性条件下,高温处理使其严重失活,在p H8,60℃处理20 min,抑菌圈由15.75±0.19 mm减小到12.69±0.26 mm,且90℃便使其完全失活;紫外会降低Surfactin抑菌活性,但效果不明显;糖、盐对其抑菌效果无显著性影响;在p H大于5.5的食品中,防腐保鲜效果优于Nisin,在米饭中加入适量的Surfactin,可将保质期延长24 h,在面包中适宜添加量为200~500 mg/kg。; 汪水呈曾维伟陆兆新; 关键词：SURFACTIN 防腐保鲜

多黏类芽孢杆菌JSa-9电转化方法的优化被引量：7: 2014年; 为建立多黏类芽孢杆菌JSa-9菌株的高效电击转化体系,本实验研究菌体培养时间、电场强度、电击缓冲液、质粒用量以及电击后复苏培养时间等因素对JSa-9菌株电转化效率的影响。结果表明:Paenibacillus polymyxa JSa-9培养至OD595 nm为0.3时,电转化效率最高,为0.12×103 CFU/μg DNA;用0.5 mol/L甘露醇、0.5 mol/L山梨醇以及10%甘油的电击缓冲液洗涤细胞,在电场强度17.5 kV/cm、电阻200Ω,电容25μF的电击条件下,加入1.0μg/100·mL质粒DNA,复苏培养时间18 h,电转化效率达到约为0.36×103 CFU/μg DNA;制备P.polymyxa JSa-9原生质体,在电场强度5.0 kV/cm的电击条件下,加入0.8μg/100·mL质粒DNA,电转化效率较感受态电转提高到约1.0×103 CFU/μg DNA。; 高玲邓阳陆兆新吕凤霞别小妹; 关键词：电转化

枯草芽孢杆菌生产抗菌物质的食品级发酵培养基优化被引量：9: 2014年; 为得到安全可靠的新型生物防腐剂,用枯草芽孢杆菌发酵食品同时提高其抗菌活性。采用单因素试验和Plackett-Burman试验设计筛选出4个关键因子为脱脂奶粉、番茄汁、发酵时间和发酵温度;使用Box-Behnken原理设计进行响应面试验确定出最佳培养基配方和发酵条件:小麦粉16.0 g/L、脱脂奶粉20.0 g/L、黄豆粉酶解液200.0 mL/L、番茄汁40.0 mL/L、NaCl 10.0 g/L,装液量50.0 mL、发酵温度32.14℃、发酵时间60.0 h。拟合实验模型结果显示:优化后发酵液对荧光假单孢的抑菌圈直径较优化前提高42%,对短小芽孢杆菌的抑菌圈直径较优化前提高47%。; 沈跃丽陈蕊张莉张充赵海珍陆兆新; 关键词：枯草芽孢杆菌

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国家科技支撑计划(2011BAD23B05)

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