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国家质检总局科技计划项目(2010IK016)

作品数：7 被引量：34H指数：4
相关作者：孔繁德徐淑菲刘阳吴德峰林立更多>>
相关机构：厦门出入境检验检疫局福建农林大学浙江清华长三角研究院更多>>
发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 7篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇农业科学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 8篇弧菌
  • 7篇副溶血弧菌
  • 3篇溶藻弧菌
  • 2篇免疫层析
  • 2篇胶体金
  • 2篇PCR技术
  • 2篇PCR技术检...
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇中毒
  • 1篇沙门氏菌
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学技术
  • 1篇食物
  • 1篇食物中毒
  • 1篇双重PCR
  • 1篇免疫学方法
  • 1篇纳米
  • 1篇纳米金

机构

  • 8篇厦门出入境检...
  • 7篇福建农林大学
  • 1篇集美大学
  • 1篇浙江清华长三...

作者

  • 8篇孔繁德
  • 7篇徐淑菲
  • 7篇刘阳
  • 6篇吴德峰
  • 6篇林立
  • 5篇彭小莉
  • 1篇吴玉娟
  • 1篇林方

传媒

  • 1篇福建畜牧兽医
  • 1篇中国动物检疫
  • 1篇经济动物学报
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国兽医科学
  • 1篇海峡科学
  • 1篇微生物前沿

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2013
  • 6篇2012
共 7 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
免疫金层析技术快速检测副溶血弧菌方法的初步研究
2012年
本研究应用兔抗V.parahaemolyticus IgG-2包被硝酸纤维素膜检测线,羊抗兔IgG包被对照线,胶体金标记兔抗V.parahaemolyticus IgG-1,建立了检测副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)的免疫金层析试纸条法(IGCA)。结果表明,阳性者试纸条检测线和对照线均出现红色线,实验过程仅需5～15min即可判断结果,该法对V.parahaemolyticus的最低检测量为3.60×104cfu/mL,与溶藻弧菌、霍乱弧菌、美人鱼弧菌、麦氏弧菌、弗氏枸橼酸杆菌和沙门菌等常见肠道菌不发生交叉反应。将试纸条4℃存放6个月、常温存放3个月,37℃存放1个月,检测结果无差异。说明建立的试纸条检测方法操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好,结果容易观察和判断,非常适于基层养殖部门应用。
孔繁德刘阳徐淑菲彭小莉吴德峰林立
关键词：副溶血弧菌胶体金免疫层析
纳米PCR技术检测溶藻弧菌的建立与初步应用被引量：3
2012年
本研究根据溶藻弧菌(VA)的特异性基因toxR基因序列,应用primer6.0设计了1对特异性引物,并建立了纳金米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、特异性和灵敏度进行了测定,采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明本实验能扩增得到与实验设计相符的159bp(VA)的特异性条带;与副溶血弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌无交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度可达22cfu/反应体系,同条件下比普通PCR的灵敏度高10倍。经临床检测,从120份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出8份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。本试验方法的建立对于加强进出口水产品中VA的检验检疫具有十分重要的意义。
刘阳孔繁德彭小莉徐淑菲吴德峰林立
关键词：溶藻弧菌
多重PCR技术同时检测副溶血弧菌和溶藻弧菌方法的建立与初步应用
为建立多重PCR方法用于同时快速检测海产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌,本研究根据副溶血弧菌（VP）和溶藻弧菌（VA）的toxR基因序列应用Primer Premier 6.0设计了针对这2种细菌的2对特异性引物,建立了能快...
刘阳孔繁德徐淑菲吴德峰林立
关键词：副溶血弧菌溶藻弧菌多重PCR
文献传递
纳米金PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用被引量：13
2012年
纳米金PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,它能够明显提高普通PCR的灵敏度和特异性。根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计一对特异性引物,建立了纳米金PCR方法,并对该方法的最佳反应条件、循环数、特异性和灵敏度进行测定。采用2.0%琼脂糖电泳进行检测,结果表明能扩增得到与试验设计相符的208bp(VP)的特异性条带;与溶藻弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌、沙门氏菌、枸橼酸杆菌没有交叉反应;纯培养细菌检测灵敏度为3cfu/反应体系。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高10倍。经临床检测,从150份带鱼、鱿鱼和鱼粉中检出5份阳性样品,与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。该试验方法的建立对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。
刘阳孔繁德彭小莉徐淑菲吴德峰林方
关键词：副溶血弧菌
副溶血弧菌和溶藻弧菌双重PCR检测方法的建立与初步应用被引量：5
2012年
为建立同时快速检测海产品中的副溶血弧菌(VP)和溶藻弧菌(VA)的双重PCR方法,本研究根据VP和VA的toxR基因序列设计针对这两种细菌的两对特异性引物,建立能够快速同时检测这两种细菌的双重PCR方法,并对该反应体系的特异性和灵敏度进行检测。结果显示纯培养细菌VP和VA的检测灵敏度分别为2.32×103cfu/mL和2.56×103cfu/mL,临床病料检测灵敏度分别为2 cfu和3 cfu;与枸橼酸杆菌、沙门氏菌、美人鱼弧菌、霍乱弧菌、麦氏弧菌无交叉反应。研究表明本实验方法操作简便快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好,并且经济实惠,值得推广应用。
刘阳孔繁德徐淑菲吴德峰林立
关键词：副溶血弧菌溶藻弧菌双重PCR
副溶血弧菌检测技术的研究进展被引量：11
2012年
副溶血弧菌引发食物中毒的规模呈明显的上升趋势,目前已超过沙门氏菌食物中毒,跃居首位。因此需要从多方面加强检测,以防止该菌对食品造成的大面积污染,保证人的身体健康。为此本文全面介绍了副溶血弧菌的各种检测方法,包括:传统方法,免疫学方法,分子生物学技术,传感器技术等,为副溶血弧菌的检测提供理论依据。
刘阳孔繁德徐淑菲吴德峰林立
关键词：副溶血弧菌分子生物学技术食物中毒免疫学方法传感器技术沙门氏菌
免疫金层析技术快速检测副溶血弧菌方法的初步研究被引量：9
2012年
应用兔抗副溶血弧菌IgG-2包被硝酸纤维素膜检测线,山羊抗兔IgG包被对照线,胶体金标记兔抗副溶血弧菌IgG-1制成检测试纸条,建立了检测副溶血弧菌的免疫金层析试纸条法(IGCA)。结果显示,阳性者试纸条检测线和对照线均出现红色线,试验过程仅需5～15min即可判断结果,该法对副溶血弧菌的最低检测量为3.592×104 CFU/mL,与溶藻弧菌、霍乱弧菌、美人鱼弧菌、麦氏弧菌、弗氏枸橼酸杆菌和沙门氏菌等常见肠道菌不发生交叉反应。将试纸条4℃存放6个月,常温存放3个月,37℃存放1个月,检测结果无差异。结果表明,建立的试纸条检测方法操作简便快速、灵敏度高、特异性强和稳定性好,非常适于基层养殖部门应用。
孔繁德刘阳徐淑菲彭小莉吴德峰林立
关键词：副溶血弧菌胶体金免疫层析
荧光定量PCR技术检测副溶血弧菌方法的建立与初步应用
2013年
目的:建立副溶血弧菌SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。方法:根据副溶血弧菌(VP)的toxR基因序列,应用primer6.0设计了1对特异性引物,进行了最佳引物浓度的确定,建立了标准曲线和溶解曲线,对所建立方法进行了特异性、灵敏度和稳定性测试,并进行了临床样本检测。结果:副溶血弧菌SYBR Green I荧光定量PCR的最佳引物浓度为0.2 µmol/L,标准曲线循环阈值和模板浓度呈良好的线性关系,相关系数R2为0.996,扩增效率E接近100%,溶解曲线特异,最低检出量为2.14个拷贝,特异性和重复性较好。临床检测结果与常规细菌分离鉴定方法符合率100%。结论:建立了特异灵敏的副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法,对于加强进出口水产品中VP的检验检疫具有十分重要的意义。
孔繁德吴玉娟黄新新黄标敏彭小莉徐淑菲林立
关键词：副溶血弧菌荧光定量PCR
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