海南省自然科学基金(30321)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关作者：郑少江吴人亮郑少萍焦嫦亮郭峻莉更多>>
- 相关机构：华中科技大学海南医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。
- 郑少江黄凤迎郑少萍王伟吴人亮
- 关键词：肿瘤血管生成原核表达基因重组
- 小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1的构建及表达鉴定
- 2006年
- 目的构建小鼠FGFR-1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR-1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT-PCR技术,从胚肝中扩增出小鼠的FGFR-1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠杆菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠杆菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40kDa的蛋白质条带。结论成功构建小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1并在大肠杆菌中有效表达,纯化后获得具有活性的重组蛋白质。
- 郑少江郑少萍吴人亮焦嫦亮赵霞姜虹
- 关键词：基因重组原核表达
- 人乳头瘤病毒感染与P53及肺耐药蛋白表达在非小细胞肺癌中的关系及其临床意义被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染在非小细胞肺癌(non-small-celllungcancer,NSCLC)发生中的病因学意义及其与P53蛋白和肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)表达之间的相关性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)、免疫组化方法(IHC)分别检测76例NSCLC组织中HPVDNA及其E6、E7原癌蛋白,P53和LRP蛋白的表达情况。结果:NSCLC中HPVDNA及其E6、E7原癌蛋白的检出率分别为40.8%、43.4%,2种方法检测的符合率为78.9%;P53和LRP的阳性率分别为63.2%、59.2%,且HPV感染阳性组中P53蛋白阳性表达率(75.8%)显著高于阴性组(46.5%)(P<0.05);P53蛋白表达阳性组中LRP阳性表达率(68.8%)显著高于阴性组(42.9%)(P<0.05);而HPV感染阳性组与阴性组间LRP的表达无显著性差异(P>0.05)。HPV感染与高、中分化程度的NSCLC及吸烟有关;结论:HPV感染可能是NSCLC发生的另一重要病因学因素,且HPV感染可能导致P53基因突变,同时基因突变的P53可能促进肺癌耐药性的增加。
- 郑少江吴人亮郭峻莉焦嫦亮罗志飞
- 关键词：乳头状瘤病毒P53蛋白质P53聚合酶链反应
- 非小细胞肺癌中肺耐药蛋白、酸性谷胱甘肽-S-转移酶的协同表达及其临床意义被引量：7
- 2005年
- 目的 探讨肺耐药蛋白 (LRP) 和酸性谷胱甘肽- S- 转移酶 (GST-π) 在非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的协同表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化方法检测62例术前均未进行化疗的NSCLC组织中LRP、GST- π蛋白的表达情况。结果 在NSCLC中LRP、GST-.π蛋白表达的阳性率分别为75. 8% (47/62); 66. 1% (41/62)。LRP蛋白表达与肿瘤分化程度相关。GST -π蛋白表达与肿瘤组织类型、分化程度、有无淋巴结转移相关。LRP与 GST π阳性表达之间存在正相关关系。结论 LRP、GST -π在不同类型的NSCLC中均可表达, 但水平不同。
- 郑少江吴人亮郭峻莉郑少萍王志华焦嫦亮汪永平
- 关键词：LRPGST-Π肺耐药蛋白非小细胞肺癌谷胱甘肽-S-转移酶分化程度
- FGF受体信号转导及其临床应用研究进展被引量：3
- 2005年
- 成纤维细胞生长因子受体(FGFRs)是一类穿膜的酪氨酸激酶受体,均为单链的糖蛋白分子。由细胞外区、跨膜区和细胞内区组成。成纤维细胞生长因子(FGFs)的生物活性是通过与FGFRs结合来启动细胞内信号转导。受体的活化导致受体酪氨酸自磷酸化作用的产生。FGFs/FGFRs在不同组织中。通过复杂的信号传递路径对细胞的增殖、分化和移行进行调节。由于它们具有广泛的生物学功能,因此在临床应用上具有重要作用。
- 郑少江吴人亮谭光宏
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体信号转导生物学功能
