国家教育部博士点基金(20050285009)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：童建聂继华陈锐李建祥傅春玲更多>>
- 相关机构：苏州大学苏州大学附属第二医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氡染毒小鼠骨髓细胞差异表达cDNA文库的构建和初步鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的构建氡染毒小鼠骨髓细胞差异表达基因的cDNA文库。方法采用HD-3型多功能氡室对雄性BALB／c小鼠动态吸入染毒，建立实验动物模型。按照实验动物吸入氡及其子体的累积剂量分为实验组（105WLM）和对照组（室内本底浓度，1WLM）。取骨髓细胞提取总RNA，采用SMART和抑制性消减杂交技术，构建正、反向消减cDNA文库，消减cDNA片段插入pMD18-T载体转化大肠杆菌，以含差异表达cDNA片段的菌液为模板进行巢式PCR扩增。结果获得了完整无降解的总RNA，得到高效率的消减cDNA文库；克隆了244个有插入片段和长度在100～1100bp之间的单克隆。结论成功构建了氡暴露小鼠骨髓细胞差异表达的正、反向cDNA消减文库。
- 李建祥傅春玲陈锐聂继华周建伟童建
- 关键词：抑制性消减杂交CDNA消减文库
- 氡染毒大鼠气管-支气管上皮细胞的基因差异表达被引量：3
- 2008年
- 氡（Radon）及其子体的致癌效应已引起广泛的关注，被国际癌症研究机构列入室内重要的致癌物质。Meta分析结果提示，氡暴露使矿工发生肺癌的危险陛增高。本研究通过抑制性消减杂交（supprssion subtractive hybridization，SSH）方法，筛选氡染毒大鼠模型的气管．支气管上皮细胞差异表达基因，为探讨氡及其子体致肺癌的早期分子机制提供依据。
- 陈锐李建祥聂继华施敏骅胡华成童建
- 关键词：染毒大鼠氡暴露基因差异表达抑制性消减杂交致癌效应
- 氡染毒小鼠外周血细胞差异表达基因的筛选与鉴定
- 2009年
- 目的在建立氡染毒小鼠模型的基础上，筛选和鉴定氡染毒小鼠外周血细胞差异表达基因。方法采用HD-3型多功能氡室对BALB／c小鼠动态吸入染毒，建立实验动物模型。按照小鼠吸入氡及其子体的累积剂量分为实验组（累积剂量105WLM）和对照组（室内本底浓度，1WLM）。采用RNA转录物5’末端启动机制技术（SMART）和抑制性消减杂交技术（SSH）构建正、反向消减eDNA文库，选取含有插入eDNA片段的克隆进行反向Northern杂交筛选上调或下调的阳性克隆。克隆的测序结果进行同源性检索和生物信息学分析。结果在成功构建了消减cDNA文库基础上，挑取白斑390个，获得312个含有插入片段的单克隆，进行反向Northern杂交，分析基因的上调或下调水平。选取差异表达克隆41个进行测序及生物信息学分析，最终获得10条已知功能或有注释的差异基因片段和3条未知的表达序列标签（EST）。筛选出的差异表达基因涉及氧化损伤、细胞增殖和肿瘤发生等多方面的功能。结论氡染毒可引起一系列基因表达的上调或下调，利用SSH技术可以筛选到氡染毒的差异表达基因，为探讨氡损伤机制提供参考。
- 陈锐李建祥聂继华施敏骅胡华成童建
- 关键词：氡抑制消减杂交差异表达基因生物信息学
- 氡慢性染毒致大鼠癌前病变的发生及肺组织RAGE和S100A6蛋白的表达被引量：3
- 2009年
- 目的观察氡慢性染毒致大鼠肺组织的病理改变，以及晚期糖基化终产物受体（RAGE）和钙结合蛋白A6（A6，S100A6）蛋白的表达。方法Wistar雄性健康大鼠整体暴露于多功能生态氡室，染毒时间约27个月，染毒结束后观察健康对照组和染毒组大鼠肺组织的病理改变，同时提取大鼠肺组织总蛋白，检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、RAGE和S100A6的表达情况。结果在饲养及染毒过程中，健康对照组和染毒组大鼠各死亡2只，病理切片显示为心衰水肿表现，为自然死亡。存活大鼠病理切片显示肺组织呈充血水肿，炎性反应细胞浸润及肺气肿表现，其中1只大鼠出现肺泡上皮细胞的严重增生性改变，为癌前病变的一种形式。以β-actin为内参，肺组织蛋白表达检测显示，染毒组大鼠PCNA呈高表达（对照组0．0067±0．009，染氡组0．174±0．091），肺组织呈增生性改变，RAGE和S100A6蛋白在染毒组大鼠也呈现高表达（RAGE对照组0．0041±0．006，染氡组0．4372±0．291；S100A6对照组0．069±0．055，染氡组0．493±0．049），其高表达可能与肺组织的癌前病变有关。结论氡慢性染毒可致大鼠肺组织发生癌前病变，并且诱发RAGE和S100A6蛋白的高表达。
- 张素萍武彦文吴昭昭董亮聂继华童建
- 关键词：氡肺组织晚期糖基化终产物受体钙结合蛋白
- 氡染毒小鼠外周血细胞差异表达cDNA文库的构建和初步鉴定被引量：3
- 2007年
- 构建氡染毒小鼠外周血细胞差异表达基因的cDNA文库。采用HD-3型多功能氡室对雄性BALB/C小鼠动态吸入染毒,建立实验动物模型。按照实验动物吸入氡及其子体的累积剂量分为实验组(105WLM)和对照组(室内本底浓度,1WLM)。提取外周血细胞总RNA,采用SMART和抑制性消减杂交技术,构建正、反向消减cDNA文库,插入pMD18-T载体转化大肠杆菌,以含差异表达cDNA片段的菌液为模板进行巢式PCR扩增。获得了312个单克隆,成功构建了氡暴露小鼠外周血细胞差异表达的cDNA消减文库。
- 李建祥傅春玲陈锐聂继华童建
- 关键词：小鼠CDNA消减文库
- 氡致肺癌:生物学效应与防护被引量：8
- 2009年
- 氡是排第2位的肺癌致病因子。职业流行病学调查证实,高浓度的氡暴露可增加肺癌发生的危险度;动物实验和体外研究表明,氡对肺支气管和骨髓的效应是多方面的,多数毒性作用有剂量-效应关系;氡染毒后,某些基因和蛋白有差异性表达。降氡、戒烟和药物都可减少肺癌的相对危险度。
- 童建
- 关键词：生物学效应肺癌氡
