国家重点实验室开放基金(SKLVBP201011)
- 作品数:2 被引量:15H指数:2
- 相关作者:童光志李登云安同庆田志军彭金美更多>>
- 相关机构:中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B表位诱导中和抗体能力的研究被引量:13
- 2011年
- 为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-1a株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清。此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的健康仔猪以HP-PRRSV HuN4疫苗毒株(HuN4-F112)进行基础免疫,然后用强毒株(HuN4-F5)进行多次接种,制备猪高免血清。间接免疫荧光检测(IFA)结果显示,两份多肽抗血清均能与PRRSV经典株和变异株发生特异性反应,IFA抗体效价无差异,表明两份血清没有显著差异。病毒中和试验结果表明,两份多肽抗血清均不具有中和PRRSV活性。间接ELISA和病毒中和试验结果表明,猪高免血清中针对B表位肽的ELISA抗体水平与血清抗PRRSV中和抗体之间没有正相关关系,而且B表位肽不能抑制中和抗体。以上结果表明HP-PRRSV B表位不能诱导产生中和抗体。
- 冷超粮安同庆陈家锃宫大庆李登云杨永倩彭金美张祎郭娟娟吴江童光志田志军
- 关键词:GP5中和抗体
- 猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:2
- 2010年
- 根据猪程序性死亡因子PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法。结果表明,建立的方法在1×10^2-1×10^8copies/μL模板范围内具有良好的线性关系(r^2〉0.99),扩增效率均高于96%,可检测至少100 copies的阳性标准品。利用该方法对猪外周血单核细胞中这3个基因的表达情况进行了检测,结果也表明该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可应用于临床样品的检测。
- 彭金美李登云田志军安同庆刘恒贵周艳君童光志
- 关键词:实时荧光定量聚合酶链反应