哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2008RFQXN018)
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 相关作者：杨秀芹翟春媛李海涛李金铃张冬杰更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院吉林大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金黑龙江省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 环颈雉和花尾榛鸡MC4R基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2010年
- MC4R是由下丘脑腹内侧核分泌的神经受体,参与调节动物的体重、采食量和能量稳态。根据MC4R在物种间高度保守和只含有一个外显子的特点,参考鸡MC4R序列设计引物,利用PCR法克隆了环颈雉和花尾榛鸡MC4R的全长编码区。结果表明:环颈雉和花尾榛鸡MC4R都由331个氨基酸残基组成,二者相比只有2个氨基酸的差异,都含有7个跨膜结构,具有完全相同的结构功能域,都是疏水性蛋白;同源性分析显示MC4R高度保守,鸟类间、哺乳动物间氨基酸水平的同源性都在90%以上。表明MC4R在进化过程中承受着较大的选择压力,在动物的生长发育过程中具有极其重要的作用。
- 杨秀芹张冬杰刘娣
- 关键词：环颈雉MC4R克隆花尾榛鸡
- 猪TLR4基因的变异位点分析被引量：6
- 2011年
- Toll样受体4(TLR4)主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖,其基因变异可能改变宿主对脂多糖(LPS)的免疫反应。研究利用克隆、测序的方法在TLR4基因的外显子3寻找变异位点,并利用PCR-SSCP方法对寻找到的部分错义突变进行群体遗传学分析,确定不同基因型在猪种间的分布规律。结果表明:共寻找到11个点突变,其中8个是错义突变,分别导致蛋白质多肽链141、168、204、321、343、516、535、567位氨基酸发生了L/Q、P/L、L/H、R/H、Q/K、F/S、L/F、L/P替代;对其中3个错义突变位点(611 bp、962 bp、1 027 bp)的群体遗传学分析表明,在各多态位点,基因型的分布在野猪、北京黑猪、民猪、杜洛克、长白猪和大白猪6个中外猪种间存在极显著差异(P<0.01)。
- 翟春媛杨秀芹李海涛李金铃刘娣
- 关键词：PCR-SSCP
- 猪呼吸道上皮细胞的体外原代培养研究
- 2010年
- 为探索猪呼吸道上皮细胞体外的原代培养,对胶原酶Ⅳ+胰酶消化法、胰酶消化法、胶原酶Ⅳ和胰酶消化结合组织块培养法以及组织块培养法等4种分离细胞的方法进行了比较,同时比较了不同浓度胎牛血清的培养基所培养细胞的纯度及成活率,采用差速贴壁法纯化细胞并对所得的上皮细胞进行冻存复苏研究。结果表明:组织块培养法培养获得的细胞数量和纯度极显著高于胰酶消化法(P<0.01),胶原酶Ⅳ+胰酶消化法获得的细胞成活率显著高于胰酶消化法;含有5%血清的培养基培养的细胞成活率及纯度均高于用10%血清培养(P<0.01),冻存1个月后的细胞复苏率为85%。
- 翟春媛杨秀芹李海涛刘娣
- 关键词：呼吸道上皮细胞细胞培养冷冻保存
- 猪TLR4基因可变剪接体的鉴定被引量：6
- 2011年
- 为合理、有效地利用民猪资源进行抗病育种,本研究利用重叠延伸RT-PCR结合巢式PCR法扩增民猪TLR4基因,寻找可变剪接体;利用竞争性RT-PCR方法研究各可变剪接体的组织表达情况。获得了猪TLR4基因3个可变剪接体(其中2个是未见报道的),并且鉴定出一类特殊的剪接模式——外显子内部的部分片段被单独剪除,该类型在动物中尚属首次发现;组织表达分析表明3个可变剪接体普遍表达。TLR4基因存在着复杂的剪接机制,也暗示着其功能的复杂性。
- 杨秀芹翟春媛李海涛刘娣
- 关键词：民猪可变剪接
- 野猪Toll样受体基因的结构和功能鉴定被引量：1
- 2011年
- Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs）是介导天然免疫和获得性免疫的病原模式识别受体（Pattern recognition receptor,PRRs）,能识别表达在病原微生物上高度保守的病原相关分子模式（Pathogen associated molecular patterns,PAMPs）,并通过一定的信号转导途径引起核内相关基因的表达,启动和调节机体的免疫反应。
- 杨秀芹李海涛徐扬翟春媛马建章刘娣
- 关键词：野猪克隆
- 野猪CAPN10基因两个剪接变异体的克隆、序列分析和表达被引量：2
- 2009年
- 为了进一步研究CAPN10在肌肉生长和肉质中的作用,本研究采用RT-PCR和RACE相结合的方法克隆野猪CAPN10 cDNA并进行序列分析,采用相对定量RT-PCR和竞争性RT-PCR方法研究该基因的表达情况。获得了野猪CAPN10的2个剪接变异体,二者前604个氨基酸完全相同,在多肽链相同位置处都存在着钙蛋白酶家族的特征性结构域和催化活性中心;相对定量RT-PCR分析表明,CAPN10普遍表达于所检测的野猪12种组织内,在6、9、12月龄的肌肉组织中大白猪的表达量显著高于同一发育时期的野家杂交猪(P<0.05);竞争性RT-PCR分析表明,2个变异体都表达于所检测的野猪9种组织内。结果表明CAPN10的表达量与肌肉的嫩度可能具有一定的相关性。
- 杨秀芹关庆芝于浩郭丽娟刘慧刘娣
- 关键词：野猪克隆
- 猪TLR4基因的变异位点分析
- R4主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖(LPS)，当细菌入侵宿主细胞后，其表面的脂多糖激活TLR4介导的信号转导通路，诱导多种细胞因子的表达，激活免疫反应，清除病原体。TLR4基因突变可影响其功能，因此，TLR4基因的多态...
- 翟春媛杨秀芹李海涛李金铃刘娣
- 关键词：基因遗传变异基因多态性细胞因子信号转导
