国家质检总局科技计划项目(2009IK322)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：魏梅生李桂芬吴兴泉曹成张永江更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院河南工业大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 双重胶体金层析法快速检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒RT-PCR扩增子被引量：2
- 2011年
- 番茄环斑病毒和烟草环斑病毒是中国进境检疫性有害生物,此研究建立了单个和双重胶体金层析快速检测方法,在15min即可获得对双标记PCR产物的检测结果。单个胶体金层析是在一张层析膜上点上荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,经生物素-荧光素(或生物素-地高辛)双标记的RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到。双重胶体金层析是在一张层析膜上分别点上荧光素和地高辛的单克隆抗体作为T1和T2检测点,经生物素-荧光素和生物素-地高辛双标记的两种病毒的RT-PCR扩增产物可分别在T1和T2点上被检测到。
- 曹成魏梅生张永江李桂芬吴兴泉
- 关键词：番茄环斑病毒烟草环斑病毒RT-PCR胶体金
- 南芥菜花叶病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析和酶联检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 南芥菜花叶病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为建立快速灵敏的检疫检测方法,本研究用生物素标记一条引物,用荧光素(或地高辛)标记另一条引物,经RT-PCR扩增产生双标记的扩增产物,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测和ELISA检测方法。胶体金层析检测方法在15min即可获得检测结果,ELISA方法需20h,后者检测的灵敏度可比前者分别提高100倍和5000倍。所建立的2种方法都免去了普通PCR检测的溴化乙锭染色和电泳的过程。
- 曹成魏梅生张永江李桂芬吴兴泉
- 关键词：南芥菜花叶病毒胶体金试纸条核酸检测
- 菜豆荚斑驳病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析检测方法的建立
- 2010年
- 菜豆荚斑驳病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为了能在现场快速检测出该病毒,将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金层析方法快速简便、直观的优点结合起来,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测方法。该方法是用生物素标记上一个引物,用荧光素（或地高辛）标记上另一个引物,通过PCR扩增产生双标记的扩增产物。将兔抗生物素多克隆抗体与20-30 nm大小的胶体金颗粒结合上并固定在释放垫上,同时在硝酸纤维素层析膜上点上抗荧光素（或地高辛）的单克隆抗体作为T检测点,点上羊抗兔多克隆抗体作为C质控点。这种RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到,同时C点也要显色。用所建立方法在15 min内可检测出菜豆荚斑驳病毒的RT-PCR扩增产物,免去了溴化乙锭染色和电泳的过程。
- 曹成魏梅生吴兴泉张永江李桂芬
- 关键词：胶体金试纸条菜豆荚斑驳病毒RT-PCR核酸检测
