贵州省高层次人才科研条件特助经费项目(TZJF-2011-32)
- 作品数：19 被引量：36H指数：4
- 相关作者：赵逵朱蓉陈小燕李伶俐廖永美更多>>
- 相关机构：遵义医学院附属医院遵义医学院贵阳市肺科医院更多>>
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- 塞来昔布和埃罗替尼对结肠癌细胞HT-29的协同抑制作用
- 2015年
- 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂及环氧化酶-2(COX-2)抑制剂埃罗替尼、塞来昔布及二者联合用药对结肠癌细胞HT-29增殖的抑制作用及其机制。方法将HT-29细胞分为对照组(完全培养基)、塞来昔布组(220μmol/L)、埃罗替尼组(50μmol/L)及联合用药组(塞来昔布220μmol/L、埃罗替尼50μmol/L)四组,作相应处理后均在适宜条件下培养;48 h后采用MTT法观察细胞抑制率,Real-time PCR法及Western blotting法检测EGFR、COX-2 m RNA及蛋白表达情况,ELISA法检测前列腺素E2(PGE2)含量。结果 48 h后塞来昔布组和埃罗替尼组对HT-29细胞抑制率分别为(56.6±4.3)%和(56.9±3.9)%,联合用药组抑制率为(86.1±7.1)%,与单独用药组比较,联合用药组对HT-29细胞增殖的抑制作用更明显,差异有统计学意义(P<0.05或0.01);与对照组比较,埃罗替尼组、塞来昔布组均能降低HT-29细胞中COX-2及EGFR的m RNA及蛋白表达水平,也可降低HT-29细胞PGE2的分泌,且联合用药组效果较单一用药组更显著,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论塞来昔布和埃罗替尼均能抑制结肠肿瘤的细胞生长,可同时阻断EGFR、COX-2信号通路,二者联合应用具有协同作用,其机制可能是抑制EGFR、COX-2的表达及PGE2的分泌。
- 陈曦付晓霏赵逵
- 关键词：前列腺素内过氧化物合酶类抗肿瘤药细胞抑制剂
- 阿司匹林对人结肠癌HT-29细胞肠分化标志物表达的影响被引量：5
- 2017年
- 背景与目的:非甾体抗炎药阿司匹林临床防治结肠癌确切有效,近年来有研究认为其防治结肠癌最终通过对结肠癌干细胞调控而实现。当结肠癌干细胞分化成熟时,结肠癌将不再进展、甚至消退。本研究旨在探讨非甾体抗炎药阿司匹林对人结肠癌HT-29细胞株分化的影响。方法:采用活细胞计数试剂盒CCK-8检测不同浓度阿司匹林抑制HT-29细胞增殖的作用,得出IC50;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测阿司匹林IC50干预24、48和72 h,肠分化标志物黏蛋白2(mucin 2,MUC2)、三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)、蔗糖酶-异麦芽糖酶(sucroseisomaltase)和溶菌酶(lysozyme)的m RNA表达情况;采用免疫细胞化学法检测MUC2蛋白在细胞中的表达情况;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测sucrase-isomaltase及lysozyme的蛋白表达情况。结果:阿司匹林能明显抑制HT-29细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性;RTFQ-PCR和Western blot结果显示,阿司匹林干预HT-29细胞48、72 h,与对照组比较,肠杯状细胞标志物MUC2、TFF3的m RNA表达均上调(P<0.05),肠吸收细胞标志物sucrase-isomaltase和潘氏细胞标志物lysozyme的m RNA及蛋白表达均下调(P<0.05);免疫细胞化学实验结果显示,阿司匹林干预48 h,MUC2蛋白表达较对照组上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:非甾体抗炎药阿司匹林能影响人结肠癌HT-29细胞肠分化标志物的表达,且可能导致其向杯状细胞表型分化。
- 朱蓉李伶俐李仕宇陈小燕赵逵
- 关键词：阿司匹林结肠癌三叶因子3
- 5-脂氧合酶抑制剂MK886对结肠癌HT-29细胞干性的影响被引量：3
- 2017年
- 目的目前有关5-脂氧合酶(5-LOX)与结肠癌干细胞的关系尚无明确结论。文中旨在探讨5-LOX抑制剂MK886对人结肠癌HT-29细胞株干性的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度MK886(12.5、25、50、75、100、200μmol/L)对体外培养的HT-29细胞生长增殖的抑制情况,并计算出半数抑制浓度(IC50);采用克隆形成和干细胞球形成实验观察MK886 IC50对细胞克隆形成和球形成能力的影响;采用实时定量PCR(real-time PCR)法检测MK886 IC50作用HT-29细胞24、48 h后干性标记物(CD133、Lgr5、Oct4和Ascl2)mRNA的表达变化;采用Western blot法检测MK886 IC50作用24、48 h及72 h后上述标记物蛋白质的表达情况。结果与对照组24、48 h细胞增殖抑制率比较(0%、0%),25μmol/L药物组[(20.46±1.14)%、(34.97±6.02)%]明显升高,50、75、100、200μmol/L药物组亦明显升高(P<0.05)。MK886组克隆形成能力、细胞球数量明显低于对照组[(10.60±1.71)%vs(44.67±3.21)%、(6.00±1.60)个vs(19.07±2.89)个],差异有统计学意义(P<0.05)。MK886组干预HT-29细胞后24、48 h CD133mRNA相对表达量[(0.72±0.10)、(0.39±0.07)]与0 h(1.66±0.33)比较显著降低,Lgr5、Oct4、Ascl2 mRNA亦显著降低(P<0.05)。结论 5-LOX抑制剂MK886可抑制HT-29细胞的增殖、克隆形成和球形成能力,可能与其下调干性标记物的表达水平,从而抑制结肠癌干细胞"干性"相关。
- 朱蓉李仕宇李伶俐鲁生念赵逵
- 关键词：结肠癌5-脂氧合酶CD133LGR5
- 丙谷胺、阿司匹林对人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨丙谷胺和阿司匹林对人结肠癌细胞株HT-29增殖的协同抑制作用及可能的机制。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和非甾体类抗炎药阿司匹林分别及联合应用对HT-29细胞增殖的影响;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测丙谷胺和阿司匹林分别干预以及联合用药48h后COX-2和15-PGDH mRNA和蛋白质的表达情况。结果丙谷胺和阿司匹林分别呈时间和剂量依赖性地抑制HT-29细胞的增殖,且二者具有协同作用;丙谷胺单一用药时,COX-2mRNA和蛋白质表达下调,15-PGDH mRNA和蛋白质表达上调(P<0.05);阿司匹林单一用药时,COX-2、15-PGDH mRNA和蛋白质的表达均无明显变化;两药联合应用时,COX-2 mRNA和蛋白质的表达显著下调,15-PGDH mRNA和蛋白质的表达显著上调,与对照组以及各单一用药组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论丙谷胺、阿司匹林联合应用协同抑制HT-29细胞增殖,此作用可能通过下调COX-2表达,上调15-PGDH表达这一机制来实现。
- 朱蓉赵逵方兴国付晓菲狄连君陈小燕李优锋
- 关键词：丙谷胺阿司匹林环氧合酶-215-羟基前列腺素脱氢酶结肠癌细胞株
- 阿司匹林对结肠癌细胞肿瘤干性标记物CD44蛋白表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究人结肠癌细胞系SW-480、HT-29中肿瘤干细胞干性标记物CD44蛋白受阿司匹林不同药物浓度的影响变化,从而探讨阿司匹林是如何预防结直肠癌的发生。方法采用激光扫描共聚焦显微技术:免疫荧光双标染色法检测结肠癌细胞系SW-480、HT-29中CD44的表达;用Western blotting检测不同浓度阿司匹林(0、2.5、5.0、10.0 mmol/L,即分别为空白对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组)作用下,CD44在COX-2阴性表达的SW-480细胞及COX-2高表达的HT-29细胞表达影响。结果 SW-480、HT-29中存在CD44阳性细胞,2种细胞表达的CD44荧光值比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blotting结果显示阿司匹林能抑制结肠癌细胞系SW-480、HT-29中CD44的表达,且具有明显的量-效关系(P<0.05),2种细胞组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论结肠癌细胞系SW-480、HT-29中存在CD44阳性细胞,阿司匹林能抑制肿瘤干细胞干性标记物CD44的表达,其抑制可能是通过COX-2及非COX-2途径,该抑制作用可能是阿司匹林能预防结肠癌的原因之一。
- 鲁生念廖永美赵逵
- 关键词：阿司匹林结肠肿瘤肿瘤干细胞CD44蛋白
- Ascl2与结肠癌发生发展的关系研究进展
- 2015年
- Ascl2是一个碱性/螺旋—环—螺旋转录因子,是Wnt信号通路的靶分子,仅表达于胎盘及小肠、大肠隐窝基底的Lgr5阳性的肠隐窝基底柱细胞(CBC细胞)。近来研究证实Ascl2是CBC成体肠干细胞的一个重要标记物,在维持结肠癌干/前体细胞的干细胞性方面发挥重要作用。本文对Ascl2与结肠癌的关系进行了综述。
- 陈曦朱蓉赵逵
- 关键词：WNT信号通路结肠癌
- 阿司匹林对人结肠癌细胞中肿瘤干细胞标记物CD44表达的影响被引量：4
- 2017年
- 目的:观察阿司匹林对人结肠癌肿瘤干细胞标志物CD44的影响,以探讨其对结肠癌干细胞的作用。方法:Western blot检测不同浓度阿司匹林作用后CD44在人结肠癌细胞株HT-29和SW480中的表达情况。结果:Western blot结果显示肿瘤干细胞标志物CD44在人结肠癌细胞株HT-29和SW480中均有表达,阿司匹林能降低HT-29和SW480中CD44蛋白的表达,并具有良好的量-效关系(P<0.05);两种细胞中CD44蛋白的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:阿司匹林能降低结肠癌细胞株HT-29和SW480中CD44的表达,并对结肠癌肿瘤干细胞有抑制作用。
- 陈小燕吴应强朱蓉廖永美赵逵
- 关键词：阿司匹林肿瘤干细胞标志物HT-29SW480
- 以尿崩症为首发表现的泛发性朗格汉斯细胞组织细胞增多症一例并文献复习被引量：1
- 2016年
- 朗格汉斯细胞组织细胞增多症(Langerhans cell histocytosis,LCH)是一组原因不明且十分罕见的疾病。该病主要以朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)异常增生为病理特点[1]。LCH首发表现为皮肤病变,典型表现为骨质溶解,还可累及肝、脾、骨髓等其他器官。缺乏典型的临床表现,早期诊断困难,易导致误诊误治。近来我院发现1例以尿崩症为首发表现的泛发性LCH,为提高该病的认识,
- 邱思芳朱蓉赵逵
- 关键词：朗格汉斯细胞组织细胞增多症尿崩症泛发性
- 脾上皮样血管内皮瘤一例并文献复习被引量：4
- 2017年
- 目的观察脾上皮样血管内皮瘤(epithelioid hemangioendotheliom,EHE)的临床特点。方法回顾性分析我院收治的脾EHE 1例的临床资料。结果本例因腹痛25 d,加重1 d入院,予对症治疗后好转出院。2周后腹痛复发,查脾脏彩色多普勒超声示:脾脏局部回声不均匀,包膜连续性不完整,脾脏上缘与膈肌处见一10.6 cm×1.8 cm大小的不均质低回声。脾脏CT示:脾脏前上部见稍低密度影,内见小片状稍高密度影,考虑脾血管瘤。行脾脏切除术,术后病理报告:脾脏大小为12 cm×7.5 cm×2 cm,表面破裂出血,切面呈暗褐色,质中;免疫组织化学染色示:CD34、CD3、Vimentin及FVⅢ均(+),ki-6720%(+),CK、D2-40及SMA均(-)。诊断为脾EHE,术后予抗感染、抑酸、抗血小板聚集等治疗好转出院。出院2个月后,患者因目黄、尿黄及皮肤巩膜重度黄染再次入院,予对症治疗后症状未见好转,目前仍在随访中。结论脾EHE临床少见,应尽快完善相关检查,以早诊断、早治疗,减少误诊误治。
- 邱思芳李伶俐朱蓉赵逵
- 关键词：脾肿瘤血管瘤
- miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞“干性”维持中的作用
- 2017年
- 目的探讨miRNA-302b在结肠癌HT-29细胞"干性"维持中的作用及可能机制。方法体外培养人结肠癌细胞株HT-29,转染miRNA-302b模拟物(miRNA-302b mimics),同时以未转染组(control)和阴性模拟物转染组(negative control-mimics,NC-mimics)作为对照,采用实时定量反转录聚合酶链反应法(real-time PCR)检测HT-29细胞结肠癌"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2mRNA的表达情况;采用蛋白印迹法(Western blot)检测以上"干性"标志蛋白表达的变化;采用克隆形成实验及干细胞成球实验分别观察HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力的变化。结果 Realtime PCR结果示,miR-302b mimics转染HT-29细胞48 h,"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2 mRNA表达一致性上调(P<0.05);Western blot结果示Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2蛋白表达也上调(P<0.05)。克隆形成实验及干细胞成球实验结果示,miR-302b mimics转染后HT-29细胞克隆形成和细胞球形成能力增强,与control组和NC-mimics组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-302b可通过上调"干性"标志物Ascl2、Lgr5、Oct4和Sox2的表达促进HT-29细胞的克隆形成和细胞球形成能力,从而在结肠癌"干性"维持中发挥重要作用。
- 朱蓉鲁生念李伶俐俆永素赵逵
- 关键词：结肠癌干性LGR5
