国家重点基础研究发展计划(2012CB917200)
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 相关作者：滕脉坤尹长城薛亮范晓娇许婷婷更多>>
- 相关机构：中国科学技术大学北京大学安徽大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组人源SNX7蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及磷脂结合特异性分析
- 2014年
- Sorting nexins(SNXs)是一类含有SNX-PX结构域,并在细胞内吞和内体分选运输过程中发挥重要调节作用的蛋白。SNX7是SNXs家族中的一员,含有PX结构域和BAR结构域,属于SNX-PX-BAR亚家族。斑马鱼实验表明,SNX7是在肝脏中大量表达的抗凋亡蛋白,并在胚胎肝脏的发育中发挥关键作用。为了从蛋白水平对SNX7进行研究,首先将编码人源PX-BARSNX7(SNX7的一个片段,包含PX和BAR结构域)的cDNA片段插入到原核表达载体p28a中,再将重组质粒转化到大肠杆菌Rosseta 2(DE3)中诱导表达,并用亲和层析、离子交换和分子筛层析对PX-BARSNX7进行了纯化。Western blotting结果表明,亲和层析、离子交换和分子筛层析纯化后获得了高纯度的PX-BARSNX7蛋白。动态光散射实验显示PX-BARSNX7蛋白均一性良好。磷脂结合实验表明,PX-BARSNX7具有较为广泛的磷脂酰肌醇结合能力,能够与PtdIns(5)P、PtdIns(4,5)P2和PtdIns(3,4,5)P3结合。
- 冯站许婷婷徐进新
- 关键词：SORTING均一性表达纯化
- 蛇毒蛋白质结构和功能研究的平台建设
- 2016年
- 蛇毒作为重要的功能生物大分子资源库一直以来受到学术界及产业界的高度关注,很多重要且高效的药物及抑制剂来源于蛇毒组分,但由于组成复杂、丰度差异大,蛇毒中与特定生理功能相关的单一组分的研究工作进展一直非常缓慢。本研究组建立的集组分分离、生理功能快速筛查、结构与生化性质解析、细胞功能和电生理机制测定为一体的蛇毒蛋白质结构和功能研究平台,大大加速了这一研究过程并取得了丰硕研究成果。本文在简要介绍该平台技术组成的同时,扼要综述了近几年依托该平台完成的研究工作,希望能为学术界及产业界同行提供有益参考。
- 范晓娇李旭滕脉坤
- 关键词：蛇毒结构与功能关系
- 线粒体–内质网结构偶联的研究进展被引量：8
- 2013年
- 线粒体–内质网结构偶联,是指线粒体外膜与内质网膜之间形成的紧密物理连接。通过"募集"数十种蛋白质(mitofusion2、IP3R、grp75、PACS-2等)构成细胞器间的偶联"平台",将线粒体和内质网功能联系起来。其中,富集磷脂合成酶与磷脂代谢联系密切;形成高钙离子微区,利于细胞器间Ca2+转运,影响钙信号通路,从而决定细胞命运;调控线粒体形态,尤其是线粒体解离过程;此外,线粒体–内质网结构偶联异常还与细胞凋亡、疾病等有关。
- 薛亮尹长城
- 关键词：线粒体内质网钙信号磷脂代谢
