甘肃省科技支撑计划(1011NKCA048)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王磊李建喜张景艳杨志强张凯更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
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- 喹乙醇检测单抗制备中细胞融合条件的优化
- 2013年
- 为了优化抗喹乙醇单克隆抗体制备中聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合的最适条件,试验采用流式细胞仪确定SP2/0细胞的对数生长期,以融合率和阳性率为评价指标,分析血清加入量、500 mL/LPEG-1000溶液方法及反应时间和次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶脱氧核苷(HAT)加入时间对SP2/0细胞与脾细胞融合效果的影响。结果表明:150,200 mL/L胎牛血清融合率分别为86.5%、88.5%;生理盐水和无血清DMEM配制的500 mL/L PEG-1000融合率和阳性率分别为61.4%、3.1%,30.2%、1.0%;PEG-1000反应1.75,3.00 min融合率和阳性率分别为61.4%、3.1%,74.5%、6.3%;融合后培养0,24 h加入HAT,结果融合率和阳性率分别为95.8%、17.7%,94.3%、26.0%。说明150 mL/L胎牛血清、500 mL/L PEG-1000生理盐水、反应3.00 min、培养24 h后加入HAT时,细胞融合率和阳性率较高,是抗喹乙醇单克隆抗体制备中PEG诱导细胞融合的最适条件。
- 王磊李建喜张景艳王学智杨志强张凯孟嘉仁
- 关键词：喹乙醇单克隆抗体细胞融合聚乙二醇
- 全抗原MQCA-BSA耦联比HPLC测定方法的建立
- 2012年
- 为了建立一种准确、可靠的测定人工抗原耦联比的方法,试验应用高效液相色谱(HPLC)法采用Waters 2695分离系统、2489紫外检测系统,流动相为甲醇、水之比为60∶40,柱温为30℃,流速为1.00 mL/min,检测波长为320 nm,测定全抗原合成中游离3-甲基喹啉-2-羧酸(MQCA)的含量。结果表明:游离MQCA的线性范围为0.2～128.0μg/mL,线性方程为A=17 100 C+16 667(R2=0.999 5)。说明本方法准确、可靠,适用于人工抗原偶联比的测定。
- 张景艳杨志强李建喜王学智张凯孟家仁王磊
- 二喹噁啉羟酸全抗原偶联比HPLC测定方法的建立
- 2012年
- 为建立一种准确、可靠的测定人工抗原偶联比方法,本试验应用高效液相色谱法方法测定全抗原二喹噁啉羟酸—牛血清白蛋白(QCA-BSA)合成中游离二喹噁啉羟酸的含量。采用Waters 2695分离系统、2489紫外检测系统;流动相:甲醇:水(60:40);柱温:30℃;流速:1 mL/min;检测波长320 nm。试验结果表明,游离二喹噁啉羟酸的线性范围为0.2～128μg/mL,线性方程为y=17526x+4648,R2=1,RSD为0.28%,全抗原QCA-BSAⅠ、Ⅱ、Ⅲ的偶联比分别为1.76:1、28.60:1、65.63:1。建立的方法准确、可靠,适用于喹噁啉类人工抗原偶联比的测定。
- 张景艳杨志强李建喜张凯王磊王学智孟嘉仁
- 关键词：高效液相色谱法
- 海藻糖生物特性及其在ELISA技术研发中的应用被引量：1
- 2012年
- 海藻糖属非还原性双糖,在生物体内作为一种贮藏性糖类,可提供能量来源,同时它也是一种重要的应激代谢产物,对应激状态具有高度抗性。外源性海藻糖对细胞、抗体等生物活性物质同样具有非特异性生物保护作用。文章综述了海藻糖的能量储备、抗应激、细胞稳定剂等生物学特性,以及对细胞、抗体和ELISA中包板抗原或抗体的保护作用,并对其在ELISA技术改善中的应用前景做了推测与展望。
- 王磊崔东安张景艳李建喜
- 关键词：海藻糖生物学特性ELISA
- 喹乙醇单克隆抗体的制备
- 【目的】喹乙醇(Olaquindox,OLA)常被用于饲料添加剂,但过量或不规范使用有潜在的致畸和致突变性。欧盟、美国等禁止其用于饲料添加剂,我国规定只能添加于体重低于35 kg的猪饲料中。本研究旨在制备一种效价高、特异...
- 王磊李建喜张景艳杨志强王学智张凯孟嘉仁
- 关键词：喹乙醇单克隆抗体
- 文献传递
- 饲料中喹乙醇ELISA检测试剂盒的研制及性能分析被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在研制快速检测饲料中喹乙醇的ELISA试剂盒(OLA-Kit)。作者用喹乙醇单克隆抗体(OLAmAb)建立间接竞争ELISA方法,组装OLA-Kit,并对试剂盒的性能进行评估。结果表明:OLA-Kit的标准曲线呈典型的反S型,相关系数R2=0.976 7,线性范围为1～243μg·L-1,半数抑制浓度(IC50)为(14.29±3.75)μg·L-1,检测限为0.79μg·L-1,定量限为4.0μg·L-1,临界值(猪饲料)为83.37μg·g-1,基质对该试剂盒的检测结果影响不大;猪、鸡、鱼饲料的不同浓度添加回收率均大于74.40%,平均批内和批间变异系数均小于15%;试剂盒与喹胺醇的交叉反应率(CR%)为17.93%,与MQCA、QCA及其他喹喔啉类药物几乎无反应性,可在2～8℃保存6个月以上;OLA-Kit与HPLC法测定猪饲料中喹乙醇添加回收率没有显著差异(P≥0.05)。本研究成功研制出敏感、特异、准确的喹乙醇ELISA检测试剂盒,可用于饲料中该药物的快速检测和批量筛查。
- 张景艳王磊李建喜张宏张凯杨志强王学智秦哲孟嘉仁
- 关键词：喹乙醇单克隆抗体竞争ELISA饲料
