国家自然科学基金(81272418)
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
- 相关作者：任宏刘大鹏魏辉杜宁孙欣更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院陕西中医药大学附属医院邹城市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-101通过抑制DNA甲基转移酶3a抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移被引量：13
- 2016年
- 目的研究miR-101对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-101和DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在乳腺癌组织和相对应的正常乳腺组织,正常乳腺细胞以及多种乳腺癌细胞系中的表达水平,应用慢病毒介导感染的方法分别将miR-101序列及shRNA-DNMT3a转至MDAMB-231人乳腺癌细胞,通过Western blot法检测DNMT3a以及上皮钙黏素(E-cadherin)的表达,分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。通过MTT法检测乳腺癌细胞的增殖能力,划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力。结果miR-101在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-361、HCC70乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中表达低于正常乳腺组织及MCF-10A乳腺细胞系,而DNMT3a表达则升高。Western blot实验结果显示过表达miR-101的MDA-MB-231细胞中,DNMT3a的表达明显下降,而E-cadherin的表达升高;应用shRNA-DNMT3a抑制DNMT3a表达后,E-cadherin的表达也明显升高,证实miR-101可能通过抑制DNMT3a而发挥作用。体外实验显示过表达miR-101可明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移能力。结论miR-101抑制乳腺癌细胞增殖和迁移能力可能是通过抑制DNMT3a进而恢复E-cadherin表达来实现。
- 刘健庞亚梅王黄震李艳波孙欣徐菲任宏刘大鹏
- 关键词：乳腺癌上皮钙黏素增殖迁移
- p53抑制干细胞的自我更新能力而增敏奥沙利铂诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制被引量：1
- 2016年
- 目的:研究p53通过增加肿瘤干细胞不等向分裂的比例而增敏奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制,探索影响肺癌化疗效果的因素。方法:用Nutlin-3(N-3)调控肺癌细胞野生型p53的表达,研究p53对L-OHP诱导细胞凋亡及对肺癌干细胞不同分裂模式的影响;使用Akt激活剂及shRNA-GSK3β调控表达的肺癌细胞系,研究p53通过Akt调控奥沙利铂诱导的肺癌细胞凋亡,并抑制肺癌干细胞自我更新能力。在肺癌标本中检测GSK3β与磷酸化Akt1的表达及与预后的关系。结果:Nutlin-3上调了A549及H460细胞中野生型p53的表达,有效抑制了细胞增殖,增强L-OHP诱导细胞凋亡效果。Nutlin-3抑制磷酸化Akt1,促进肺癌干细胞不等向分裂,进而抑制肿瘤干细胞的比例,增敏L-OHP诱导肺癌细胞凋亡。Akt1磷酸化活性在p53介导的下游GSK3β表达增加的调控中起关键作用。50nmol/L的L-OHP通过抑制Akt1活性促进凋亡,10μmol/L的Nutlin-3对L-OHP诱导的肺癌细胞凋亡有协同作用,是通过共同调控Akt1/GSK3β通路的活性实现,Akt1的激活与GSK3β的抑制均显著地抵消了p53对L-OHP诱导的肺癌干细胞比例降低。结论:p53通过抑制磷酸化Akt1的水平调控GSK3β表达,促肺癌干细胞不均等分裂,增敏L-OHP诱导凋亡。肺癌中GSK3β的高表达与磷酸化Akt1的低表达预示较好的临床治疗效果。
- 魏辉张勇江静贾奇罗璐任宏
- 关键词：肺癌P53AKT1奥沙利铂肺癌干细胞
- miR-101、EZH2和MYC调控乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖能力的机制被引量：4
- 2018年
- 目的:研究miR-101、EZH2和MYC对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,并探究三者之间的调控机制。方法:以实时荧光定量PCR法检测三阴型乳腺癌组织及相应正常乳腺组织中miR-101、EZH2与MYC的表达,以及乳腺癌细胞系和正常乳腺细胞中miR-101的表达水平。以Lipofectamine^(TM) 2000将miR-101 mimics、EZH2 siRNA和MYC siRNA以及相应的阴性对照转染至MDA-MB-231细胞,Western blot法检测EZH2、MYC蛋白的表达,MTT法检测MDA-MB-231细胞的增殖能力。结果:相对于正常乳腺组织,三阴型乳腺癌组织中miR-101 mRNA的表达降低,而EZH2、MYC mRNA表达则显著升高;三阴型乳腺癌细胞中miR-101 mRNA的表达低于正常乳腺细胞MCF-10A。miR-101 mimics转染使MDA-MB-231细胞中miR-101 mRNA含量显著升高。miR-101过表达抑制EZH2、MYC的表达;EZH2敲减也抑制了MYC蛋白的表达。EZH2或MYC敲减可使miR-101 mRNA的表达显著升高。MTT实验结果示,miR-101过表达或敲减EZH2、MYC均可抑制MDA-MB-231细胞的增殖能力。结论:miR-101通过EZH2与MYC形成反馈环路调控MDA-MB-231细胞的增殖能力。
- 庞亚梅王翠翠李岁萍刘亚任宏
- 关键词：EZH2MYC增殖
- Hsa-let-7诱导肺癌细胞凋亡与G_0/G_1期阻滞及其分子机制被引量：4
- 2013年
- 目的:研究hsa-let-7对肺癌细胞功能的影响并探索其机制。方法:构建重组质粒pGenesilTM-let-7a和pGenesilTM-control,经脂质体介导稳定转染人肺鳞癌细胞系KUM-LK2、肺腺癌细胞系A549,小细胞肺癌细胞系H446,经qRT-PCR检测转染后3种肺癌细胞中let-7a的表达差异,Western blot检测let-7a下游基因Ras、ERK的表达差异,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,探索let-7a通过MAPK信号转导通路影响肺癌细胞的功能及机制。结果:转染pGenesilTM-let-7a后,let-7a在实验组肺癌细胞中的表达显著高于对照组肺癌细胞,Western blot证实p-Ras、p-ERK在实验组细胞中的表达显著低于对照组(P<0.05),而t-Ras及t-ERK的表达差异不显著(P>0.05);同时实验组肺癌细胞的凋亡率显著高于对照组肺癌细胞,实验组肺癌细胞S期比例显著低于对照组,而G0/G1期比例显著高于对照组(P<0.05)。结论:Let-7a通过作用于靶基因Ras,影响ERK的表达,调节MAPK信号转导通路,促进肺癌细胞的凋亡,使G0/G1期肺癌细胞比例增加,可能在肺癌的发生发展中起重要的作用。
- 魏辉侯俊明董明杜宁任宏
- 关键词：肺癌A549H446MAPK
- Nutlin-3和紫杉醇抑制乳腺癌MCF-7细胞株增殖和促进其细胞凋亡的作用和分子机制被引量：3
- 2017年
- 目的:研究Nutlin-3(N-3)与紫杉醇(Taxol,TAX)在抑制乳腺癌MCF-7细胞株增殖及促凋亡中的作用及分子机制。方法:使用N-3及TAX处理乳腺癌MCF-7细胞,研究二者对细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响,使用cyclin D1过表达的MCF-7细胞系(TRE3G-cyclin D1-MCF-7)研究N-3在TAX诱导的细胞凋亡及细胞增殖抑制中的作用及可能的机制。结果:N-3和TAX均能够上调乳腺癌MCF-7细胞中p53蛋白的表达,同时抑制cyclin D1蛋白的表达,从而有效地抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,促进细胞凋亡,导致细胞周期发生G_0/G_1期阻滞,S期比例下降。N-3与TAX的联用可增敏TAX的抗肿瘤效果;在TRE3G-cyclin D1-MCF-7细胞中,过表达的cyclin D1可以抑制TAX对p53的上调,从而拮抗TAX对乳腺癌MCF-7细胞的促凋亡效应及增殖抑制效应,而N-3的应用可以重新上调p53的表达,有效逆转因过表达cyclin D1而导致的TAX对乳腺癌MCF-7细胞促凋亡效应及增殖抑制效应的拮抗作用,使得TRE3G-cyclin D1-MCF-7细胞再次对TAX治疗敏感。结论:N-3及TAX可能通过调节p53及cyclin D1的表达发挥抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡的效应。
- 杜宁王猛张云锋孙欣任宏刘大鹏
- 关键词：乳腺癌CYCLIN紫杉醇细胞凋亡
- Let-7c通过阻断雌激素激活的Wnt信号通路活性而抑制乳腺癌干细胞的自我更新能力被引量：4
- 2016年
- 目的:探究Let-7c是否能通过Wnt信号通路调控乳腺癌干细胞自我更新能力。方法:分析乳腺癌临床样本中Let-7家族成员的表达情况,检测Let-7与ERα的相关性,进一步探讨Let-7c与Wnt通路活性分子表达的相关性;在细胞试验中,通过ALDH流式细胞仪分选法及微成球实验分选乳腺癌干细胞;采用免疫印迹、荧光素酶报告试验及免疫荧光实验,验证Let-7c与ERα-3'UTR是否能直接结合。结果:Let-7家族成员在乳腺癌组织中高表达,并且Let-7b和Let-7c的表达与患者临床预后显著相关;Let-7c表达与ERα表达呈负相关,Let-7c表达与Wnt信号通路活性分子呈负相关;Let-7c能够抑制雌激素受体阳性乳腺癌干细胞自我更新能力;Let-7c能够直接结合到ERα-3'UTR上,进而抑制ERα的表达和雌激素激活的Wnt信号通路。结论:我们的研究首次证实了Let-7c通过抑制雌激素激活的Wnt通路活性,而对肿瘤干细胞的自我更新能力产生抑制作用。
- 魏辉张勇江静贾奇罗璐侯俊明任宏
- 关键词：乳腺癌乳腺癌干细胞WNT信号通路
- miR-26a通过调控E2F7、Myc抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移能力被引量：4
- 2018年
- 目的:研究miR-26a对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-26a调控增殖与迁移的可能机制。方法:应用实时荧光定量PCR法(QPCR)检测乳腺癌细胞系和正常乳腺上皮细胞中miR-26a的表达水平,并检测三阴型乳腺癌组织及相应正常乳腺组织中miR-26a与E2F7 mRNA的表达水平。应用脂质体介导的方法,以miR-26a mimics与E2F7 siRNA瞬时转染MDA-MB-231细胞,实时荧光定量PCR法检测miR-26a表达水平,Western blot法检测E2F7、Myc蛋白的表达水平。MTT法检测MDAMB-231细胞的增殖能力,划痕实验检测MDA-MB-231细胞迁移能力。结果:乳腺癌细胞中miR-26a的表达水平均低于正常乳腺细胞MCF-10A,且三阴型乳腺癌细胞表达水平降低最明显。三阴型乳腺癌组织中miR-26a相对于正常乳腺组织表达减低,而E2F7 mRNA表达则显著升高。miR-26a mimics转染后miR-26a表达水平显著升高,miR-26a过表达可抑制E2F7、Myc蛋白的表达;E2F7 siRNA转染后E2F7表达水平减低,Myc蛋白表达亦减低。MTT实验结果示miR-26a过表达可抑制MDA-MB-231细胞增殖,划痕实验示miR-26a过表达可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力。结论:miR-26a可能通过抑制E2F7、Myc调控乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖与迁移能力。
- 庞亚梅王翠翠李岁萍宁谦周博任宏
- 关键词：MYC增殖迁移
- 吲哚美辛诱导食管癌EC109细胞凋亡的Smac依赖性机制被引量：3
- 2015年
- 目的:研究Smac表达下调对吲哚美辛诱导的食管癌EC109细胞凋亡的影响,并探索其内在分子机制。方法:使用Smac-siRNA脂质体法转染食管癌EC109细胞,将细胞分为空白对照组,siRNA-control阴性对照组和siRNA-Smac组。使用不同浓度的吲哚美辛处理各组细胞,MTT检测细胞活力变化,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Western blot法检测Caspase-9、3以及XIAP、survivin表达情况。结果:采用不同浓度吲哚美辛处理后,细胞活力明显受到抑制;Smac siRNA可明显降低Smac在RNA水平和蛋白水平的表达;吲哚美辛可引起各组凋亡率明显增加,单纯导入siRNA-Smac片段并不能引起细胞凋亡变化,siRNASmac联合药物能明显降低EC109细胞凋亡率(P<0.05)。在蛋白水平,siRNA-Smac组的survivin表达无明显变化,XIAP表达明显增强;Caspase-9及Caspase-3的活性片段明显表达减弱(P<0.05)。结论:NSAIDs药物吲哚美辛可诱导食管癌EC109细胞凋亡,这种作用一定程度上依赖于Smac的正常表达;Smac表达降低后其对XIAP的抑制减弱,Caspase-9和Caspase-3的活化受到抑制,而survivin在其中并不起决定性作用。
- 许崇文秦思达李硕王希方孙欣杜宁张云锋刘大鹏任宏
- 关键词：SMAC吲哚美辛NSAIDSEC109
- 唑来膦酸对乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡作用及其机制
- 2016年
- 目的:研究唑来膦酸对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用和途径。方法:培养乳腺癌MCF-7细胞株,用不同浓度梯度的唑来膦酸进行处理,MTT、Annexin V-PI双染法进行生长抑制和凋亡情况的检测和分析,Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:唑来膦酸作用于MCF-7细胞后,MTT、Annexin V-PI双染法检测发现药物对细胞呈明显的生长抑制作用,且有明显的剂量依赖性。当作用时间为48h时抑制作用最为明显。Western blot检测发现,使用唑来膦酸后,Bcl-2、Bcl-XL和Survivin 3个凋亡抑制蛋白表达水平相较于未处理组(NM)表达降低,促凋亡蛋白Bax表达明显升高。同时,Caspase-3和Caspase-9相较于未处理组,表达水平也有明显的升高,并都呈现剂量相关性。结论:唑来膦酸通过线粒体凋亡途径促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,且具有剂量依赖性。
- 毛景涛杜宁王黄震王培礼刘健刘大鹏任宏
- 关键词：乳腺癌唑来膦酸凋亡二磷酸盐
- 乳腺癌患者术后艺术心理治疗的作用被引量：5
- 2018年
- 目的探索应用艺术心理治疗对乳腺癌患者术后进行干预的效果,初步评估艺术治疗对潜在的焦虑或抑郁状态的改善作用。方法根据21基因检测结果,需要并接受乳腺癌改良根治术后辅助化疗的患者中,共29例接受了艺术心理干预,其中11例接受并完成艺术治疗的患者为规律治疗组,未完成艺术治疗的18例患者为不规律治疗组,评估艺术治疗心理干预的效果。结果规律治疗组与不规律治疗组的RS评分结果比较,差异不显著(P>0.05);规律治疗组与不规律治疗组的RS评分结果显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,规律治疗组SAS及SDS评分均显著降低,且低于对照组(P<0.05)。末次化疗周期结束后,规律治疗组与对照组患者的ECOG、KPS评分比较,差异不显著(P>0.05)。结论对21基因检测为早期乳腺癌、术后需接受辅助化疗的患者进行以艺术辅导为主要形式的心理干预,可明显改善患者的生活质量,是今后抗肿瘤治疗的重要方向。
- 李媛王猛孙欣李刚杜宁倪晓莉任宏
- 关键词：乳腺癌术后辅助化疗艺术治疗
